中国人民解放军第一军医大学分子生物学研究所 作品数:244 被引量:1,353 H指数:22 相关作者: 彭朝晖 王艳 黄海 刘翠华 陈仕荣 更多>> 相关机构: 华南理工大学食品与生物工程学院 华南理工大学生物科学与工程学院生物工程系 华南理工大学生物科学与工程学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广州市重大科技攻关项目 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 文化科学 更多>>
乙肝反义抑制治疗的研究进展 1996年 反义RNA是一种能与mRNA分子互补的RNA,可特异抑制某一mRNA的加工、翻译以及DNA的复制,特异阻断该基因的表达。 反义RNA最早在原核细胞中被发现,随后证实反义抑制为原核细胞基因表达调控的一种方式。在真核细胞中,直到1986年Williams等才首次在小鼠基因组中观察到RNA互补区,证实了真核细胞中反义抑制的存在。反义RNA的主要作用位点如下:①mRNA5’端非编码区,包括SD序列及核糖体结合位点;②mRNA5’编码区,包括起始AUG;③mRNA5’末端cap形成位点;④pre-mRNA外显子与内含子结合部位;⑤mRNApoly-A形成位点;⑥DNA复制的RNA引物;⑦外显子内部等。 反义RNA通过与RNA互补结合,在RNA的转录、蛋白质的翻译。 黄建生 王昌才关键词:乙型肝炎 SARS冠状病毒N基因的扩增与克隆 被引量:2 2004年 目的RT-PCR扩增、克隆SARS冠状病毒N蛋白基因。方法根据GenBank数据库中TOR2株的全基因组序列,利用Primer Premier 5.0软件设计引物RT-PCR巢式扩增SARS冠状病毒的N基因,PCR产物克隆后进行测序鉴定。结果序列分析表明,pMD18-T载体中已成功重组了N基因。结论N蛋白基因的扩增、克隆成功,为N蛋白的表达、N蛋白结构与功能的研究奠定了基础。 肖维威 马文丽 张宝 王艳 毛向明 彭翼飞 宋艳斌 吴清华 郑文岭关键词:严重急性呼吸综合症 传染性非典型肺炎 冠状病毒 基因扩增 N蛋白 大鼠肝tRNA^(He)基因化学合成及克隆 1997年 tRNA在蛋白质生物合成中的主要作用是转运氨基酸,此外,tRNA与第二套密码的研究及与多胺的作用亦受到重视。传统的专一tRNA制备方法,不仅步骤繁多且收获量极少(6.5 mg/4000g肝组织),难于满足进一步用NMR,ESR等技术研究的需要。利用基因工程的手段,在细胞中表达专一的tRNA可以克服传统制备方法的不足。为此我们设计合成了大鼠肝tRNAIle 基因。合成的基因全长120bp,将其中U,Ψ,D核苷酸换成T,I换成G。 钟雄霖 张璐 彭朝晖关键词:大鼠肝 分子生物学研究 氨基酰化 DNA序列分析 高效毛细管电泳法快速分离珠蛋白肽链 1999年 目的:介绍一种可快速分离临床样品中珠蛋白肽链的高效毛细管泳技术.方法:采用高效毛细管电泳仪,在未涂层毛细管上,用酸性尿素TritonX-100巯在乙醇磷酸盐电泳缓冲液,对HbA标准品及四种有代表性的临床样品制成的血红蛋白水溶液进行电泳.结果:用纳升级样品,经40min电泳即能一次性分离出α、β、Gγ、δ和Aγ五种常见的正常球蛋白肽链,且电泳图谱基线平稳,目标峰清晰.结果:高效毛细管电泳技术成功地分离了球蛋白肽链,该技术具有简便、快速、敏感、样品用量少等优点,适用于临床样品血红蛋白病的快速诊断。 廖云星 钱新华 徐湘民关键词:毛细管区带电泳 珠蛋白肽链 血红蛋白病 一种以GFP为报告基因的酿酒酵母表达载体构建的新方法 被引量:1 2003年 利用通用载体质粒融合系统UPS (univectorplasmid -fusionsystem)构建出了以GFP (绿色荧光蛋白 )为报告基因的酵母表达载体 ,经PCR、电泳、测序等手段证明了构建的准确性 。 王弘 郑文岭 马文丽 杨连生 崔东关键词:UPS 酵母表达载体 GFP 三链DNA的形成抑制DNA结合蛋白与启动子的结合 被引量:3 1998年 电泳迁移分析方法及DNaseⅠ足迹实验表明21nt脱氧寡核苷酸G3TG2TGT2G5TG2TGT(CP1)与乙肝病毒(HBV)核心启动子(Cp)片段之间三链DNA的形成有较高的特异性及稳定性.凝胶滞留实验显示,在大鼠肝细胞核提取物体外转录系统中,CP1可特异地抑制DNA结合蛋白与Cp片段的结合,而不能与Cp结合形成三链DNA的脱氧寡核苷酸CP3(TGTG2TG5T2GTG2TG3)对蛋白与Cp的结合并无抑制作用.这些结果表明,三链DNA的形成有可能抑制HBVDNA的转录. 刘定燮 王昌才关键词:三链DNA DNA 结合蛋白 启动子 乙型肝炎病毒 斑马鱼——一种理想的分子生物学研究的脊椎动物模型 被引量:9 2004年 江晓曦 郑文岭 崔东 马文丽关键词:斑马鱼 分子生物学 基因组 血清氧化修饰低密度脂蛋白检测的研究进展及意义 被引量:7 1999年 低密度脂蛋白经过氧化修饰,产生新的抗原决定簇。国内外许多研究者制备了单克隆抗体并应用于血清,证明在动物和人体内循环系统存在氧化修饰低密度脂蛋白。氧化修饰低密度脂蛋白主要分布在小项技致密LDL部分,且在接受血液透析的慢性肾功能衰竭病人和冠心病等心脑血管疾病患者的血中,含量明显增高。氧化修饰低密度脂蛋白在动脉粥样硬化中的作用得到进一步证实。测定血清氧化修饰低密度脂蛋白,可望为冠心病的病因研究和临床诊断提供一种有效手段。 黄敏珍 陈瑗 周玫关键词:低密度脂蛋白 氧化修饰 动脉粥样硬化 分子生物学技术诊断病毒性肝炎进展 被引量:1 2003年 分子生物学技术为诊断慢性病毒性肝炎提供了一种强有力的手段。可以利用它们检测血液及血液制品病毒分子 ,了解病毒活动感染情况 ,为临床的准确诊断、合理用药、判定预后提供切实可信的依据。 孙朝晖 马文丽 郑文岭关键词:分子生物学技术 病毒性肝炎 聚合酶链反应 芯片杂交中荧光标记样品定量与非定量的比较研究 2002年 比较在芯片杂交中 ,荧光标记样品定量与非定量对杂交结果的影响。其方法是 ,提取经As2 O3 作用K5 6 2细胞前后的总RNA ,逆转录成cDNA第一链 ,并分别用Cy3/Cy5标记。标记后的样品再次定量或不定量 ,但均取相同体积上样与K5 6 2芯片杂交 ,用扫描仪扫描并分析。其结果 ,标记后样品定量与不定量杂交的结果都与理论推测一致 ,但以样品定量进行杂交的效果更好 ,标记样品杂交前再次定量的 ,分析发现 2个基因表达下调 ;杂交前不定量仅取相同体积进行杂交的 ,发现 6个基因片段表达下调 ,其中只有 2个基因与细胞凋亡通路密切相关。认为在芯片的杂交检测中 ,对荧光标记样品杂交前再次定量可大大提高杂交结果的可靠性。 冯春琼 马文丽 李凌 宋艳斌 石嵘 吴清华 郭秋野 郑文岭关键词:荧光标记 AS2O3 K562细胞 杂交 总RNA 基因片段