公共文化服务平台

p16基因对骨肉瘤U-2OS细胞的抑制效应: 2012年; 目的探讨p16基因对骨肉瘤U-2OS细胞的抑制效应。方法将p16基因真核表达质粒pcDNA3-HA-p16和pcDNA3-HA质粒分别转染U-2OS细胞,并设未转染阴性对照组,采用CCK-8法检测细胞的增殖活力,PI单染法分析细胞周期的分布,DNA ladder法结合PI单染法检测细胞的凋亡情况。结果 p16基因可显著抑制U-2OS细胞的增殖(P<0.05),且在一定范围内呈剂量效应关系;p16基因可使U-2OS细胞G1期比例显著升高(P<0.05),S期比例显著降低(P<0.05);p16基因可使U-2OS细胞凋亡率明显上升(P<0.05),细胞DNA经琼脂糖凝胶电泳后呈典型的DNA ladder。结论 p16基因可显著抑制U-2OS细胞增殖,使细胞阻滞于G1期,并促进细胞凋亡。; 夏羿凡余娴冯丽袁斌; 关键词：骨肉瘤细胞增殖细胞周期细胞凋亡

小鼠B7-H4基因的真核表达及其对淋巴细胞增殖的影响被引量：3: 2012年; 目的构建小鼠B7-H4胞外段的真核表达载体,观察其在体外对淋巴细胞增殖的影响,为深入研究B7-H4在T细胞活化及移植排斥反应中的作用提供实验材料。方法提取小鼠肺、脾脏总RNA,RT-PCR反转录cDNA,以此为模板,扩增B7-H4胞外段基因,将其导入pGEM-T Easy载体,构建TA-mB7-H4质粒。用XBaI和HindIII双酶切后琼脂糖凝胶电泳分析和测序鉴定。将测序证实的mB7-H4酶切后装入MYC-HIS-EGFP-N荧光表达载体中,构建B7-H4-EGFP真核表达载体,转化JM109感受态细菌,提取重组质粒,酶切后琼脂糖凝胶电泳分析和测序鉴定。同时构建control-EGFP载体。应用脂质体法将重组质粒转染CHO细胞,经G418筛选,获得稳定表达B7-H4-EGFP的CHO细胞株,用MTT分析其分别对BALB/c小鼠、C57小鼠淋巴细胞和二者混合淋巴细胞增殖的影响。结果经测序证实,所克隆的小鼠B7-H4 cDNA和构建的重组质粒基因序列正确;转染的CHO细胞能稳定地表达跨膜型重组蛋白B7-H4;表达的B7-H4对淋巴细胞增殖具有明显抑制作用。结论成功构建了B7-H4真核表达系统,能表达有生物学活性的B7-H4分子,为进一步探讨B7-H4在T细胞活化和移植排斥反应中的作用奠定了基础。; 李丽胡为民王朝莉杨致邦; 关键词：B7-H4 真核表达淋巴细胞增殖

学科教学知识对分子生物学教学的意义及构建途径: 2014年; 学科教学知识是学科专业知识和教学知识两者融合而来,是教师在教学过程中,逐步积累发展形成起来的;它体现教师个体的价值观,具有建构性、整合性和转化性等特点;它主要通过教师的自我构建和环境促成两种途径共同形成。文章介绍了学科教学知识的概念、特征及其在医学分子生物学教学中的意义和构建途径。; 蒋振; 关键词：医学分子生物学学科教学知识教学改革

哺乳动物shRNA表达载体的构建及鉴定被引量：3: 2005年; 目的:构建带有绿色荧光蛋白报告基因的哺乳动物shRNA表达载体。方法:用PCR方法从含有人U6启动子的载体PTZU6+1中扩增U6启动子,将其克隆到pEGFP-C1载体中,通过限制性内切酶、PCR及测序对构建的载体进行鉴定,以其转染HepG2细胞后,在倒置荧光显微镜下初步观察绿色荧光蛋白的表达。结果:经限制性内切酶、PCR及测序证实,成功地构建哺乳动物shRNA表达载体。以其转染HepG2细胞后可以表达绿色荧光蛋白。结论:构建了带有绿色荧光蛋白报告基因的哺乳动物shRNA表达载体,为以后运用该载体进行RNAi相关研究奠定了一定的基础。; 杨健唐恩洁朱道银; 关键词：SHRNA RNA 哺乳动物

不同种株利什曼原虫毒力基因表达谱的初步研究: 利什曼原虫为一复杂的种团结构,不同种株的利什曼原虫引起皮肤局部损害、黏膜损害及致死性的内脏利什曼病。为了分析利什曼原虫毒力基因表达的种株期异质性,我们以含10%新生小牛血清的M199 复合培养液体外培养硕大利什曼原虫人株...; 敬保迁张仁刚张洁; 关键词：利什曼原虫毒力基因; 文献传递

抗结核重组BCG疫苗研究进展被引量：2: 2015年; 结核病仍是严重威胁人类健康的传染病之一,卡介苗(mycobacterium bovis bacillus calmette-guérin,BCG)是唯一被批准用于结核病预防的疫苗,但近年来的研究发现其免疫保护效果极不稳定,构建重组BCG成为目前新型抗结核疫苗研究的重要方向之一。本文概括性地介绍了抗结核重组BCG疫苗研究的必要性、抗结核重组BCG的研究策略与研究进展以及存在的问题和未来展望。; 杨爱琼谢勇恩; 关键词：结核疫苗重组BCG 免疫原性免疫保护性

研究生分子生物学实验教学模式的探索被引量：2: 2012年; 分子生物学实验课程是医学研究生教学中一门应用性很强的基础课程,根据该院研究生实验课程的情况,就如何培养学生基本的实验技能、学生动手能力、科研创新能力、学生分析问题和解决问题的能力等方面的教学经验进行了总结。; 王朝莉; 关键词：分子生物学教学实验教学

重组人白血病抑制因子体外诱导HL-60细胞凋亡与bc-l2及p53表达的关系被引量：1: 2004年; 目的 :探讨重组人白血病抑制因子 (rh LIF)诱导HL 6 0细胞凋亡的作用及其可能机制。方法 :不同剂量 (10～ 4 0 0 0U·ml-1)的rh LIF作用HL 6 0细胞 3d后 ,用流式细胞仪观察分析细胞周期变化并检测细胞凋亡率 ,用TUNEL法检测原位细胞凋亡情况 ;分别用免疫组化法和原位杂交法检测rh LIF作用 2、4、6d后P5 3蛋白及p5 3mRNA、bcl 2mRNA表达水平的改变。结果 :rh LIF (10～ 4 0 0 0U·ml-1)作用d 3,细胞凋亡率较对照组显著增加 ,其中以10 0 0U·ml-1组的作用最强 ;rh LIF (80 0U·ml-1)作用 2～ 6d ,P5 3蛋白和p5 3mRNA表达也同步增高 ,而bcl 2mRNA表达显著降低 (P <0 .0 1)。结论 :rh LIF能诱导HL 6 0细胞凋亡 ,该作用与P5 3蛋白表达增加和bcl; 杜冰朱道银唐恩洁; 关键词：凋亡 HL-60细胞 BEL-2

利用RNA干扰技术干扰HBeAg表达的研究被引量：1: 2008年; 构建针对乙肝病毒HBeAg前c/c区(HBV prec/c)的短发夹环RNA(shRNA)质粒(psiHBV),观察其在体内外对HBV复制的抑制作用。构建RNA干扰真核表达载体psiHBV,与1.5倍HBV真核表达质粒pHBV1.5共转染HeLa细胞,用微粒子化学发光分析仪(MEIA)分别检测细胞上清和细胞裂解液中HBeAg表达水平;用半定量PCR检测prec/cmRNA的转录情况。随后用水动力学方法,向小鼠尾静脉注射pHBV1.5建立小鼠急性乙型肝炎病毒感染模型。采用此感染模型,将pHBV1.5与在体外实验筛选到有明显抑制作用的shRNA表达载体(psiHBV4)共注射,注射后第6天用同样方法检测其干扰效果。结果显示,成功构建了针对HBV前c/c区的shRNA表达载体psiHBV4、psiHBV5、psiHBV6及无关shRNA表达载体psiC,筛选到在体外对HBeAg有明显的抑制作用的psiHBV4载体;注射pHBV1.5的动物血清高表达HBsAg和HBeAg。而共注射干扰性psiHBV4明显抑制了HBeAg的表达,与单纯感染组相比有显著差异,RT-PCR显示肝内HBV C mRNA水平亦明显降低。上述结果表明,siRNA能特异抑制HBV的复制和表达,对乙型肝炎的治疗有潜在应用前景。; 汪光蓉张国元杨健唐中唐恩洁朱道银; 关键词：乙型肝炎 SHRNA RNA干扰动物模型

幽门螺杆菌NCTC11637株Hp1501蛋白的原核表达与纯化: 2011年; 目的原核表达并纯化幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)NCTC11637株Hp1501蛋白。方法 PCR扩增H.pylori NCTC11637株Hp1501基因编码功能区序列Hp1501a,定向克隆至pQE30载体,构建重组原核表达质粒pQE30-Hp1501a,转化E.coli XL1-blue,IPTG诱导表达,并分析重组蛋白的表达形式。用Ni-NTA His柱对重组蛋白进行纯化。结果重组表达质粒pQE30-Hp1501a经双酶切鉴定构建正确,测序分析表明插入基因序列完全正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为37 000,表达量约占菌体总蛋白的21%,主要以包涵体形式存在,可与兔抗His单克隆抗体特异性结合;纯化的重组蛋白纯度达91%。结论成功原核表达并纯化了H.pylori NCTC11637株Hp1501蛋白,为H.pylori外膜蛋白的生物学功能和疫苗的研究奠定了基础。; 杨继文杨致邦敬保迁于拽拽熊玉霞王朝丽冯莉; 关键词：幽门螺杆菌生物信息学原核细胞基因表达纯化

渝B2-20050021-1　渝公网安备 50019002500403号　违法和不良信息举报中心　互联网出版许可证　新出网证(渝)字10号

川北医学院分子生物学研究所

合作机构

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

川北医学院分子生物学研究所

合作机构

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈