深圳北京大学香港科技大学医学中心 作品数:248 被引量:369 H指数:8 相关作者: 万峻 张伟 陈芸 陈小帆 杨旸 更多>> 相关机构: 北京大学深圳医院 深圳市第二人民医院 北京大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 深圳市科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 自动化与计算机技术 更多>>
携带HSV-1TK基因的逆转录病毒载体构建及在HeLa细胞中的表达 被引量:1 2010年 目的:构建携带单纯疱疹病毒脱氧胸腺嘧啶激酶基因(herpes simplex virus thymidine kinase,HSV-TK)的逆转录病毒,用于宫颈癌的治疗研究。方法:用限制性内切酶从质粒pcDNA3.1/HA-myc-His(-)Z-TK切下HSV-1TK cDNA序列,亚克隆入逆转录病毒载体pLXSN得到重组质粒pLXSN-TK,鉴定正确的阳性重组质粒经PA317细胞包装,G418筛选,在NIH3T3细胞进行病毒滴度测定。然后用病毒感染人宫颈癌细胞HeLa。PCR、RT-PCR和Western blotting方法检测HSV-1TK基因在HeLa中的整合和表达情况。结果:重组质粒pLXSN-TK经PA317细胞包装后收获病毒上清,感染HeLa细胞,检测发现HSV-1TK基因整合到细胞基因组DNA中,并且能有效的转录和翻译。结论:成功构建了逆转录病毒pLXSN-TK,该病毒能有效感染HeLa细胞,并使携带的治疗基因HSV-1TK在细胞中表达,为今后HSV-1TK基因治疗宫颈癌的研究奠定基础。 张巨峰 樊东升 张超 卢彦欣 王俊伟 牟艳芳 陈艳娜 万峻关键词:逆转录病毒 宫颈癌 带线锚钉在颈椎前路椎体-后纵韧带骨化物复合体可控前移融合术中的辅助提拉作用及效果观察 被引量:3 2022年 2017年上海长征医院史建刚教授团队首次报道颈椎前路椎体-后纵韧带骨化物复合体可控前移融合术(ante-rior controllable antedisplacement and fusion,ACAF)治疗严重颈椎后纵韧带骨化症(ossification of posterior longitu-dinal ligament,OPLL)[1],其可在不切除骨化物的前提下实现脊髓原位减压,已被证明是一种安全有效的治疗严重颈椎OPLL的新型前路减压术式[2-5].然而,目前尚无系统地针对ACAF手术制定的器械,如钛板、螺钉及提拉工具等,尤其是对于提拉工具,仍需要进一步的改进[6].我们团队在早期开展ACAF的过程中,发现使用高速磨钻或超声骨刀开槽后游离椎体-后纵韧带骨化物复合体(vertebrae-OPLL complex,VOC)不彻底,导致不能顺利地完成前移提拉,而在进一步开槽游离椎体的过程中又会增加对神经的干扰,从而导致术后神经根损伤的症状.基于此,我们开发了带线锚钉辅助提拉VOC的方法,在临床应用中取得满意疗效,现对其总结报道. 石岩 姜成浩 吴海龙 雍磊 于滨生关键词:后纵韧带骨化 带线锚钉 神经根损伤 融合术 复合体 黑色素瘤细胞株对盐霉素的敏感性及其细胞周期变化研究 被引量:2 2016年 目的探讨不同黑色素瘤细胞株对盐霉素的敏感性,及盐霉素对敏感细胞株细胞周期的影响。方法 8种不同黑色素瘤细胞株,采用不同浓度盐霉素(40、20、10、5、1.25、0.625、0.312 5μmol/L)作用3d,计算盐霉素对8种黑色素瘤细胞株的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50),挑选对盐霉素敏感的黑色素瘤细胞株;将敏感黑色素瘤细胞株分为对照组、0.1μmol/L盐霉素组、0.3μmol/L盐霉素组和1.0μmol/L盐霉素组,分别给予0、0.1、0.3、1.0μmol/L盐霉素处理细胞,处理48h时采用流式细胞仪观察各组细胞周期变化情况,1.0μmol/L盐霉素组处理24、48h后观察细胞形态的变化情况。结果 SK-MEL-19细胞对盐霉素的IC50[(0.82±0.60)μmol/L]最低,低于其他7种细胞株,SK-MEL-19细胞对盐霉素最敏感;作用48h后,1.0μmol/L盐霉素组SK-MEL-19细胞G0G1期[(39.90±3.43)%]、G2M期[(4.03±1.51)%]、S期[(33.99±1.09)%]细胞比例明显低于对照组[(48.92±1.14)%、(6.39±0.77)%、(44.69±1.36)%]、0.1μmol/L盐霉素组[(44.65±1.13)%、(8.23±0.96)%、(47.12±1.18)%]和0.3μmol/L盐霉素组[(46.18±2.88)%、(8.20±2.17)%、(45.62±1.83)%](P<0.05),对照组及0.1、0.3μmol/L盐霉素组细胞周期比例两两比较差异均无统计学意义(P>0.05);1.0μmol/L盐霉素组作用24h后部分SK-MEL-19细胞出现空泡,作用48h后细胞出现明显死亡,且细胞周期有小凋亡峰(subG1峰)出现,有细胞凋亡存在。结论盐霉素对SK-MEL-19黑色素瘤细胞株有较强杀伤作用,此杀伤作用可能是通过诱导细胞凋亡实现的。 郝颖华 李玉霞 周游 方征宇关键词:黑色素瘤 盐霉素 细胞周期 凋亡 女性生育力保护的现状与进展 被引量:4 2022年 生育力保护是一个新兴的、快速发展的跨学科领域。近年该领域研究取得了巨大进展,生育力保护新技术得到了广泛应用。实施生育力保护是保留生育能力和解决不孕问题的重要环节,首先,能保护患者的生育能力免受疾病或环境因素损伤,如年轻肿瘤患者卵子或卵巢组织的体外冷冻保存;其次,以生育为主要目的的手术,解决部分不孕患者的病因,修复或重建生殖器官的结构与功能;最后,作为辅助生殖措施的补充治疗,可以提高辅助生殖的成功率。本文着重强调生育力保护方面的主要发展,指出这一新的研究领域仍然面临的挑战,并就中国生育力保护的发展提出建议。 吴瑞芳 李长忠关键词:癌症治疗 健康管理 江苏省非慢性病居民慢性病高风险人群及高风险特征检出情况 被引量:3 2021年 目的了解江苏省非慢性病居民慢性病高风险人群及高风险特征检出情况,为开展社区慢性病高风险人群健康管理和生活方式干预提供参考依据。方法于2015年9月—2018年6月采用分层整群抽样方法在江苏省苏州市常熟市、南通市海安市、连云港市东海县、徐州市贾汪区、常州市和淮安市6个项目点抽取27430名35~75岁非慢性病常住居民进行问卷调查、体格检查和实验室检测。结果江苏省27430名非慢性病居民中,检出慢性病高风险人群18675人,慢性病高风险人群检出率为68.08%,标化检出率为65.00%;非慢性病居民5个高风险特征检出率从高到低依次为血压超标(32.80%),血糖超标(22.38%)、腰围超标(22.20%)、现在吸烟(15.65%)和血清总胆固醇超标(15.48%);18675名慢性病高风险人群中,具有1、2、3和4~5个慢性病高风险特征者分别占37.3%、22.4%、7.2%和1.2%。结论江苏省非慢性病居民慢性病高风险人群检出率较高,主要高风险特征为血压超标,应根据慢性病高风险人群及高风险特征制定个性化的健康管理方案以降低慢性病的发病率。 仝海员 张梦梦 覃玉 苏健 崔岚 杜文聪 缪伟刚 周金意关键词:慢性病 高风险人群 检出情况 钙化在伴有桥本甲状腺炎的甲状腺乳头状癌中的意义 被引量:1 2020年 桥本甲状腺炎(Hashimoto′s thyroiditis,HT)的病理和超声表现复杂,HT背景下的甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)鉴别诊断有难度。超声特征上微钙化是诊断PTC的危险因素,而粗钙化一般提示为良性病变,但PTC合并HT发生的钙化现象多见且类型多样化,粗钙化的发生率可能高于微钙化,各类钙化皆提示有恶性风险。钙化可能与癌症发生、侵袭和转移相关,HT背景下的钙化现象需引起警惕,要高度怀疑是否合并PTC的发生。 刘荣耀 李祥翠 周雅琪 李吉平 龚婷关键词:桥本甲状腺炎 甲状腺乳头状癌 微钙化 超声特征 癌症发生 腺病毒介导HSV-TK基因血管靶向治疗裸鼠皮下人肝癌细胞移植瘤 被引量:3 2006年 目的:探讨重组腺病毒介导胸苷激酶系统通过血管靶向治疗裸鼠皮下人肝癌细胞移植瘤的疗效及作用机制。方法:32只BALB/c鼠皮下接种建立裸鼠皮下人肝癌细胞移植瘤模型,当瘤体达100 mm^3时随机分成4组,分别为更昔洛韦(GCV)组(Ⅰ)、空载体病毒组(Ⅱ)、重组腺病毒CMV-TK组(Ⅲ)及重组腺病毒AdKDR-TK组(Ⅳ)。各治疗组瘤内分别注入重组腺病毒液及空载体病毒液,重组腺病毒治疗组在病毒给予24 h后分别在腹腔内注射GcV,连续10 d;对照组腹腔内注入GCV。观察各组瘤体生长情况及免疫组化法测定肿瘤微血管密度(MVD)。结果:与对照组比较,第Ⅲ、Ⅳ组经治疗后肿瘤的生长均受到了明显的抑制,其抑瘤率分别为12.3%和24.5%(两者比较,P<0.05)。肿瘤组织内的MVD,Ⅰ组为(37.4±8.6)个/mm^2、Ⅱ组为(30.6±7.8)个/mm^2、Ⅲ组为(27.6±7.1)个/mm^2、Ⅳ组为(10.7±4.1)个/mm^2,其中Ⅲ组与Ⅱ组(P<0.05)、Ⅳ组与Ⅱ组(P<0.01)、Ⅳ组与Ⅲ组(P<0.01)之间的肿瘤内MVD比较均有统计学差异。结论:重组腺病毒介导以KDR为启动子的胸苷激酶系统能够通过血管靶向性地有效抑制肿瘤的生长。 李宝金 宁长青 张超 郝颖 刘晓平 区庆嘉关键词:血管靶向 重组腺病毒 一种伽玛脑波中枢神经系统器质性疾病防治眼镜 本发明属于医疗仪器设备技术领域,具体涉及一种伽玛脑波中枢神经系统器质性疾病防治眼镜。其包括镜架、复合镜片、光源点阵、控制单元、供电单元和呼吸感测机构;控制单元内设置有场景模块、呼吸跟随模块、音频同步模块和40Hz音频源。... 郑婷婷 陈芸泌尿生殖系统单基因病研究进展 2011年 单基因遗传病(single gene disorders/monogenic disorders)简称单基因病,是指单一基因突变引起的疾病,符合孟德尔遗传方式,所以又称为孟德尔遗传病(mendelian genetic diseases)。单基因病的研究进展加深了对致病突变和基因调控机制的理解,并有效促进了诊断工具的发展, 杨锐林 蔡志明 梁朝朝关键词:单基因病 泌尿生殖系统 单基因遗传病 基因调控机制 基因突变 GENE 大鼠MUPP1蛋白PDZ8结构域的生化及晶体结构特性(英文) 被引量:2 2015年 多重PDZ结构域蛋白1型(MUPP1)是一种存在于上皮细胞和神经细胞内含有13个PDZ结构域的重要支架蛋白.在上皮细胞中,MUPP1蛋白在紧密连接结构的形成和上皮细胞的极化过程中发挥重要作用.而在中枢神经系统中,MUPP1基因的1个提前终止突变导致了其最后12个PDZ结构域的缺失,以及严重的先天性脑积水.此外,MUPP1蛋白的表达水平与酒精依赖性和药物戒断的严重性也具有显著的相关性.因此,对MUPP1蛋白所含的PDZ结构域进行纯化和性质鉴定,将有助于深入研究MUPP1蛋白的功能和分子机制.在本文研究中,利用亲和纯化和分子筛技术,对大鼠来源的MUPP1蛋白的第8个PDZ结构域进行了表达和纯化.多角度激光光散射的数据表明:MUPP1-PDZ8结构域在溶液中为单体,分子量为16.4 k D.圆二色谱结果表明,MUPP1-PDZ8结构域具有较好的二级结构折叠,测得其熔解温度为71.6摄氏度,暗示该PDZ结构域在溶液中非常稳定.最后,MUPP1-PDZ8结构域的晶体结构显示,该结构域属于I型PDZ结构域,包含3个α螺旋和6个β折叠.其中GLGL模块、β折叠B上的1 351位亮氨酸,以及α螺旋B上的1 405位异亮氨酸/1 398位组氨酸形成的PDZ结合口袋,可以特异性地与其目标蛋白质的羧基末端相结合.综上所述,本文的研究提供了MUPP1-PDZ8结构域的生化特性,以及该结构域与其目标蛋白质相互作用的分子机制,这将为MUPP1蛋白的功能研究提供生物化学与结构生物学的理论基础. 吕颜宏 李健潮 朱海丽 刘伟关键词:PDZ结构域