南京军区军事医学研究所
- 作品数：150 被引量：326H指数：9
- 相关作者：杨龙姜克俭孟祥瑞胡云龙操敏更多>>
- 相关机构：南京医科大学江苏省人民医院南京农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省重点学科建设基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学化学工程更多>>
- 传染性法氏囊病病毒VP2与C3d串联基因重组表达质粒的构建及其免疫功能研究被引量：2
- 2012年
- 为提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因核酸疫苗的免疫效力,本研究根据已发表的鸡源补体C3d序列,设计并合成在5'端添加编码连接肽(Gly4Ser)2序列的C3d基因。用同尾酶BglⅡ和BamHⅠ构建含有3拷贝C3d与VP2基因融合的重组表达质粒pcDNA-VP2-3C3d。用脂质体法转染BHK21细胞,48 h后,westernblot分析表明,表达的重组蛋白为162 ku;间接免疫荧光试验检测转染细胞中具有特异性荧光。用pcDNA-VP2-3C3d与前期构建的pcDNA-VP2分别免疫2周龄SPF鸡,二免14 d后,间接ELISA法检测IBDV抗体效价,pcDNA-VP2-3C3d组抗体水平显著高于pcDNA-VP2组;MTT法检测鸡脾淋巴细胞增殖活性,pcDNA-VP2-3C3d组免疫诱导的特异性淋巴细胞增殖活性显著高于pcDNA-VP2组(p<0.05)。本研究表明C3d可以增强VP2基因免疫诱导的IBDV特异性体液和细胞免疫应答。
- 马金荣欧阳伟王永山吴晓悠朱向东张海彬范红结王忠灿唐雨德
- 关键词：VP2基因基因免疫
- 医院管理者主要精力应抓什么被引量：2
- 1995年
- 李富荣
- 关键词：医院管理者医院建设医院分级管理医德医风医疗护理质量学科建设
- 狂犬病人源化治疗性中和抗体的研发
- 朱进冯振卿王长军刘新建林红李琛管晓虹
- 传染性法氏囊病病毒检测系统的实验研究
- 为了建立传染性法氏囊病病毒(IBDV)检测系统,本研究在同一个实验技术平台上对9种IBDV检测方法进行了比较分析。IBDV野毒株盲传4~5代可适应于鸡胚和鸡胚成纤维细胞,死亡胚体水肿、出血,病变细胞圆缩、脱落。4个血清1...
- 王忠灿唐雨德王永山施正良欧阳伟
- 关键词：家禽病毒传染性法氏囊病病毒
- 文献传递
- 抗人RBC血型B抗原双价小分子抗体基因的构建与表达
- 1999年
- 目的： 分离抗人红细胞血型Ｂ抗原单克隆抗体（ｍＡｂ） ５Ｄ１２ 可变区基因， 构建并表达其双价小分子抗体（ｄｉａｂｏｄｙ） 融合蛋白， 为用原核细胞生产抗血型Ｂ抗原工程抗体进行基础研究。方法： 设计合成抗体重、轻链可变区引物， 通过加端ＰＣＲ技术， 在ｍＡｂ ５Ｄ１２ ＶＨ 和ＶＬ基因两端引入连结短肽和适当的限制性酶切位点，体外连接构建５Ｄ１２ ｄｉａｂｏｄｙ 基因， 并将其克隆入融合表达载体ｐＧＥＸ４Ｔ２ 中， 在Ｅ－ｃｏｌｉ ＴＧ１ 中表达。运用ＰＣＲ和双脱氧核苷酸链末端终止法分析其核苷酸序列。结果： ＤＮＡ 序列分析表明， ５Ｄ１２ ｄｉａｂｏｄｙ 基因全长为６９９ｂｐ；其中ＶＨ 长３５１ｂｐ ， 编码１１７ 个氨基酸； ＶＬ 长３２４ｂｐ ， 编码１０８ 个氨基酸， 两者以五肽连接头相连； 重组体表达产物经ＳＤＳＰＡＧＥ显示， ＧＳＴ５Ｄ１２ ｄｉａｂｏｄｙ 表达产物的相对分子质量（ Ｍｒ） 为５１ ０００ 左右， 与预期结果相符。光密度扫描结果表明， ＧＳＴ５Ｄ１２ ｄｉａｂｏｄｙ 融合蛋白占菌体总蛋白的２４－６％ ， 表达产物主要以不溶性的包涵体形式存在。结论： 成功地构建并表达了５Ｄ１２ 双价小分子抗体基因，
- 王长军唐家琪李先富潘秀珍操敏
- 关键词：ABO血型抗原基因工程抗体
- 用聚合酶链反应及核酸探针从新城疫病鸡体内检出传染性法氏囊病病毒
- 1994年
- 用鸡传染性法氏党病病毒（ＩＢＤＶ）逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和地高辛（ＤＩＧ）标记的ｃＤＮＡ探针组织印迹杂交试验，从某鸡场爆发新城疫（ＮＤ）的病鸡脾及法氏囊组织中检测到了ＩＢＤＶ，证明该ＮＤ病鸡存在ＩＢＤＶ的亚临床鸡鸡感染。进而分析了该疫情的爆发原因，并对鸡传染性法氏囊病的亚临床型感染和免疫程序进行了研究。
- 王永山周宗安翟春生王元伦方元顾志香肖元廷
- 关键词：鸡病新城疫病毒IBD
- 传染性法氏囊病病毒检测系统的建立被引量：15
- 2008年
- 为了建立传染性法氏囊病病毒(IBDV)检测系统,本试验在同一个试验技术平台上对9种IBDV检测方法进行了比较分析。IBDV野毒株盲传4~5代可适应于鸡胚和鸡胚成纤维细胞,死亡胚体水肿、出血,病变细胞圆缩、脱落。4个血清Ⅰ型IBDV毒株,用交叉中和试验可进一步分为3个血清亚型。用RT-PCR/SSCP技术分析4个毒株,扩增产物的电泳迁移率有差异。AGP、间接ELISA、夹心抑制ELISA以及中和试验等4种方法同时检测不同来源血清样品中的IBDV抗体,其他3种方法比AGP具有更高的敏感性,敏感度相差104倍。用AGP检测法氏囊组织样品,抗原效价可达到1∶10,而细胞培养物和病鸡粪便则没有出现沉淀线;3种样品用夹心ELISA、RT-PCR、cDNA探针斑点杂交、RT-PCR/SSCP检测以及病毒分离等5种方法检测,均为阳性。
- 王忠灿王永山唐雨德谭维国施正良欧阳伟
- 关键词：传染性法氏囊病病毒
- 重组人红细胞生成素的研制、试生产和临床应用
- 史江方君胡云龙聂海洋刁勇吴钢陶开华张广仁郑法雷
- 重组人红细胞生成素是临床上肾性贫血的特效治疗药物，也可治疗非肾性贫血。RHEPO是目前可用于临床治疗的基因工程药物中技术最成熟，临床疗效最确切，销售额最高的一种药品。在国内首先成功地采用DNA重组技术克隆了人EPO-CD...
- 关键词：
- 关键词：重组人红细胞生成素肾性贫血基因工程药物
- 兔出血症病毒NJ85株衣壳蛋白变异性分析及立体结构预测
- 用分子克隆技术从兔出血症病毒(RHDV)中国早期流行株NJ85中成功克隆出VP60基因,序列分析表明该基因长度为1740nt,编码579aa.利用GenBank数据库,NJ85与WX84、TP二个RHDV中国毒株VP60...
- 王永山陆承平周宗安
- 关键词：分子克隆
- 文献传递
- 乙型肝炎病人尿细胞中HBV的实验研究
- 1994年
- 本文采用间接免疫荧光法（ＩＦ），ＲＰＨＡ法，ＥＬＩＳＡ法及斑点杂交技术检测１０例无症状ＨＢ－ｓＡｇ携带者及８９例乙肝病人尿细胞中的ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及ＨＢＶＤＮＡ，发现尿细胞中有ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶＤＮＡ存在。结果提示：乙肝无症状携带者及乙肝病人尿细胞中具有ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶＤＮＡ，因此更进一步证实尿液具有传染性。
- 谭维国李法卿吴玉强吴德福龚希平
- 关键词：尿细胞乙型肝炎病毒
