中国农业科学院研究生院生物化学与分子生物学实验室
- 作品数：7 被引量：29H指数：3
- 相关作者：李焕杰姜声华白雪晶王智更多>>
- 相关机构：东华理工大学生物系生物科学与技术系东华理工大学生物系更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学化学工程石油与天然气工程更多>>
- 脱硫工程菌的构建及其脱硫性能分析被引量：3
- 2008年
- 以专一性脱硫菌德氏假单胞菌Pseudomonas delafieldii R-8为出发菌株,利用pPR9TT穿梭质粒构建脱硫操纵子表达载体,转化原始菌培养得到1株多拷贝脱硫基因的脱硫工程菌R-8-1,并对其脱硫性能进行了研究。结果表明,在同样的生物催化脱硫反应条件下,工程菌的脱硫活性达到6.25μmol DBT/g dry cell/h,是原始菌的2倍;柴油的脱硫试验表明,在12h内工程菌静息细胞能将柴油硫含量从310.8mg/L降至100.1mg/L,脱硫率达到68%,而原始菌为53%。进一步比较了重组质粒pPR-dsz在工程菌株中传代的稳定性,试验表明pPR-dsz在工程菌株R-8-1中具有良好的遗传稳定性。此研究为生物脱硫提供了1株优良的工程菌株,并为该技术的应用提供了参考。
- 李焕杰余志坚熊小超李玉光李信
- 关键词：生物脱硫工程菌二苯并噻吩
- 棉花黄萎病、枯萎病拮抗细菌的筛选及其生长特性的研究被引量：18
- 2007年
- 从广西大学、中国农业科学院植物保护研究所黄萎病、枯萎病发病较轻的试验棉田根围土中筛选出5株拮抗性能较高的细菌,其中一株S6经过16s rDNA鉴定为枯草芽孢杆菌。经过测定,S6的最适生长温度为28℃,最适pH为7,对NaCl的耐受达到10%。
- 王娜许雷
- 关键词：棉花黄萎病棉花枯萎病拮抗枯草芽孢杆菌
- 德氏假单胞R-8菌脱硫的“硫饥饿”诱导机理被引量：3
- 2009年
- 以专一性脱硫菌德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R-8为出发菌株,构建了含有重组质粒pRT-D的重组菌株R-8-D.在不同硫酸盐浓度条件下,研究了R-8和R-8-D脱硫的"硫饥饿"诱导机理,结果表明,在充足的Na2SO4(>0.023mmolL-1)条件下,R-8菌首先利用硫酸盐生长,脱硫酶的合成受阻遏,DBT不被利用,而R-8菌处于"硫饥饿"状态(Na2SO4浓度≤0.023mmolL-1)时,诱导了脱硫酶的合成,能利用DBT生长;Na2SO4在临界浓度以上时,R-8-D菌阻遏了脱硫基因的报告基因lacZ的表达,低于临界浓度时不抑制lacZ表达.本实验结果从细胞和分子水平上证实了R-8菌脱硫属"硫饥饿"诱导类型,并首次确定了脱硫微生物"硫饥饿"诱导的硫酸盐临界浓度为0.023mmolL-1,为构建高活性的、不受硫酸盐抑制的脱硫工程菌提供了理论依据和技术支持.
- 余志坚李焕杰王海胜李玉光闫艳春李信
- 关键词：硫酸盐DBT
- 脱硫菌Rhodococcus sp．LY822专一性脱硫活性及相关基因的研究被引量：8
- 2008年
- 以专一性脱硫菌Rhodococcus sp.LY822质粒DNA为模板,利用已知的脱硫基因序列设计引物,PCR扩增得到了3个脱硫基因片段dszA,dszB和dszC.构建了相应的表达质粒pETA,pETB和pETC,在转化大肠杆菌BL21(DE3)中表达,得到了dszA,dszB和dszC基因的融合表达产物.SDS-PAGE分析结果显示,蛋白带分子量分别为50,40和45kDa.3种重组菌BL21(DE3)(pETA),BL21(DE3)(pETB)和BL21(DE3)(pETC)的无细胞粗提液(2mL)的活性检测结果表明,DszC酶的粗提液反应30min能够将0.02mmol/L二苯并噻吩完全转化为二苯并噻吩砜,DszA酶的粗提液能够将0.01mmol/L二苯并噻吩砜完全转化为羟基联苯亚磺酸盐,DszA和DszB酶的粗提液联合作用能够将0.01mmol/L二苯并噻吩砜完全转化为2-羟基联苯,证明LY822对二苯并噻吩的降解符合专一性脱硫的'4S途径'.
- 白雪晶熊小超姜声华刘会洲李信
- 关键词：二苯并噻吩生物脱硫红球菌
- 德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R-8脱硫基因启动子的克隆与鉴定被引量：2
- 2009年
- 利用PCR方法,从专一性脱硫菌德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R-8中克隆了脱硫基因启动子系列缩短的片段,连接至启动子探测型表达载体pPR9TT,电转原始菌R-8,并测定重组菌R-8-P中的报告基因LacZ表达量。结果表明脱硫基因核心启动子区缩短至300 bp,并对启动子序列进行了预测。
- 余志坚李焕杰王海胜李信
- 关键词：启动子
- 多聚磷和聚磷酶研究进展
- 2008年
- 多聚磷在生物体内广泛存在,并且发挥重要作用。生物体内的多聚磷是由聚磷酶催化合成的。概述了多聚磷的生物学功能,聚磷酶的功能及多聚磷和聚磷酶的应用。
- 王智许雷
- 关键词：生物进化生命活动
- 血红蛋白基因在脱硫菌R-8中的表达及其在柴油脱硫中的应用被引量：4
- 2009年
- 【目的】旨在构建一株优良的工程菌株,对血红蛋白基因在柴油的生物脱硫领域的应用做初步的探索。【方法】以德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R-8为出发菌株,通过基因工程的手段,构建透明颤菌(Vitreoscilla)血红蛋白基因表达质粒并电击导入原始菌株,得到重组菌P.delafieldiiR-8-2。【结果】R-8-2菌株的CO差光谱在419nm处有特征峰出现,表明血红蛋白在脱硫菌中得到了有效表达。R-8-2菌株和R-8菌株相比,生长得到改善,相同培养条件下菌体密度比R-8提高了20%,最大脱硫活性能够达到R-8的2.4倍。在实际柴油脱硫实验中,R-8-2菌株能将柴油的硫含量降至96.6mg/L,脱硫率达到69.9%,而R-8仅为57.2%。【结论】R-8-2是在较低溶氧条件下仍能保持较高的菌体密度和脱硫活性的基因工程菌株,具有良好的应用前景,该研究为血红蛋白基因在生物脱硫工业的应用提供参考。
- 李焕杰余志坚熊小超李玉光王海胜李信
- 关键词：生物脱硫透明颤菌血红蛋白基因
