中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室 作品数:293 被引量:925 H指数:15 相关作者: 田国斌 谭丹 王晶 张建林 张平静 更多>> 相关机构: 东北农业大学动物医学学院 内蒙古农业大学动物科学与医学学院 华南农业大学动物科学学院 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 环境科学与工程 更多>>
防治禽流感复方中药的安全性实验 被引量:1 2005年 李艳华 胡守萍 闫清波 田国彬 付德霞 佟恒敏 于康震关键词:禽流感 复方中药 急性毒性 病理变化 体重 含氯复方消毒剂对禽流感病毒灭活效果的研究 被引量:3 2005年 采用K le in-Defors悬浮灭活试验与鸡胚感染试验方法,对含氯复方消毒剂灭活H5N1和H9N2亚型禽流感病毒的效果进行了检测。结果,该含氯消毒剂在125 mg/L以上时,对两种禽流感病毒的杀灭率可达到99.99%以上。在实际应用中,推荐该消毒剂的使用浓度为有效氯167 mg/L。结论,该复方含氯消毒剂对两种禽流感病毒有很好的灭活效果。 施建忠 田国彬 李雁冰 冯菊艳 陈化兰关键词:含氯消毒剂 禽流感病毒 H5N1亚型禽流感病毒A/Anhui/2/2005活候选疫苗株的构建及其对鸡致病性的研究 2008年 A/Ann Arbor/6/60ca(H2N2)冷适应疫苗供体株具有冷适应性、温度敏感性和致弱性表型。本研究利用基因工程技术体外合成A/Ann Arbor/6/60ca(H2N2)冷适应疫苗株具有冷适应性的内部基因PB2、PB1、PA、NP、M、NS,从A/Anhui/2/2005(H5N1)毒株获得HA、NA,并对HA基因上的多个连续碱性氨基酸基序进行了缺失修饰。将上述8个基因片段分别克隆至pBD双向表达载体中测序鉴定。利用质粒反向遗传操作系统,将构建正确的8个重组pBD质粒转染Vero细胞拯救病毒。经RT-PCR和序列测定鉴定,结果表明本试验成功获得了一株H5N1亚型A/Anhui/2/2005重组病毒,将其命名为AH/AAca,救获的重组病毒具有预期的温度敏感性和冷适应性生物学特性。随后进行了AH/AAca人工感染SPF鸡的感染性和致病性试验,结果表明其对鸡既无感染性,也无致病性。AH/AAca的获得为评价其在小鼠、非人类灵长目等动物模型上的保护效力的研究打下了坚实基础,为我国预防人禽流感的流行建立了技术储备。 樊树芳 许传田 索永兵 陈化兰关键词:禽流感病毒 反向遗传操作 温度敏感性 环洞庭湖区活禽批发市场和水禽场H6亚型禽流感监测 被引量:2 2015年 为了解环洞庭湖区活禽批发市场和水禽场H6亚型禽流感病毒的分布和流行情况,分别于2009—2011年对环洞庭湖地区活禽批发市场、2011—2013年对水禽场的H6亚型禽流感进行了系统监测。对在活禽批发市场上采集的拭子样品先由尿囊腔接种SPF鸡胚,然后用血凝试验(HA)测定所收集的尿囊液,对HA测定有滴度的再进行血凝抑制试验(HI),并与RT–PCT方法相结合鉴定病毒的亚型。检测结果显示:在环洞庭湖区的5个活禽批发市场上都分离到H6亚型禽流感,并且在鸡、鸭、鹅拭子中都分离到该病毒,总的分离率为6.49%;水禽场H6亚型禽流感病毒群体阳性率达3.6%,拭子的H6亚型病毒分离率为0.29%,活禽批发市场鸭拭子H6亚型禽流感病毒分离率为9.58%,表明市场环节水禽H6亚型禽流感的隐性带毒率比养殖环节高,在一定程度上说明禽流感在活禽批发市场存在水平传播的风险。 黄建龙 王昌建 邓国华 范仲鑫 何世成 朱春霞 唐小明 刘道新关键词:洞庭湖区 一株H4亚型禽流感病毒全基因组序列测定及遗传演化分析 被引量:5 2011年 2008年对我国南方活禽市场进行流行病学监测时从鸭体内分离鉴定一株H4亚型禽流感病毒(AIV),命名为A/duck/Guangxi/912/2008(H4N2)(缩写为DK/GX/912/08)。为了解该株H4亚型AIV的来源、特征及其分子演化规律,本研究对其全基因序列进行测定,并与GenBank登录的相关病毒进行遗传演化分析。结果表明:DK/GX/912/08HA基因切割位点附近的氨基酸序列(PEKASR↓GLF)符合低致病力AIV的特征,其分子遗传演化关系属于东半球谱系的欧亚分支;NA基因与A/duck/Jiangxi/1286/2005(H5N2)在同一分支内,核苷酸同源性为98.1%;PB2基因与A/duck/Nanchang/4-165/2000(H4N6)处于同一分支;而NS基因与A/duck/Jiangxi/1786/03(H7N7)同源性最高。因此,推测DK/GX/912/08可能是不同来源的基因在鸭体内经过复杂重组演变的一株重组病毒。 刘丽玲 李雁冰 张翼 段振华 施建忠 田国彬 曾显营 刘娣 华育平 陈化兰关键词:禽流感病毒 遗传演化分析 H5N1亚型禽流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:4 2011年 为制备抗H5N1禽流感病毒(AIV)的单克隆抗体(MAb),本研究以灭活的H5N1亚型A/Chicken/Guangdong/S2261/2009(H5N1GD261)株免疫4周龄~6周龄BALB/c雌鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,经间接ELISA及HI筛选获得了3株能稳定分泌抗HA的MAb杂交瘤细胞,分别命名为1A4、2F5和3D3。MAb亚类鉴定表明,2F5为IgM类,其它为IgG2a亚类,轻链均为κ链。经血凝抑制检测,3株MAb均能与H5亚型的AIV结合,并具有较好的型广谱性。 崔佳莹 李印 于扬 张文亮 邓国华 陈化兰关键词:禽流感病毒 血凝素 单克隆抗体 血凝抑制 H5N1亚型AIV NS1基因在大肠杆菌中的表达 2007年 根据已测得的H5N1亚型禽流感病毒的NS基因序列,设计并合成一对特异性引物NS1U/NS1L,利用RT-PCR方法扩增出该毒株的NS1基因。将酶切处理后的基因片段定向克隆到原核表达载体pET-32a(+)上,通过酶切分析及序列测定,鉴定出了NS1基因片段的阳性重组子。转化BL21大肠杆菌感受态细胞后,经IPTG诱导和SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,成功表达出大小约45.0kD的NS1融合蛋白,表达产物主要存在于包涵体中。用West-ern-Blotting证实重组融合蛋白可以特异性地被标准阳性血清所识别。 刘畅 焦培荣 刘威龙 侯勇跃 陈化兰关键词:H5N1亚型禽流感病毒 非结构蛋白 克隆 用鸡体偏嗜性密码子对H5亚型禽流感病毒HA基因的优化与构建及其DNA疫苗体外表达研究 不同物种间细胞在蛋白翻译过程中具有密码子使用的偏嗜性,鸡与A型流感病毒保护性免疫原HA蛋白氨基酸密码子使用频率存在着明显差异.为此,利用寡核苷酸合成、重叠延伸PCR及限制酶切法构建了密码子优化的A/Goose/Guang... 姜永萍 李呈军 张洪波 步志高 张芳芳 于康震 陈化兰关键词:HA基因 重叠延伸PCR 间接免疫荧光 DNA疫苗 文献传递 一种含碘消毒剂对禽流感病毒杀灭效果的研究 2004年 施建忠 田国彬 李雁冰 冯菊艳 陈化兰关键词:禽流感 病毒 粘蛋白 RNA病毒 正粘病毒科 五株H5N1亚型禽流感病毒对小鼠致病性的研究 本研究从安徽省的不同地方分离了五株不同宿主来源的禽流感病毒,在农业部动物流感重点开放实验室进行血清学鉴定为H5N1亚型.为了全面了解五株安徽分离株对哺乳动物的潜在危害,进行五株禽流感病毒人工感染BALB/c小鼠的试验,旨... 朱启运 魏建忠 李雁冰 姜永萍 邓国华 田国斌 陈化兰关键词:禽流感 禽流感病毒 血清学鉴定 分子生物学特性 文献传递