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中国农业科学院北京畜牧兽医研究所家养动物遗传资源与种质创新重点开放实验室: 作品数：29 被引量：147H指数：6; 相关作者：李勇牟玉连傅田更多>>; 相关机构：华中农业大学动物医学院华中农业大学动物科学技术学院重庆大学生物医学工程联合学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>

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绵羊雌激素受体基因外显子4多态性分析被引量：7: 2008年; 根据GenBank发表的人、鸡、大鼠雌激素受体(estrogen receptor,ESR)基因外显子4的序列设计1对引物,采用PCR-SSCP技术分析ESR基因外显子4在高繁殖力绵羊品种(小尾寒羊和湖羊)和低繁殖力绵羊品种(特克塞尔、中国美利奴、考力代和杜泊)中的单核苷酸多态性,同时研究该基因对小尾寒羊高繁殖力的影响。结果表明,ESR基因的此对引物扩增片段在所检测的6个绵羊品种中均不存在PCR-SSCP多态性,说明所检测的ESR基因外显子4序列比较保守,该区域可能不是影响绵羊高繁殖力的功能结构域。; 狄冉贾立华储明星陈宏权方丽; 关键词：绵羊繁殖力雌激素受体基因 PCR-SSCP

猪前脂肪细胞为核供体生产表达绿色荧光蛋白的转基因克隆胚胎被引量：2: 2007年; 分离培养了成年猪前脂肪原代细胞,并对前脂肪细胞向成熟脂肪细胞进行诱导分化,油红O染色法鉴定了脂肪细胞。利用脂质体介导的方法将质粒pEGFP-N1转染前脂肪细胞,经过G418筛选获得了阳性细胞株。然后分别以前脂肪细胞、转绿色荧光蛋白(GFP)前脂肪细胞及胎儿成纤维细胞为核供体进行体细胞核移植,结果表明:前脂肪细胞(8.8%)和胎儿成纤维细胞(8.3%)的囊胚发育率无显差异著(P>0.05);与前脂肪细胞相比,转基因前脂肪细胞的囊胚发育率降低,但差异不显著(3.7%vs.8.8%,P>0.05)。前脂肪细胞为核供体生产转基因克隆胚胎,能够获得转基因囊胚。虽然囊胚发育率不高,但为生产脂肪细胞转基因克隆猪奠定了基础。; 潘登科万荣刘吉牟玉莲张莉李奎冯书堂; 关键词：前脂肪细胞绿色荧光蛋白

猪PGAM2基因的克隆、序列特征及表达分析被引量：5: 2008年; 克隆了猪PGAM2基因的cDNA序列,并利用生物信息学方法进行分析。所得cDNA序列全长913 bp,包含1个完整的开放阅读框,编码253个氨基酸。序列分析表明,该基因预测编码蛋白与已报道的狗（97.6%）、人（96%）、黑猩猩（96%）、大鼠（94.5）和小鼠（94.1%）等物种的PGAM2蛋白高度同源其在N端和C端分别存在1个ATHR和QGKA模体,在14~15AA处存在1个信号肽切割位点,含有1个典型的碳水化合物运输和代谢（GPMA）保守结构域。该基因在猪胚胎骨骼肌发育过程中差异表达,且在通城猪和长白猪中呈现不同表达模式。在通城猪中,PGAM2基因呈波浪式表达,即妊娠65 d时表达水平最高,且各时间点表达水平差异极显著（P〈0.01）。在长白猪中呈上调表达模式,妊娠65和90 d时表达丰富,且极显著高于妊娠33 d（P〈0.01）。品种间比较来看,在妊娠33和65 d时两品种表达水平相当,但妊娠90 d时长白猪中的表达水平极显著高于通城猪（P=0.006）。; 伍晓雄唐中林李勇杨述林储明星马月辉李奎

褪黑激素受体1A基因外显子2与小尾寒羊高繁殖力的关联被引量：6: 2008年; 以褪黑激素受体1A(melatonin receptor 1A,MTNR1A)基因为候选基因,通过2种限制性内切酶(MnlⅠ、RsaⅠ),采用PCR-RFLP技术检测MTNR1A基因第2外显子主要序列在高繁殖力绵羊品种小尾寒羊中的单核苷酸多态性,同时研究该基因对小尾寒羊高繁殖力的影响。结果表明,MTNR1A基因外显子2的605位碱基处表现出MnlⅠ酶切多态性,在小尾寒羊中检测到3种基因型:MM(236 bp/236 bp)、Mm(236 bp/303 bp)、mm(303 bp/303 bp),MM和Mm基因型频率明显高于mm基因型频率。MTNR1A基因外显子2的604位碱基处表现出RsaⅠ酶切多态性,在小尾寒羊中检测到3种基因型:RR(267 bp/267 bp)、Rr(267 bp/290 bp)、rr(290 bp/290 bp),RR和Rr基因型频率明显高于rr基因型频率。复合基因型MMRR、MMRr、MmRR、MmRr的频率明显高于MMrr、mmRR、mmRr的频率,没有检测到mmrr复合基因型。小尾寒羊产羔数在MnlⅠ和RsaⅠ酶切复合基因型之间没有显著差异,但至少携带一个拷贝等位基因M的小尾寒羊比不携带M的具有稍微较高的产羔数,基因型为mm的小尾寒羊产羔数比其他基因型的小尾寒羊平均低0.26只。; 储明星程笃学刘文忠方丽叶素成; 关键词：绵羊高繁殖力 PCR-RFLP

牛生长分化因子5基因序列特征及单核苷酸多态性分析: ＜正＞引言生长分化因子5（growth differentiate factor 5,GDF5）于1994年从人关节软骨组织中分离克隆出来的。在人和小鼠上许多研究已经证实,GDF5基因是人体软骨发生和骨骼发育过程中发挥重...; 刘永峰昝林森李奎赵栓平; 关键词：多态性体尺性状; 文献传递

猪FBXL11基因的部分序列克隆、鉴定与遗传分析: 2014年; FBXL11属于连接酶SCF复合物中的底物蛋白识别组分F-box蛋白家族成员,为探明猪FBXL11基因的分子结构特征,研究采用生物信息学和分子生物学技术相结合的方法克隆鉴定猪FBXL11基因第18～ 20内含子,进行群体遗传、蛋白序列及进化特征分析.结果表明：含猪FBXL11基因第18 ～20内含子的克隆序列总长度为3 484 bp,第18、19和20内含子序列长度分别为561 bp、584 bp和442 bp,其编码蛋白质除具有典型保守F-box结构域之外,还有3个其他保守结构域.第18内含子的第377位存在SNP-TspEI （A/G）,温氏集团长白猪种资源群体的遗传分析显示猪群具有杂合AG和纯合GG两种基因型,等位基因G在长白猪种中占有绝对的优势.同源基因FBXL11在物种间具有保守的分子特性,猪和牛属于进化系统树的同一组.猪FBXL11基因编码蛋白包含4个保守结构基序,第18内含子在长白猪种资源群体中存在遗传差异,FBXL11蛋白具有维持基因组稳定及调控细胞分化的潜能.; 李勇杨述林崔文涛牟玉莲唐中林储明星李奎彭克美; 关键词：序列克隆

4个绵羊品种PTGS2基因部分片段的多态性分析被引量：3: 2008年; 设计2对引物,采用PCR-SSCP和PCR-RFLP技术检测前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)基因在小尾寒羊、湖羊、多赛特羊、萨福克羊4个绵羊品种304个个体中的单核苷酸多态性。结果表明,PTGS2基因引物1扩增片段在4个绵羊品种中不存在PCR-SSCP多态性。引物2扩增片段存在PCR-RFLP多态性,在4个绵羊品种中都检测到2种基因型(AA、AB),都没有检测到BB基因型。A等位基因频率明显高于B等位基因频率。小尾寒羊与多赛特羊、萨福克羊、湖羊之间PTGS2基因型分布差异显著(P<0.05),其余品种之间PTGS2基因型分布差异都不显著(P>0.05)。; 王训翠储明星陈宏权朱国祺方丽叶素成; 关键词：绵羊多态性

转基因小鼠的多重PCR快速检测技术被引量：5: 2009年; 转基因检测技术的标准化可以为转基因法规的制定和转基因产品的标识提供技术支持。采用碱裂解法快速提取鼠尾基因组DNA,用PCR方法检测其中的外源基因结构如cytomegalovirus(CMV)启动子、hGH polyA终止子及目的基因跨膜蛋白66(Transmembrane protein 66,Tmem66),筛选到阳性样品。优化了多重PCR引物退火温度及缓冲液浓度,并探讨了扩增速率对多重PCR的影响。结果表明,此多重PCR方法可得到很好的扩增效果,可用于转基因小鼠外源基因的检测,同时为哺乳动物检测标准的建立提供参考。; 王趁芳李新云王志伟敖红崔文涛李奎; 关键词：转基因小鼠多重PCR

猪TAF7基因的克隆、染色体定位和组织表达谱分析: 2009年; 【目的】通过对猪TAF7基因初步的研究,为猪分子遗传育种提供基础分子生物学信息,为猪的遗传育种提供分子标记。【方法】以五指山猪为研究对象,克隆TAF7基因,分析该基因结构特点,然后利用IMpRH(the INRA-University of Minnesota porcine radiation hybrid,法国农业科学院-明尼苏达大学的辐射杂种克隆板)分析该基因在猪染色体上定位信息,利用半定量RT-PCR方法,分析该基因在成年五指山猪16个不同组织(心脏、背肌、淋巴、脾脏、肝脏、肾脏、肺脏、子宫、睾丸、胃、小肠、大肠、卵巢、胸腺、脑、脂肪)的表达谱信息。【结果】克隆得到长1701bp的五指山猪TAF7基因序列,其中包括1050bp完整CDS(Coding Sequence,编码序列)区域,分析表明其编码含349个氨基酸的蛋白质。利用IMpRH分析结果表明,猪TAF7基因与分子标记SW1879和IL4(interleukin-4,白细胞介素-4)紧密连锁,LOD(Limit of Detection,检测极限)值分别为6.69和6.15。组织表达谱分析结果显示该基因在大多数组织中均有表达,其中在睾丸表达量较高,而在心脏、背肌中表达很低。【结论】猪TAF7基因5’UTR中有一个短的内含子,而在该基因CDS区域没有内含子。猪TAF7蛋白序列与人TAF7蛋白序列的相似性较高,二者在生物系统发育树中的距离最接近。猪TAF7基因在大多数组织中均表达,在猪睾丸中表达量较高,证实它调节目的基因转录具有广泛性。; 张兴举唐中林王志伟杨述林牟玉莲崔文涛马月辉储明星李奎; 关键词：克隆基因定位组织表达谱

小尾寒羊雌激素受体基因外显子4的克隆与序列分析被引量：3: 2008年; 根据GenBank发表的人、鸡、大鼠雌激素受体（estrogen receptor，ESR）基因外显子4的序列设计1对引物，采用PCR技术扩增出小尾寒羊ESR基因外显子4的DNA片段，将该片段克隆到pGEM-T Easy质粒中，重组质粒用PCR扩增进行阳性克隆鉴定，然后测定其核苷酸序列并推导氨基酸序列，同时将测定的小尾寒羊ESR基因外显子4序列与人、牛、猪、大鼠、鸡的外显子4序列进行比较。结果表明：克隆测序所得的核苷酸和翻译后的氨基酸序列与人、牛、猪、大鼠、鸡相比，同源性分别为77．68％～97．28％和71．82％～98．18％，显示了很强的保守性；小尾寒羊的核苷酸序列与人、牛、猪、大鼠、鸡相比存在1处特有变异，氨基酸序列23～36存在高变异区。; 贾立华储明星陈宏权方丽; 关键词：小尾寒羊雌激素受体基因克隆

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