北华大学医学检验学院医学检验系
- 作品数:30 被引量:86H指数:5
- 相关作者:高秀峰陈静波顾颜春王晶波王刚更多>>
- 相关机构:东北电力学院应用化学系华中科技大学同济医学院第四军医大学吉林军医学院检验系更多>>
- 发文基金:吉林省教育厅基金浙江省科技厅资助项目吉林省卫生厅资助项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学理学文化科学更多>>
- 六亚甲基双乙酰胺与烟酰胺联合使用对MELDS19细胞有更强的促分化作用被引量:1
- 2006年
- 目的研究六亚甲基双乙酰胺(HMBA)、烟酰胺(HMBPA)单独及两者联合使用对MELDS19细胞生长及分化的影响。方法绘制HMBA和HMBPA单独及两者联合使用后的MELDS19细胞生长曲线,成集落实验检测细胞增殖,联苯胺染色法检测其分化百分率。结果MELDS19细胞在HMBA与HMBPA联合作用下增殖能力下降,并且比单独作用强,联苯胺染色阳性率增高。结论HMBA与HMBPA联合作用能增强抑制MELDS19细胞的生长繁殖并促使其分化。
- 王艾琳李坚顾颜春章静波
- 关键词:分化烟酰胺
- 幽门螺杆菌临床菌株2148bp的cagA基因片段克隆、表达及免疫性鉴定被引量:3
- 2004年
- 目的 克隆幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)临床菌株的cagA基因片段 ,构建原核表达系统 ,鉴定重组表达产物的免疫原性。方法 由于cagA基因核苷酸序列变异较大 ,选择序列相对稳定的 2 14 8bp为目的片段 (cagA1)。采用高保真PCR扩增幽门螺杆菌临床分离菌株Y0 6中的目的片段cagA1,T -A克隆后测序。构建 pET32a的cagA1片段表达载体 ,在E coliBL2 1DE3宿主菌中用不同浓度的IPTG诱导表达。采用Ni-NTA亲和层析法收集表达的目的重组蛋白 (rCagA1)。采用Hp全菌抗体的Westernblot鉴定rCagA1免疫反应性 ,免疫双扩散试验鉴定rCagA1免疫家兔的抗血清效价。 结果 PCR获得预期大小的目的扩增条带。与文献报道比较 ,克隆的cagA1核苷酸和氨基酸序列同源性分别为 94 83%和93 30 %。所构建的原核表达系统 pET32a -cagA1-E coliBL2 1DE3目的重组蛋白 (rCagA1)表达量为细菌总蛋白的 30 %左右。Westernblot证实rCagA1能与Hp全菌抗体发生特异性免疫结合反应。兔抗rCagA1血清的免疫双扩散效价为 1∶4。结论 本文成功地构建了HpcagA基因片段cagA1的高效原核表达系统 ,所表达的rCagA1具有良好的免疫原性和免疫反应性 ,为进一步研制cagA及其抗体检测试剂盒奠定了基础。
- 邵世和王媛严杰
- 关键词:幽门螺杆菌克隆免疫原性
- 尿中磺酸化胆汁酸的流动注射固定化酶化学发光法被引量:5
- 2001年
- 肝胆系统有疾患,会导致尿中磺酸化胆汁酸浓度的增加。根据尿中磺酸化胆汁酸的浓度可以 判断肝脏机能是否正常。基于流动注射分析原理,利用化学发光法和固定化酶反应,建立了一个新的尿 中磺酸化胆汁酸的临床快速分析法。进样量为20μL;分析速度30样/h;检出限为0.1μmol/L;RSD小于 2.2%;线性范围在0.1~12μmol/l之内。
- 高秀峰李永生轻部征夫
- 关键词:流动注射分析化学发光法固定化酶肝胆系统疾病
- hTRT反义基因转染对人结肠癌细胞生长的抑制作用
- 2004年
- 利用基因重组技术,hTRT基因反向插入真核表达载体pcDNA3.0,获得重组体pcDRTRT,通过脂质体法导入人结肠癌细胞株SW-111C,获得稳定转染细胞系,即反义细胞,该细胞易脱落,出现明显生长抑制现象;失去叠落生长能力;流式细胞仪(FCM)证实导入反义hTRT后,G0/1期细胞增加,G,M和S期细胞减少,增殖指数(PI)降低;且不能在软琼脂中形成集落;并发现反义细胞中hTRT表达水平明显下降。说明反义hTRT基因体外导入结肠癌细胞株SW-111C可以明显降低端粒酶活性,抑制结肠癌细胞的生长、增殖且能使其恶性表型发生逆转。
- 傅桂莲董俊红杜培革
- 关键词:人端粒酶催化亚单位人结肠癌细胞反义基因治疗
- 人类疱疹病毒6B型纯化鉴定方法比较和优化
- 2005年
- 目的通过对人类疱疹病毒(HHV)-6B纯化后鉴定手段的比较,筛选或优化出简单、快速、准确特异的方法。方法采用蔗糖密度梯度离心法进行病毒纯化;通过PCR法、斑点杂交法、蛋白免疫印迹法对纯化样品中HHV-6B进行鉴定,以确定收集阳性样品的范围。结果3种方法都可鉴定出阳性病毒体,但是在样品的阳性收集范围、鉴定所需时间以及成本上表现差异。结论纯化HHV-6B后的初步鉴定,最好采用PCR法和斑点杂交法。
- 李咏梅黄红兰常洪贤
- 关键词:纯化
- 柴胡皂甙d(SSd)对K562细胞凋亡及基因表达影响的研究被引量:33
- 2002年
- 目的 :观察从柴胡中提取的单体成分柴胡皂甙d诱导白血病细胞株K562细胞凋亡及对其基因表达的影响。方法 :分别用 5μg/ml、7.5μg/ml、1 0 μg/ml浓度的SSd作用于K562细胞株 ,于药物作用后不同时间段 (1 2 ,2 4 ,36 ,48,60h) ,荧光染色法观察基凋亡状况、间接免疫荧光法测Bcl- 2表达情况。结果 :荧光染色结果显示 :K562在 1 0 μg/ml处理 2 4h后 ,开始出现凋亡小体 ,48h后出现大量死细胞。间接免疫荧光法测Bcl- 2表达 ;经SSd作用后K562细胞Bcl-
- 夏薇崔新羽陈静波
- 关键词:柴胡皂甙DK562细胞细胞凋亡基因表达白血病
- 菲律宾菌素对人类疱疹病毒-6型感染性的影响
- 2007年
- [目的]了解菲律宾菌素减少人类疱疹病毒-6型包膜胆固醇后,对病毒感染性的影响。[方法]用不同浓度的菲律宾菌素作用于HHV-6A GS株,经20%蔗糖缓冲液梯度离心,去除菲律宾菌素并纯化病毒,分别感染HSB-2和Jurkat细胞,然后采用IFA法、Hoechst 33258核染色及免疫蛋白杂交等方法检测病毒受菲律宾菌素作用后,其对靶细胞的融合、进入的影响。[结果]菲律宾菌素能减少HHV-6A包膜胆固醇,病毒的感染性及诱导细胞融合的能力显著减弱。[结论]HHV-6A包膜胆固醇在细胞融合过程中起着重要作用,同时也是病毒进入宿主细胞的关键因素。
- 李咏梅张亚丽刘燕
- 关键词:人类疱疹病毒-6型感染性
- 妊娠妇女及新生儿头发中锌、铁含量测定与统计分析
- 2003年
- 目的:对妊娠妇女、未妊娠妇女及新生儿头发中的锌、铁含量进行检测与比较。方法:妊娠妇女组202例,新生儿组202例,未妊娠妇女作为对照组165例,利用原子吸收分光光度法进行检测,t检验比较。结果:妊娠妇女组锌含量103.49±1.10mg·L^-1,铁含量28.92±0.72mg·l^-1;对照组锌含量150.20±1.71mg·L^-1,铁含量44.02±1.13mg·L^-1;新生儿组锌含量158.03±1.98mg·L^-1。铁含量42.74±1.08mg·L^-1。妊娠妇女与对照组及新生儿组比较有高度显著差异(P<0.01)。结论:妊娠妇女头发中锌、铁含量明显低于未妊娠妇女和新生儿。
- 高秀峰李永生
- 关键词:妊娠妇女新生儿头发锌原子吸收分光光度法缺锌缺铁
- 人类疱疹病毒6型包膜胆固醇去除及糖蛋白表达被引量:1
- 2007年
- 目的探讨人类疱疹病毒(HHV)-6型包膜胆固醇去除后,对其包膜糖蛋白表达水平的影响。方法用0,1,2,3,5,10 mmol/L不同浓度的甲基-β-环糊精作用于HHV-6A GS株,经20%蔗糖缓冲液梯度离心,去除甲基-β-环糊精,并纯化病毒,采用胆固醇含量检测试剂盒测定病毒胆固醇含量;纯化后的病毒感染HSB-2细胞后,用免疫蛋白杂交方法检测包膜糖蛋白的表达。结果不同浓度的甲基-β-环糊精作用HHV-6A后,其包膜胆固醇含量与甲基-β-环糊精的浓度呈负相关,从35μg/ml下降到10μg/ml以下;与未经处理的病毒比较,其包膜糖蛋白的表达水平未发生改变,糖蛋白gQ1和gL的表达均处在同一水平。结论甲基-β-环糊精可去除HHV-6A包膜胆固醇,且包膜胆固醇的缺失并未影响包膜糖蛋白的表达。
- 李咏梅孙敏王大海
- 关键词:人类疱疹病毒-6型包膜胆固醇糖蛋白
- 肿瘤标志物联合检测在原发性肝细胞癌早期诊断中的应用被引量:5
- 2004年
- 用生物发光免疫分析法、比色法联合检测确诊的原发性肝细胞癌(53例)、乙型病毒性肝炎(80例)、慢性乙肝合并肝硬化(34例)患者同份血清的肿瘤标志物甲种胎儿蛋白(AFP)和肿瘤特异性生长因子(TSGF).结果显示,原发性肝细胞癌组血清TSGF和AFP与其他组比较均有显著差异(P<0.01);原发性肝癌组中TSGF与AFP联合阳性检出率为96.2%.
- 罗速张逢春刘成柏项小丰
- 关键词:原发性肝细胞癌AFP肿瘤标志物血清TSGF慢性乙肝阳性检出率