中国农业大学农学与生物技术学院农业部植物病理学重点实验室
- 作品数：18 被引量：123H指数：7
- 相关作者：蒋荷侯占军郑慧慧王文君陈寔更多>>
- 相关机构：中国热带农业科学院环境与植物保护研究所广西大学生命科学与技术学院广西大学生命科学与技术学院广西亚热带生物资源保护利用重点实验室更多>>
- 发文基金：国家杰出青年科学基金公益性行业(农业)科研专项美国洛克菲勒基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 农杆菌介导的细菌阿特拉津氯水解酶基因对水稻的遗传转化被引量：14
- 2004年
- 研究构建了植物表达载体p1301-atzA,使来源于节杆菌(Arthrobacter sp.)AD1菌株的阿特拉津氯水解酶基因atzA受控于CaMV35s启动子下表达。用农杆菌介导法将植物表达载体p1301-atzA导入粳型保持系津稻107中,经潮霉素抗性筛选,得到可育的再生植株。转基因植株总DNA经PCR和Southern检测表明atzA基因已整合到水稻的基因组中。对转基因植株进行除草剂阿特拉津抗性检测,在喷施浓度为0.133％的阿特拉津溶液后,对照植株和敏感植株死亡,而转基因植株表现出对阿特拉津的抗性,保持正常生长,但不同转化株系的抗性表达水平不同。对转基因植株T,代进行的遗传分析表明,外源基因atzA能稳定遗传给后代,且大多数株系的分离比符合3:1。
- 王松文施利利孙宗修蔡宝立傅亚萍王扬斯华敏刘霞张欣
- 关键词：农杆菌介导细菌水解酶基因水稻
- 稻瘟菌侵染诱导的水稻过氧羟基脂肪酸羟化环氧化酶的抗血清制备
- 2000年
- 通过选择性抽提、盐析、阴阳离子交换柱层析等步骤从非亲和性稻瘟菌侵染的 12 0 g稻叶中获得了诱导性过氧羟基脂肪酸羟化环氧化酶 ( POG)的电泳纯蛋白 2 50 μg。利用这些纯化蛋白 ,制备了POG的抗血清。点免疫杂交结果表明 ,该抗血清效价大于 1:50 0 0 ,其抗原检测灵敏度可达 0 .0 5ng,并具有较好的特异性。蛋白印迹结果显示 ,稻瘟菌侵染可诱导
- 苏生昌张淑平范军侯占军彭友良
- 关键词：稻瘟菌抗血清
- 西瓜种传尖孢镰刀菌致病性及其粗毒素对种子发芽的影响被引量：14
- 2010年
- 采用浸胚根法和浸根法对京欣一号西瓜种壳分离得到的尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）进行致病性试验。结果表明：从接种后发病幼苗上分离得到的分离物与最初接种所用的镰刀菌菌落形态和生长速率等性状基本相同,采用相同的引物对rDNA进行PCR扩增获得的核苷酸序列完全相同,说明这二者为同一种菌,从而证明西瓜种子上所携带的尖孢镰刀菌具有致病性,在国内首次报道了西瓜种传尖孢镰刀菌具有致病性。西瓜种传尖孢镰刀菌培养滤液和粗毒素提取物处理西瓜种子后,种子的发芽势、发芽率和发芽指数均显著降低,其中发芽势下降了16.7%-29.0%,发芽率下降了14.4%-22.3%,发芽指数下降了19.1%-37.1%,说明培养滤液和粗毒素提取物可影响西瓜种子发芽。
- 吴学宏卢志军陈倩韩鲁明李怀方古勤生
- 关键词：西瓜尖孢镰刀菌粗毒素
- 甘蓝种传尖孢镰刀菌粗毒素的研究被引量：7
- 2010年
- 为研究甘蓝感病（北农早生）和抗病（珍奇）品种种传尖孢镰刀菌Fusarium-CG和Fusarium-HM的培养滤液和粗毒素对种子发芽的影响,采用乙酸乙酯和乙醚萃取法提取粗毒素中的镰刀菌酸并利用HPLC法进行定量分析,利用粗毒素浸渍甘蓝幼苗根部测定其对幼苗的致枯萎作用。结果表明：Fusarium-CG和Fusarium-HM的培养滤液和粗毒素对种子的发芽具有明显的抑制作用;粗毒素浸渍甘蓝幼苗根部能够引起幼苗枯萎;其粗毒素中镰刀菌酸质量浓度分别为552和105μg/mL,并且粗毒素对甘蓝的致害作用随着镰刀菌酸含量的升高和处理时间的延长而加重,当用镰刀菌酸质量浓度为25μg/mL的粗毒素处理甘蓝幼苗24 h后,幼苗病情指数在2.6~15.9之间,而用镰刀菌酸质量浓度为100μg/mL的粗毒素处理甘蓝幼苗96 h后,幼苗病情指数在78.0~97.8之间。浸渍24 h时粗毒素对感病品种的致萎作用强于抗病品种,当用镰刀菌酸质量浓度为25μg/mL的Fusarium-CG和Fusarium-HM的粗毒素处理甘蓝幼苗24h后,抗病（珍奇）品种的病情指数分别为2.6和4.2,而感病（北农早生）品种的病情指数分别为15.2和15.9。
- 刘梅卢志军王文君郑建秋黄俊生吴学宏
- 关键词：甘蓝尖孢镰刀菌粗毒素镰刀菌酸HPLC
- 稻瘟菌对水稻品种梅雨明的无毒性的遗传分析和分子标记被引量：37
- 2001年
- 将交配型为 a、并对水稻品种梅雨明不致病的稻瘟菌菌株 S152 2与对该品种致病的、交配型为A的稻瘟菌菌株 P131和 S159杂交 ,分别获得了 2 4和 56个单子囊孢子后代。致病性测定结果表明 :这些后代菌株在梅雨明上的致病个体与不致病个体的比例近等于 1∶ 1。由此推测 :稻瘟菌对水稻品种梅雨明的无毒性是由 1个基因控制的。进一步通过 RAPD比较了致病后代与不致病后代的 DNA多态型 ,获得了 1个与该无毒基因连锁的、长度为 10 0 0 bp的 RAPD标记 ,两者间的遗传距离为3.7c M。
- 刘俊峰董宁侯占军范军彭友良
- 关键词：稻瘟菌无毒基因分子标记抗病育种
- 臭氧对蔬菜土传病原真菌的抑制作用被引量：10
- 2009年
- 探讨臭氧作为土壤熏蒸剂防控蔬菜土传真菌病害的理论依据。研究离体条件下臭氧熏蒸处理对黄瓜枯萎病菌、立枯丝核菌和甘蓝枯萎病菌3种土传病原真菌菌丝生长和孢子萌发的抑制作用。结果表明,臭氧质量浓度为62～72mg/m3处理对3种供试病菌菌丝生长显著抑制,随处理时间延长,抑制率提高,当达到120min时,抑制率均达到了90%以上均显著高于30和60min的处理,并且菌丝量明显减少,菌丝体发生聚集、卷曲、局部膨大,菌丝隔膜消失、原生质体溶解。黄瓜枯萎病菌和甘蓝枯萎病菌的孢子在水琼脂上涂板,臭氧处理质量浓度为40mg/m3,总体表现为病菌孢子涂板后培养时间越短,臭氧处理时间越长,臭氧对病菌孢子的萌发抑制率越高:病菌孢子涂板后立即处理3min,对孢子的萌发抑制率达到100%,而涂板后培养10h,处理1min,对孢子萌发的抑制作用不明显。臭氧质量浓度为40mg/m3处理3min对孢子具有杀灭作用,相同条件下对菌丝生长的抑制作用较小,说明了孢子对臭氧比菌丝敏感。臭氧具有抑制多种土传病原真菌的良好效果,尝试臭氧作为土壤熏蒸剂防治蔬菜生产中土传真菌病害的发生和危害值得进一步探索。
- 周真真郑建秋李健强
- 关键词：臭氧黄瓜枯萎病菌立枯丝核菌串珠镰刀菌
- 小麦品种混种对条锈病控制效果及产量影响的研究被引量：7
- 2010年
- 通过对不同小麦品种按不同比例混种,研究品种多样性控制小麦条锈病的田间效果,以期为利用品种多样性防治小麦条锈病提供理论依据。本研究利用甘肃省甘谷县和北京市上庄镇当地对条锈病具不同抗性的小麦品种,按照不同混种比例布局了25个混种处理和7个单种处理,比较了品种混种对条锈病的控制效果和对小麦产量的影响,以相对抗病性指数(RRI)把品种抗性加以分类,并以相对混种效果参数(REM)比较各混种处理的效果。结果表明,不同小麦品种混种对小麦条锈病有较好的控制效果,混种处理相对于感病品种单种病情指数平均下降30.5;混种对小麦的增产效果比较明显。在25个小麦品种混种处理中,有14个处理有增产效果(REM>1),占56%,在甘谷试验地抗病(R)品种和高感(HS)品种按质量比5∶1混种时相对感病品种单种处理抗病增产效果最好,而在上庄试验地,高抗(HR)、中感(MS)和感病(S)按质量比1∶1∶1混种时相对感病品种单种处理抗病增产效果最好。品种混种作为综合治理小麦条锈病的措施之一,具有一定的推广应用价值。
- 赵磊孙振宇黄冲王爽潘娟娟王海光曹世勤马占鸿
- 关键词：小麦条锈病品种混种
- 利用PTVA法提高超氧化物歧化酶基因在毕赤酵母中的表达
- 2012年
- 为得到高表达超氧化物歧化酶毕赤酵母工程菌株,促进SOD的产业化生产,将来源于蜡样芽孢杆菌M22菌株的Mn-SOD-2基因转入毕赤酵母GS115中,构建了表达工程菌株YS 1～100。采用PTVA法(Posttransformational vector amplification)进行拷贝数扩增处理。建立了SOD重组菌株MMH(Minimal Methanol+Histidine)平板简易检测法,使用该法对转化子进行初筛,并用荧光定量PCR(Fluorescence quantitative PCR)法检测部分重组酵母工程菌中外源SOD基因的拷贝数。结果表明:试验中得到80株高抗Zeocin的菌株YSP 1～80,经MMH平板法筛选得到菌株YSP14、YSP30、YSP48和YSP54的SOD酶活性明显高于处理前;菌株YSP54的SOD基因的拷贝数达到8个拷贝,而处理前仅为1个拷贝;Native-Page分析与NBT酶活性测定显示菌株YSP54发酵上清液中的SOD酶活性达到150U/mL,为处理前的2倍。提高毕赤酵母中外源SOD基因的拷贝数可以相应提高SOD的酶活。
- 李潇楠王爽王琦
- 关键词：毕赤酵母超氧化物歧化酶基因拷贝数
- 热带果树基因组DNA提取方法的改良及Southern blot分析被引量：2
- 2012年
- 以香蕉、番木瓜、龙眼为代表材料,建立一套适合热带果树基因组DNA提取的方法——改良CTAB法。将提取各基因组DNA经限制性内切酶完全消化后,分别以香蕉內源乙烯受体基因(AF113748)、番木瓜八氢番茄红素脱氢酶基因PDS(DQ779922)、龙眼开花相关基因LEAFY(ADQ160214)为探针进行Southern blot杂交,3种植物的基因组DNA适宜上样量的60μg,杂交条带清晰,背景弱,说明采用改良CTAB法,能保证基因组DNA提取的浓度和纯度,符合Southern blot的要求。
- 彭军曾凡云龙海波黄俊生郭建荣
- 关键词：热带果树CTABSOUTHERNBLOT
- PCR技术快速检测玉米内州萎蔫病菌研究被引量：4
- 2010年
- 玉米内州萎蔫病是北美玉米生产中的严重病害,为防止其传入我国,本研究采用Clavibacter michiganensis不同亚种的转录间隔区序列,设计了特异性的PCR引物,对C.michiganensis种下不同亚种的DNA进行了PCR扩增反应,结果表明,只有玉米内州萎蔫病菌的特异性扩增得到大小为170bp的目标片段,且仅有此一条明显的PCR扩增产物,C.michganensis种下其他亚种无扩增产物。PCR反应的灵敏度为4.36×105cfu/mL和1.56×102pg,可以满足检疫的要求。
- 周琦陈寔高文娜汪万春李建光陈洪俊李健强
- 关键词：PCR
