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北京大学生命科学学院蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室: 作品数：352 被引量：3,272H指数：29; 相关作者：李令媛俞梅敏顾孝诚口如琴顾雪松更多>>; 相关机构：南开大学环境科学与工程学院南开大学环境科学与工程学院天津市城市生态环境修复与污染防治重点实验室湖南师范大学生命科学学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：生物学农业科学医药卫生环境科学与工程更多>>

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PPF1基因C端片段在大肠杆菌中的融合表达和纯化以及抗体制备被引量：7: 2002年; PPF1是与G2豌豆短日不衰老现象紧密相关的基因之一 .以pSK PPF1为模板 ,用PCR方法得到了编码该蛋白C端的基因片段 ,称为PPFC .进一步将该基因片段克隆到中间载体pGEM T easy ,再酶切得到PPFC片段插入到pGEX 4T 1载体中 ,构建成表达质粒pGEX 4T PPFC .在BL2 1细胞中经IPTG诱导表达 ,得到GST PPFC融合蛋白 .用GST亲和柱纯化得到PPFC蛋白 ,将其作为抗原得到兔源的多克隆抗体 .Western杂交分析表明所得到的抗体具有较强的特异性 ,ELISA分析证实其效价为 10 6.该抗体的获得为用免疫沉淀等免疫分析技术研究PPF1与其它蛋白质的相互作用。; 徐云剑苏力坦.阿巴白克力吉栩朱玉贤; 关键词：C端片段大肠杆菌纯化抗体制备多克隆抗体植物细胞

含RGD序列的山蛭素突变体的克隆、表达及性质研究: 2004年; 根据LAP (leechantihemostaticprotein)理论 ,在分析山蛭素和decorsin结构特征的基础上 ,利用重组PCR方法 ,删除了山蛭素氨基酸序列的 33位至 35位 ,同时分别插入了RGDS和来源于decorsin的一段PRGDADP序列构建成为 2种含RGD序列的山蛭素突变体 ,分别命名为HRGD1和HRGD2 .这 2种突变体在毕赤酵母菌株GS115中得到成功表达 .经过超滤、阳离子交换层析和凝胶过滤层析等纯化步骤之后 ,得到纯度高于 95 %的目的蛋白 .通过以chromozymTH为底物的凝血酶酰胺水解实验和血小板聚集抑制实验证实了其体外生物学活性 ,HRGD1和HRGD2抑制凝血酶的动力学常数达到 10 -13 mol/L水平 ,抑制血小板的IC50 在 10; 赵菁菁杨江峰茹炳根; 关键词：凝血酶毕赤酵母菌体外生物学血小板聚集 RGD序列突变体

人小肠三叶因子(hITF)基因在生菜中的整合与表达被引量：16: 2001年; 用根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens (SmithetTownsend )Conn)介导的叶盘法 ,将人小肠三叶因子(hITF)导入生菜 (LactucasativaL .)中 ,在含有除草剂的培养基上筛选 ,获得抗性植株。通过PCR和Southern印迹分析证明 ,hITFcDNA已整合到生菜基因组中。Western印迹分析证明hITF在生菜中的表达。ELISA检测表明 ,hITF在生菜新鲜叶片中的表达量为 2 0 0～ 3 0 0ng/g ,最高达 70 0ng/g ,约占总可溶性蛋白的 0 .1%。; 左晓峰张晓钰单龙肖传英何笃修茹炳根; 关键词：人小肠三叶因子生菜转基因植物

对一个在水稻雄蕊中大量表达的cDNA的结构和表达分析被引量：12: 1998年; 雄蕊的发育是植物有性生殖过程中的一个重要阶段 ,研究雄蕊发育过程中大量表达乃至特异表达的基因对于了解雄蕊发育的分子机制具有重要的意义 .在水稻雄蕊中大量表达的一个类查尔酮合酶基因 (D5)的结构进行了分析 ,发现D5与欧洲油菜中另外 2个花药特异性基因 (A1和BA4 2 )的同源性较高 ,Northern分析表明它们的表达模式相似 ,而且可能与花粉的早期发育过程相关 ,这说明D5,A1和BA4 2代表了一类与雄蕊发育相关的、特化的类查尔酮合酶基因 .; 张毅瞿礼嘉刘美华秦晓莉顾红雅陈章良; 关键词：花粉发育水稻 CDNA 查尔酮合酶雄蕊发育

转基因产品过敏性评估规范化: 转基因产品在商业化之前需要对其安全性进行全面评估,其中包括潜在过敏性的评价.本文介绍了多个国际组织对敏性评估的程序,对涉及的各种测试也进行了详尽的论述.随着中国加入WTO,转基因产品的过敏安全性评估同国际接轨越发重要.因...; 倪挺胡鸢雷林忠平李宏张宏誉; 关键词：转基因产品; 文献传递

从极端环境下生长的物种中克隆基因，用于提高植物的抗逆性: ＜正＞目前对于植物抗逆性机理的论述主要来自模式植物拟南芥的研究。虽然生物对逆境胁迫的反应是有共性的,而不同生境下的物种采取不同的反应方式也是十分明显的。极端环境下的植物具有更为显著的抗逆性基因活动的特色,是很值的研究的。; 胡鸢雷吴韩英王晓丽林忠平; 文献传递

核DNA相减与分子克隆被引量：1: 1992年; 核DNA的减法(Genomic Subtraction)或核DNA相减后聚合酶链式反应(Subtracting PCR)系国际分子生物学领域90年代初露头角的最新技术,深受科学界重视。应用这一技术可以在没有任何探针材料的情况下,由研究缺失突变体的表现型入手,从亲本材料中克隆与突变体缺失片段相对应的遗传性状,包括许多对高等动植物生长发育影响重大的基因或基因群。; 朱玉贤; 关键词：核DNA 分子克隆

一种SDS-PAGE与MALDI-TOF质谱联用的方法被引量：5: 1999年; 以尿激酶原为材料，探索一种从ＳＤＳ ＰＡＧＥ胶上回收蛋白质做ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ质谱的方法．所用的回收方法包括电洗脱、脱盐、除ＳＤＳ等过程．电洗脱用的是高盐阻断法，脱盐用的是超滤技术，去除ＳＤＳ用的是冷丙酮沉淀法．结果证明，此方法至少对一些蛋白质（如尿激酶原和牛血清白蛋白）; 潘晓宇赵晖胡美浩; 关键词：尿激酶原 SDS 质谱

不同组合及组分结核杆菌多价DNA疫苗的保护效率比较研究: 牛结核病是一种慢性消耗性传染病,人、畜结核病的交叉感染是造成结核病不断流行的重要原因,尤其是在畜牧业发达的地区,人、畜间结核病的交叉传播,不仅对人类的身体健康造成威胁,且也严重影响了畜牧业的快速发展。本研究针对市场需求,...; 蔡宏余大海田霞呼西旦李淑霞朱玉贤; 关键词：DNA疫苗结核杆菌多价疫苗; 文献传递

PEG-mediated Transformation of Lentinus edodes被引量：17: 2001年; Expression vector p301-bG1 contains a Sw gene and a bialaphos resistance gene both driven by glyceraldehydes-3-phosphate dehydrogenase (GPD) gene promoter isolated from Lentinus edodes ( Berk.) Sing. Using p301-bG1, PEG-mediated transformation of protoplast of L. edodes was studied. Mixed with PEG-purified plasmid DNA, the protoplasts of L. edodes were treated with PEG solution and cultured on CYM regeneration plate containing 40 mug/mL bialaphos. Bialaphos-resistant and GUS-positive transformants were obtained using this transformation system. Although the transformation efficiency was relatively low, the protocols release large expenses on expensive instrument and restriction enzymes, providing a simple and economical method for mushroom breeding at the molecular level.; 孙丽许伟宏蔡华清胡鸢雷林忠平; 关键词：TRANSFORMATION GUS PEG