遵义医学院贵州省细胞工程重点实验室
- 作品数：26 被引量：89H指数：6
- 相关作者：李彦赵玉洁刘圣更多>>
- 相关机构：重庆医科大学基础医学院基础医学研究所重庆医科大学基础医学院第三军医大学军事预防医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省科学技术基金贵州省卫生厅科学技术基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 胃乐散对大鼠胃溃疡黏膜碳酸氢盐转运蛋白CFTR、SLC26A3及SLC26A6的作用被引量：4
- 2013年
- 目的研究胃乐散对大鼠胃溃疡黏膜碳酸氢盐分泌的影响,并探讨其作用机制。方法 SD大鼠48只,随机分为正常对照组,模型组,胃乐散低剂量组[0.075g/(mL·kg)]、中剂量组[0.150g/(mL·kg)]、高剂量组[0.300g/(mL·kg)]和雷尼替丁组[0.030g/(mL·kg)],每组8只。采用冰醋酸烧灼法制备大鼠胃溃疡模型,制模后第2天,各用药组开始给药,连续用药后第14天处死大鼠,取溃疡部位组织提取蛋白,用免疫印迹法(Western blot)检测组织Cl-/HCO-3离子交换体solute carrier26A3(SLC26A3)及solute carrier26A6(SLC26A6)的含量;将大鼠胃溃疡及周围组织切片,用免疫荧光法观察囊性纤维化跨膜转运调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)的变化。结果与模型组比较,用药后胃乐散高剂量组及雷尼替丁组大鼠胃黏膜中SLC26A3的表达增加,差异有统计学意义(P<0.05);雷尼替丁组,胃乐散中、高剂量组大鼠胃黏膜中SLC26A6的表达均增加,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);胃乐散中、高剂量组大鼠胃溃疡黏膜的CFTR表达也明显增加,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论胃乐散能提高大鼠胃溃疡黏膜SLC26A3、SLC26A6和CFTR的表达,增加碳酸氢盐的分泌,保护胃黏膜。
- 文国容徐靖宇刘雪梅赵正兰江义霞谢睿陈萍余丽梅庹必光
- 关键词：胃乐散胃溃疡免疫荧光法免疫印迹法
- 小鼠PPARγ2基因表达载体pcDNA3-PPARγ2的转化扩增被引量：1
- 2007年
- 目的对含小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体γ2(mPPARγ2)基因载体pcDNA3-PPARγ2进行体外转化和扩增,为基于PPARγ2的相关研究提供高纯度、高丰度的表达载体。方法取pcDNA3-PPARγ2质粒转化DH5α感受态菌,再接种到含氨苄青霉素的LB琼脂培养板进行抗性筛选培养,挑取阳性克隆菌落进行培养后抽提质粒,紫外分光光度计测定提取质粒的纯度和浓度,并取样进行琼脂糖凝胶电泳验证。结果经转化后获得了大量抗氨苄青霉素的阳性克隆菌落,挑取阳性克隆并经培养后提取的pcDNA3-PPARγ2质粒其A260/A280=1.89,浓度为420 ng/μl。结论成功转化并扩增了pcDNA3-PPARγ2质粒,为PPARγ的相关研究提供了高纯度、高浓度的表达载体。
- 张潜章涛方宁陈代雄周岐新
- 关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体Γ质粒转化
- 耳背静脉放血治疗扁平疣及对外周血T淋巴细胞亚群的影响被引量：8
- 2013年
- 目的:观察耳背静脉放血治疗扁平疣的临床疗效及检测其对外周血T细胞亚群的影响。方法:应用耳背静脉放血治疗扁平疣患者35例,双侧耳背每周放血1次,疗程15周。观察疗效并于治疗前后抽取患者的静脉血,采用流式细胞仪检测患者外周血T淋巴细胞亚群。结果:完成随访的33例患者总有效率为84.85%。患者在治疗前CD4+和CD4+/CD8+比值明显低于正常对照组(P<0.05,P<0.01);治疗后均显著升高(P<0.01),与正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:耳背静脉放血治疗扁平疣有较好的临床疗效,可调节患者外周血T淋巴细胞亚群水平,提高患者的细胞免疫功能,导致疣体脱落。
- 孙文倩曹碧兰颜廷凯曾霓陶锐陈晓红曾令芬方宁
- 关键词：扁平疣T淋巴细胞亚群流式细胞仪
- 改良骨骼肌肌纤维分型ATP酶染色方法被引量：7
- 2009年
- 目的采用经作者改良的Guth-Samaha肌球蛋白ATP酶染色方法,观察其对大鼠骨骼肌肌纤维分型染色效果。方法取8μm厚度SD大鼠胸肌及肱二头肌冰冻切片,用含40 g/L多聚甲醛固定液固定5 min;Tris洗液漂洗后置预孵育液中室温下孵育15 min;Tris洗液中漂洗2次,置孵育液中于37℃恒温水浴摇床中振摇孵育60 min;10 g/L氯化钙洗3次后置20 g/L氯化钴液中3 min;蒸馏水冲洗,于10 g/L硫化铵液中孵育3 min;自来水冲洗3 min,常规梯度乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封片,置显微镜下观察。结果SD大鼠胸肌和肱二头肌经改良Guth-Samaha肌球蛋白ATP酶染色后均可清晰地显示出明亮色白的Ⅰ型纤维和幽暗深褐的Ⅱ型纤维。结论改良Guth-Samaha肌球蛋白ATP酶染色方法具有试剂配制简单、操作简化和肌纤维分型效果满意等优点,值得在骨骼肌相关研究中借鉴应用。
- 章涛张潜胡锡阶薛黔陈代雄
- 关键词：肌纤维型
- 自制脊髓打击器致大鼠脊髓损伤的组织形态学演变特征
- 2015年
- 目的:通过大鼠脊髓组织H-E染色和电镜观察,以评价自制撞击型脊髓打击器的应用价值.方法:采用自制脊髓打击器分别从2、3 cm和4 cm高度将10 g撞击头自由下落对脊髓进行撞击,以制备大鼠脊髓损伤模型,于制模术后3、7、14d及28 d随机选取各组大鼠样品,对其脊髓组织进行H-E染色及电镜观察.结果:假手术组各观察时间点脊髓组织结构均完整;2 cm高度打击组脊髓损伤后至第7天组织坏死明显,14d后受损组织部分修复;3 cm和4 cm高度打击组随时间延长受损脊髓组织坏死加重.电镜观察3个打击组随时间延长,髓鞘板层均表现为逐渐松解,轴突逐渐消失,尤以3crm和4cm高度打击组的损害更为严重.结论:本研究采用的自制脊髓打击器具有随打击高度的不同而出现不同程度组织损伤的演变特征,是一种较为理想的脊髓损伤制模装置.
- 季松岭张潜章涛周正平黄跃徐燕
- 关键词：脊髓形态学
- 慢性特发性血小板减少性紫癜患者活化T细胞CD30表达与凋亡关系被引量：6
- 2010年
- 本研究检测慢性特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者外周血单个核细胞中CD3+数、CD3+/CD30+T细胞比值和活化后T细胞凋亡率及外周血血小板计数,探讨2组间的差异和患者活化T淋巴细胞CD30表达率与凋亡率和血小板计数的相关性。以40例慢性ITP患者为研究对象,24例健康志愿者为正常对照,体外培养刺激T细胞活化后运用流式细胞仪检测外周血单个核细胞悬液中CD3+数、CD3+/CD30+T细胞比值及CD3+T细胞凋亡率,同步检测血小板计数,分析ITP组与对照组各指标间的差异和相关性。结果表明:ITP组外周血CD3+细胞数与对照组无明显差异(p>0.05)。ITP组活化T细胞表面CD30表达率明显高于对照组(p<0.01)。ITP组活化T细胞凋亡率明显低于对照组(p<0.01)。活化后T细胞表面CD30表达与其凋亡率呈负相关(r=-0.786,p<0.01)。活化T细胞凋亡率与血小板计数呈正相关(r=0.680,p<0.01)。结论:慢性ITP患者活化T细胞CD30的高表达导致了T细胞活化后凋亡受阻,在体内蓄积引起免疫功能紊乱,使血小板减少。
- 张耀陈琦方宁
- 关键词：特发性血小板减少性紫癜T淋巴细胞CD30
- 人PPARα受体cDNA全长序列的克隆及测序
- 2006年
- 目的对人过氧化物酶体增殖物激活受体α(hPPARα)全长cDNA序列进行克隆并测序,为构建含hPPARα基因真核表达载体奠定基础。方法通过逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)从HepG2细胞总RNA克隆hPPARα全长cDNA序列,胶回收目的条带后与pMD19-T载体连接并转化DH5α感受态菌,用BamH I、Sal I双酶切及基因测序筛选鉴定阳性克隆pMD19-hPPARα-T载体中hPPARα基因的完整性和忠实性。结果经酶切和DNA测序证实pMD19-hPPARα-T载体中插入的hPPARα基因序列与GeneBank中提交的序列(NM001001928)一致。结论成功克隆了hPPARα基因,构建了pMD19-hPPARα-T中间载体,为含hPPARα基因真核表达载体的构建奠定了基础。
- 章涛周元国陈代雄周岐新
- 关键词：CDNA克隆T载体测序
- 定量PCR快速检测动物食品中沙门菌污染被引量：3
- 2009年
- 沙门氏菌是动物性食品中的重要食源性致病菌,建立其快速检测方法对动物性食品的质量控制具有重要作用。根据沙门氏菌16srDNA、dT fermentation等基因或DNA功能区序列设计PCR引物,通过比较3种不同的基因组DNA提取方法,提取待检样品总DNA,进行多基因定量PCR检测。结果表明,该方法简单快速且灵敏度高,在动物食品中的检测灵敏度可达10cfu/g,整个检测时间在10h以内。说明该方法对检测动物中沙门氏菌具有特异性高且灵敏、快速等特点,适用于快速、准确地检测动物中沙门氏菌的需要。
- 岳昌武吕玉红刘坤祥陈泽慧白国辉
- 关键词：动物食品沙门菌定量PCRDNA提取
- 艾迪联合抗癌药物对肝癌细胞系体外药物敏感性研究被引量：1
- 2003年
- 目的 通过测定艾迪及艾迪联合抗癌药物ADM、DDP、5-Fu、MMC对肝癌细胞系7721细胞的体外药物敏感性试验,为肝癌化疗、介入治疗用药提供参考依据。方法 用24孔板培养肝癌细胞系7721细胞.观察细胞在单药及联合用药时的生长、抑制和集落形成情况,以判定药物的敏感性。结果 艾迪对肝癌细胞系7721细胞有抑制作用,引起癌细胞G0/G1期阻滞,艾迪与MMC和ADM有协同作用,其中以艾迪和ADM联合应用时作用最强。结论 艾迪对肝癌细胞系7721细胞有抑制作用,剂量增加与疗效提高有较大关系;艾迪与ADM和MMC联合应用,有协同作用。
- 汤明张逸群王欢方宁豆晓伟
- 关键词：肝癌细胞系药物敏感性试验
- 大鼠股直肌肌纤维型组成及分布研究被引量：2
- 2007年
- 目的探讨大鼠股直肌的肌纤维型组成和分布,以了解该肌功能。方法取成年SD大鼠股直肌组织进行冰冻切片(8μm厚),采用Guth-Samaha肌球蛋白ATP酶组织化学染色法并稍做改良,对其进行肌纤维分型研究。结果大鼠股直肌经肌球蛋白ATP酶组织化学染色后可明确分出2种肌纤维型,即白色的Ⅰ型纤维(慢缩纤维)和深褐色的Ⅱ型纤维(快缩纤维),2种肌纤维在肌内呈棋盘样均匀分布;图像分析仪计数Ⅰ纤维占(24.6±3.1)%,Ⅱ型纤维比例为(75.4±6.3)%,2者比较差异显著(P<0.01)。结论大鼠股直肌的肌纤维组成以Ⅱ型纤维为主,属于力量速度型肌。
- 张潜章涛王正义薛黔
- 关键词：肌纤维型
