中国科学院发育生物学研究所遗传与发育生物学研究所
- 作品数：354 被引量：2,607H指数：29
- 相关作者：金振华邓满齐严绍颐张玉廉沈玉更多>>
- 相关机构：北京大学生命科学学院中国科学院动物研究所扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生化学工程更多>>
- 鸡胚肝凝集素受体的放射自显影和扫描电镜观察
- 1991年
- 近些年来用标记过的外源凝集素作探针以研究细胞膜的结构和功能已取得很大进展。本文首次用^(125)I标记鸡胚肝凝集素,再以^(125)I-凝集素亲和标记鸡胚肝细胞。标记的鸡胚肝细胞经放射自显影(ARG),可用扫描电镜(SEM)对细胞表面受体的位点进行直接观察,以研究鸡胚肝凝集素受体的分布特征。
- 陈清轩史瀛仙
- 关键词：凝集素受体放射自显影电镜
- 通过mRNA差异显示分离一个新的斑马鱼胚胎发育基因被引量：6
- 1998年
- 无脊椎动物果蝇形态发生分子机理被揭示之后 ,脊椎动物形态发生分子机理的研究成为发育生物学的研究焦点 .作为脊椎动物研究模型的斑马鱼 ,其胚胎发育基因的分离无疑是进行该研究的入手点 .分离斑马鱼胚胎发育基因有多种有效的方法可供选择 .本文用mRNA差异显示技术对斑马鱼卵受精后 4 ,5和 6h(2 8 5℃ )的胚胎 (分别相当于oblong ,dome和shield 3个时期[1] ,分别称为囊胚、原肠胚和神经胚 )的mRNA进行了差异显示 ,对其中一个神经胚特异的cDNA片段 (pNs 2 )进行了克隆和序列分析 ,与Genbank中已有的基因序列比较后发现 ,该片段是一个新的基因片段 .采用整体原位杂交 (wholemountinsituhybridization)技术 ,对该基因在斑马鱼胚胎发育过程中的表达进行了研究 。
- 李书鸿郭绍东孙方臻
- 关键词：斑马鱼基因胚胎发育
- 不同发育状态下胡萝卜胚根基因的差异表达被引量：15
- 1996年
- 研究表明,在真核生物中除少数看家基因外,大多数基因的表达不仅具有严格的时空特异性,而且在不同的发育阶段之间还存在着明显的异质性,在生物体的某一特定的发育阶段,细胞的RNA除了rRNA和tRNA之外,便是在这一特定时期表达的所有基因转录本的集合体。由此可见,处在不同发育阶段的mRNA,不论在数量上还是在种类上都存在着明显的差别。应用mRNA差别显示技术(mRNA differential display)可以从含有大约15000种mRNA的群体中,迅速地鉴别并克隆出差别表达的特定基因。
- 陈春霞柳浩吴乃虎黄美娟
- 关键词：胡萝卜分化基因表达
- 叶绿体基因mRNA 3＇－UTR的功能被引量：3
- 1995年
- 叶绿体基因ｍＲＮＡ３＇－ＵＴＲ的功能钟珍萍，吴乃虎（中国科学院发育生物学研究所，北京１０００８０）自然界一切复杂的生命现象，包括机体的生长、发育乃至细胞分裂、分化，无一不是基因表达有条不紊的调控的结果。其调控作用体现在，就某种基因而言，其表达多具时间...
- 钟珍萍吴乃虎
- 关键词：叶绿体叶绿体基因
- 乳腺特异性基因转基因山羊表达特性的研究被引量：3
- 1999年
- 采用胚胎显微注射的方法，将牛乳酪蛋白（αｓｌｃａｓｅｉｎ）基因作为乳腺定位表达调控序列与人乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ／ａｙｗ）基因组成的两个融合构件（λ１０６和λ２０７）导入山羊原核期受精卵。产出的Ｇ０代羊用ＨＢｘ和ｃａｓｅｉｎ８００两个探针进行ＰＣＲ＋Ｓｏｕｔｈｅｒｎ整合检测，分别获得λ１０６和λ２０７构件整合阳性羊１６和２４只。用ＥＬＩＳＡ／ＨＢｓＡｇ试剂盒检测转基因羊乳汁中的重组人乙型肝炎表面抗原（ｒＨＢｓＡｇ），在Ｇ０代转基因羊中，λ１０６乳腺表达率是４７２％（１７／３６）；λ２０７是６８６％（２４／３５）。Ｇ０代转基因母羊与正常公羊交配，所产的４１只Ｇ１代羊中有１３只整合阳性（３１７％），其中６只Ｇ１代整合羊中，乳腺表达率为６６６７％（４／６）。表达阳性羊乳免疫注射６只成年兔，结果在它们的血清中全部检测到ＨＢｓＡｂ（６／６）。试验表明，由αｓｌｃａｓｅｉｎ和ＨＢｓＡｇ／ａｙｗ基因组成的λ１０６和λ２０７两个融合基因构件导入山羊原核期受精卵后均可获得乳腺特异性表达转基因羊，最高表达量达１３０７μｇ／ｌｉｔｅｒ，由此证明通过牛αｓｌ酪蛋白调控序列作为定位基因来指导ＨＢｓＡｇ／ａｙｗ基?
- 成勇成国祥王杏龙穆宗尧陈建泉徐少甫劳为德张靖溥张旭晨魏允影
- 关键词：乙肝表面抗原乳腺转基因山羊基因表达山羊
- 一种与核酸复合的脱落酸结合蛋白被引量：14
- 1998年
- 用抗脱落酸 (Abscisicacid ,ABA)结合蛋白 (ABBP)血清作为探针筛选玉米cDNA表达文库 ,从 2 0 0 0 0 0个独立噬斑中 ,仅获得 1个编码多肽的cDNA克隆 ,它与动物的某些核酸结合蛋白基因的同源性高达 6 0 %～ 6 5 % .此外 ,获得 1 2 0个编码玉米 1 7SrRNA的cDNA克隆 .鉴于此 ,对经ABA亲和纯化所得的ABBP及其抗血清进行了复查 .发现rRNA伴随ABBP而存在 ;该抗血清除能识别ABBP外 ,还能识别rRNA ,推断某些ABBP具有与核糖核酸结合的性质 。
- 郑志富金振华周燮夏凯马诚
- 关键词：植物免疫筛选核酸
- 神秘的克隆
- 1998年
- 神秘的克隆周琪（中国科学院发育生物学研究所）克隆羊Ｄｏｌｙ诞生在英国爱丁堡罗斯林研究所的克隆羊“多莉”，不仅把整个世界搅得沸沸扬扬，在９７岁末又荣登国际十大新闻榜首。克隆羊的诞生标志着一个科技时代的来临，那么什么是克隆呢？在自然界中，有性生殖占有主要...
- 周琪
- 关键词：克隆动物细胞核移植卵细胞动物克隆显微操作胚胎细胞
- 超排山羊卵巢卵母细胞体外成熟的初步研究被引量：12
- 1993年
- 对超排山羊卵巢卵母细胞进行体外成熟培养的初步研究:试验一,分别用6、7、9、16号针头抽吸2～6mm卵泡,获有用卵母细胞百分率:分别为61.67％(37/60)、65.92％(178/270)、56.73％,(59/104)、31.43％(22/70);试验二,以TCM 199+10mol/L MHEPES+青霉素(6μg/m1)+链霉索(5μg/ml)为基础培养液(BM),再分别加入不同成分,配成5种卵母细胞成熟液:(A)BM+10％EGS(发情羊血清),(B)BM+10％EGS+HCG(2.5μg/ml,),(C)BM+10％EGS+HCG+E,(1μg/ml),(D)BM+10％FCS+HCG十E_2; (E)BM+10％EGS+HCG+E_2+颗粒细胞(1.5×10~6～3.0×10~6个/ml)。在38.5℃,5％CO_2培养26h,排卵后第1天卵巢母细胞体外成熟率分别为67.67％(20/30),60.42％(29/48),83.67％(41/49),67.79％(40/59),80.82％(59/73),排卵后第5天卵巢卵母细胞,在培液D中体外成熟率为71.43％(45/63)。研究表明,超排山羊卵巢卵母细胞经体外成熟可获得大量廉价的成熟母细胞。
- 徐少甫成国祥成勇王杏龙杜福良孙长美穆宗尧吴维芬王玉阁邹贤刚杜淼
- 关键词：山羊卵母细胞体外成熟
- 人生长激素基因导入金鱼受精卵内的整合、表达和促生长效应研究被引量：3
- 1995年
- 通过显微注射法把小鼠ＭＴ启动子与人生长激素的融合基因（ＭＴ－ｈＧＨ）导入红龙睛金鱼受精卵内，共注射１５０６个卵子，获得８００多尾成鱼。经斑点和Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分子杂交表明，导入的ＭＴ－ｈＧＨ基因与部分受体鱼的染色体ＤＮＡ发生了整合，整合率为２２％，转基因鱼血清中的生长激素含量平均高于对照组，平均生长速度高于对照组。导入的ＭＴ－ｈＧＨ基因可以遗传给后代。
- 史瀛仙张玉廉沈玉于建康
- 关键词：显微注射转基因
- 由成年转基因山羊体细胞而来的克隆山羊被引量：64
- 2002年
- 在已经获得的乳腺特异性表达人促红细胞生成素 (rhEPO)成年转基因山羊 (Caprahircus)的基础上 ,取其耳尖成纤维细胞和卵巢颗粒细胞 ,进行体外传代培养 ,然后将这种培养的转基因山羊的体细胞移入去核的处于第Ⅱ次减数分裂中期的卵母细胞中 ,并进行电融合 ,构建重构胚胎 ,重构胚胎在体内培养 6d ,再将发育至囊胚或桑椹胚的重构胚胎移入同步情期的寄母羊子宫内。结果 ,有 2只寄母羊妊娠并最终产下 2只成活的克隆山羊。她们分别来自同一成年母羊的耳尖成纤维细胞和卵巢颗粒细胞。克隆羊经PCR RFLP图谱分析显示 :以克隆羊组织DNA为模板的PCR产物与相应的提供体细胞的基因羊的PCR产物的酶切图谱完全一致 ;并且经PCR对外源hEPO基因检测表明 2只克隆山羊均携带hEPO外源基因。
- 成勇王玉阁罗金平沈玉杨跃飞鞠辉明邹贤刚徐少甫劳为德杜淼
- 关键词：体细胞克隆山羊
