同济大学生命科学与技术学院蛋白质研究所
- 作品数：25 被引量：144H指数：6
- 相关作者：王志强吴作基蒋蕾蕾张玲王华丙更多>>
- 相关机构：中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所华东理工大学生物工程学院四川大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划海外青年学者合作研究基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学理学更多>>
- 芋螺毒素的翻译后修饰被引量：1
- 2009年
- 芋螺毒素是一类由芋螺毒液管分泌的生物活性小肽,能特异地作用于各种离子通道和神经递质受体.芋螺毒素的一个显著特点是具有高度的翻译后修饰,包括Glu的γ羧基化、L型氨基酸到D型氨基酸的异构化、Pro等的羟基化、Trp的溴代等.这些翻译后修饰在提高芋螺毒素分子多样性的同时,也增强了芋螺毒素的功能.现主要针对芋螺毒素中的各种翻译后修饰的发现、分布、功能和参与反应的酶系统进行综述.
- 张玲袁多多戚正武
- 关键词：芋螺毒素活性多肽翻译后修饰
- 小分子蛋白酶抑制剂及多肽毒素的研究回顾被引量：4
- 2009年
- 对以往小分子蛋白酶抑制剂及多肽毒素的研究成果作一历史性回顾,重点介绍了Bowman-Birk家族的绿豆胰蛋白酶抑制剂,对此抑制剂的Lys活性功能区作了解析.它是双头抑制剂,有两个功能区,用蛋白与基因测序、基因表达、突变、肽段合成等手段证实,其核心结构是一个由两个相连九元环组成的16肽,与天然14环肽的向日葵抑制剂极类似.另一深入研究的抑制剂是27肽的天花粉胰蛋白酶抑制剂,属于南瓜族,介绍了该家族的基因序列.多肽毒素的研究包括蝎毒毒素及芋螺毒素.本文介绍了多种东亚马氏钳蝎新的钾通道毒素,有的是钙离子依赖的BK或SK钾通道毒素,有的是电压门控毒素,有的具有两个不同的功能区,阐明了它们的构效关系.表达的重组蝎氯毒素有望用于恶性胶质瘤的治疗.芋螺毒素分子量小、序列多变、功能广泛,有更好的应用前景.从中国南海16种芋螺中纯化了50个结构新的芋螺毒素,克隆了134个新基因;确定了3个新超家族,命名为V,Y,K超家族;研究发现,在某些芋螺毒素一级结构中有新的二硫键骨架和二硫键配对、独特的模板(motif)、氨基酸的D型化等;分析了A超家族的基因组结构,在内含子的3′端有一非常保守的序列,可用作引物克隆更多新的芋螺毒素基因;阐明了个别芋螺毒素的生理功能.
- 戚正武
- 关键词：活性多肽蛋白酶抑制剂
- O-超家族芋螺毒素研究进展被引量：1
- 2005年
- O-超家族芋螺毒素是芋螺毒素中较复杂的超家族之一,它包括δ-、μO-、ω-、κ-等若干成员,通常由24～33个氨基酸组成,具有相同的三对二硫键骨架,形成ICK模体,能特异性作用于电压门控离子通道。本文主要对该芋螺毒素生物化学及分子遗传学特征、生理学和药理学特征、结构与性能的关系及应用研究与前景等进行综述。
- 张伟韩禹宏
- 关键词：离子通道二硫键芋螺毒素
- M-超家族芋螺毒素研究进展被引量：2
- 2006年
- 芋螺毒素是来源于芋螺毒液的活性多肽,具有分子质量小,作用靶点广泛且特异性高的优点,是一种丰富的生物资源。M-超家族芋螺毒素是芋螺毒素中较为复杂的超家族之一,包括μ-、ψ-和κM-家族,分别作用于电压门控钠通道、N型乙酰胆碱受体和电压门控钾通道。另外,mr3a和tx3c的发现预示M-超家族可能存在新的家族。本文对这些芋螺毒素的生理学和药理学特征、结构与功能的关系及应用研究进行综述。
- 袁多多王春光
- 关键词：芋螺毒素钠通道钾通道
- 壳聚糖酶的纯化、基因克隆、及其酶学特性的鉴定被引量：7
- 2008年
- 从被污染的酵母培养液中分离到一菌株,经鉴定为一种革兰氏阳性杆菌,其所分泌的主要蛋白产物经纯化后,测定了它的N-端氨基酸序列,与已知的几种内切壳聚糖酶十分类同。根据其同源DNA序列,通过PCR方法克隆了其全长基因。该菌株生长极快,其组成型分泌产物主要为内切壳聚糖酶。该酶通过疏水层析和分子筛两步即得到纯化。进一步研究了该酶的酶学性质及其催化壳聚糖降解为壳寡糖的条件。提高该壳聚糖酶的产率后,有望用于壳寡糖的生产,有实际应用价值。
- 徐瑞郭占云戚正武
- 关键词：壳聚糖酶壳聚糖壳寡糖分离纯化
- 微管解聚相关蛋白质Kinesin-13、Stathmin和Katanin被引量：2
- 2008年
- 微管是细胞骨架的主要成份,参与细胞内物质的运输与细胞形态的维持,还与有丝分裂和减数分裂等生命活动密切相关。大多数微管都表现出动力学的不稳定性,处于动态的聚合和解聚及之间的随机转换状态。Kinesin-13、Stathmin和Katanin是三类能够解聚微管的蛋白质,在纺锤体组装、染色体分离和神经元发育过程中起重要作用。本文主要对这三类微管解聚相关蛋白质的结构、功能、解聚机制进行了简要介绍,并对它们的解聚机制进行了比较。
- 吴作基蒋蕾蕾王春光
- 关键词：微管蛋白STATHMINKATANIN
- 绿豆胰蛋白酶抑制剂对蛋白质前体加工酶的抑制活性被引量：4
- 2006年
- 目的:从绿豆中提纯天然的绿豆胰蛋白酶抑制剂(MBTI),并测定了它对前体加工酶的抑制活性。方法:通过硫酸铵沉淀、分子筛层析、离子交换、亲和层析和反相高压液相等一系列层析方法,纯化了MBTI;通过筛选得到两种蛋白质前体加工酶Kexin和Furin的高表达酵母菌株和COS-7细胞,用硫酸铵沉淀和分子筛的方法纯化这两种前体加工酶,并测定和计算MBTI对其的抑制活性。结果:纯化的MBTI在HPLC上洗脱为单峰,在SDS-PAGE中为单一条带。MBTI对Kexin的抑制常数达到3.9×10-9mol/L,对Furin有一定的抑制活性,但是抑制活性较弱。结论:MBTI对于Kexin和Furin两种蛋白前提加工酶都有抑制活性,尤其对Kexin抑制活性明显,如经进一步改造将有望成为理想的蛋白前体加工酶抑制剂。
- 曲梅韩锦铂孟延发
- 关键词：绿豆胰蛋白酶抑制剂FURIN
- 毛细管电泳法测定重组人源化IgG2抗体的纯度被引量：4
- 2018年
- 目的建立利用毛细管电泳法测定重组人源化免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)纯度的方法,并进行优化和验证。方法采用单因素法,对稀释液、碘乙酰胺浓度(非还原条件)、加热方式、进样电压、进样时间、分离电压、样品盘和卡盒温度进行多水平优化,并利用优化的方法测定IgG2的纯度。以峰面积对样品加样量进行线性回归,确定该方法的线性范围,并对该方法进行精密度、准确度及溶液稳定性验证。结果最佳电泳条件为:选用超纯水作为稀释液,250 mmol/L碘乙酰胺(非还原条件),70℃干热10 min,进样电压为5 kV,进样时间为30 s,分离电压为15 kV,样品盘和卡盒温度为20℃。在优化的色谱条件下,在还原条件下,IgG2纯度检测的线性范围为50~150μg,相关系数为0.998,重复性的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为0.14%,中间精密度的RSD为0.24%,且20℃放置13 h稳定;在非还原条件下,IgG2纯度检测的线性范围为50~150μg,相关系数为0.999,重复性的RSD为0.36%,中间精密度的RSD为0.16%,且20℃放置13 h稳定。结论该方法线性关系良好,且精密度、准确度、灵敏度较高,测定结果稳定可靠,适用于重组人源化IgG2的纯度分析。
- 黄碧君黄艳胡红琴郭占云
- 关键词：免疫球蛋白G纯度毛细管电泳法
- 蛋白质二硫键异构酶家族的结构与功能被引量：17
- 2009年
- 蛋白质二硫键异构酶(protein disulfide isomerase,PDI)家族是一类在内质网中起作用的巯基-二硫键氧化还原酶.它们通常含有CXXC(Cys-Xaa-Xaa-Cys,CXXC)活性位点,活性位点的两个半胱氨酸残基可催化底物二硫键的形成、异构及还原.所有PDI家族成员包含至少一个约100个氨基酸残基的硫氧还蛋白同源结构域.PDI家族的主要职能是催化内质网中新生肽链的氧化折叠,另外在内质网相关的蛋白质降解途径(ERAD)、蛋白质转运、钙稳态、抗原提呈及病毒入侵等方面也起重要作用.
- 王志强周智敏郭占云
- 关键词：蛋白质二硫键异构酶内质网二硫键蛋白质折叠
- 蛋白质组学在神经退行性疾病中的研究进展被引量：2
- 2007年
- 蛋白质组学是后基因组时代兴起的新型学科,是从整体水平对蛋白质的综合分析。阿尔茨海默病、帕金森病、肌萎缩侧索硬化症等是最常见的神经退行性疾病。应用蛋白质组学对它们进行研究,不仅可从蛋白质水平上揭示疾病的本质,还有助于全面探讨其病理机制,建立诊断标准,发现药物治疗靶点。
- 何胜祥陈平郭占云邵晓霞
- 关键词：蛋白质组学阿尔茨海默病帕金森病肌萎缩侧索硬化症
