南方医科大学公共卫生与热带医学学院微生物学系
- 作品数：102 被引量：326H指数：10
- 相关作者：惠长野赵铁胡平仲华林琳更多>>
- 相关机构：广州大学化学化工学院广州大学化学化工学院食品系中国科学院深圳先进技术研究院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广州市科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学轻工技术与工程更多>>
- 大肠杆菌ER2566表达的重组Thanatin的敏感抗菌活性被引量：2
- 2010年
- 目的原核表达抗菌肽,纯化并鉴定其抗菌活性。方法用人工合成的方法合成编码thanatin21肽的DNA序列(并使用了大肠杆菌的偏爱密码子),克隆入pTYB11质粒,转化大肠杆菌ER2566。thanatin与内含肽融合表达,内含肽是一种具有自剪切功能能够自动将目标蛋白及内含肽分离的蛋白剪切元素。内含肽-thanatin以可溶性蛋白的方式表达,存在于细胞裂解液的水相中,将细胞裂解液过几丁质亲和层析柱,内含肽-thanatin能够特异地结合到几丁质柱上。在层析柱上用DTT/半胱氨酸缓冲液在4℃切割过夜,切割下来的thanatin用洗脱液洗脱。结果在最先洗脱下来的4ml洗脱液中蛋白浓度达到245μg/ml。纯化后的thanatin具有很好的抗革兰氏阴性菌以及真菌的能力,如弗氏志贺菌(Shigella flexneri)、肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)、宋内志贺菌(Shigella snnei)、大肠杆菌O157(Escherichia coli O157)、产毒大肠杆菌(toxinproducing Escherichia coli)、绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)、白色念珠菌(Candida albicans),尤其在抗耐药菌方面表现出显著优势,如耐药肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)及产超广谱β内酰胺酶(Extended-Spectrum β-Lactamases,ESBLs)大肠杆菌。重组Thanatin对80株产ESBLs耐药大肠杆菌及30株敏感的大肠杆菌所产生的抑菌圈的大小没有显著性差异(P>0.05,t-test),具有相同的抗菌能力。结论在大肠杆菌ER2566中表达的thanatin对革兰氏阴性菌尤其是临床耐药菌有很好的抗菌活性,克服了抗生素耐药性的问题。Thanatin具有开发成抗革兰氏阴性菌药物的潜力。
- 王沛珍顾金保罗军彭鸿娟
- 关键词：THANATIN原核表达抗菌活性
- 脑膜炎大肠杆菌毒力岛新基因cgIE的表达、功能分析和鉴定
- ＜正＞脑膜炎大肠杆菌（Escherichia coil,E．coli）毒力岛GimA与新生儿细菌性脑膜炎的发生密切相关。GimA全长20．3kb,GC含量为46．2％,与其它E．coli基因组GC含量（50．8％）不同。...
- 曹虹陈丽丹杨军贡树基黄胜和
- 文献传递
- 肠出血性大肠杆菌O157:H7紧密黏附素与受体的研究进展被引量：2
- 2008年
- 肠出血性大肠杆菌O157∶H7能引起出血性结肠炎、溶血性尿毒综合征、血小板减少性紫癜等。大肠杆菌O157∶H7的主要毒力因子紧密黏附素由其毒力岛LEE岛上的eae基因编码,C末端的280个氨基酸是受体结合位点。目前发现紧密黏附素受体有紧密黏附素转位受体(Tir)、核仁素和β1整合素。紧密黏附素主要与受体Tir结合,通过Ⅲ型分泌系统转位到宿主细胞,在Tir-细胞骨架偶联蛋白(Tccp)的参与下,与N-Wiskott aldrich综合征蛋白、肌动蛋白-相关蛋白2/3相互作用产生信号级联放大,导致宿主大肠黏膜上产生黏附-抹去损伤。
- 彭丽娟万成松
- 关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7核仁素Β1整合素
- 2010年冬-2011年春广州地区儿童腺病毒的分子流行病学研究
- 张其威赵素慧朱冰王长兵朱利赵卫万成松
- 新发急性呼吸道疾病病原体:人14、55型腺病毒的基因组学研究
- 本研究从2010年10月急性化脓性扁桃体炎患儿体内分离出中国第一株14型腺病毒，并完成了全基因组测序;分析表明，该病毒属于人55型腺病毒为11型和14型腺病毒基因组重组的病毒。
- 张其威曹彬朱冰王长兵陈翊赵素慧万成松
- 关键词：腺病毒全基因组
- 文献传递
- 肠出血型大肠埃希菌O157∶H7 EspF蛋白诱导细胞凋亡的研究
- 周莹王春晖张其威万成松
- 脑膜炎大肠杆菌毒力岛新基因cglE的表达、功能分析和鉴定
- 脑膜炎大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)毒力岛GimA与新生儿细菌性脑膜炎的发生密切相关。GimA全长20．3kb,含有4个操纵子,编码15个蛋白质,包括1个与细菌致病相关的侵袭素IbeA。功能预...
- 曹虹陈丽丹杨军贡树基黄胜和
- 文献传递
- 肠出血性大肠埃希菌O157∶H7 espF基因缺陷突变株的构建及其特性初步研究被引量：1
- 2010年
- 目的为研究肠出血性大肠埃希菌O157∶H7效应分子EspF功能,构建EHECO157∶H7espF基因缺陷突变株,并对其生物学特性进行初步研究。方法采用OL-PCR和自杀性质粒pCVD442介导的同源重组方法构建中间缺失162bp的espF基因缺陷突变株,并比较突变株与野生株对结肠癌细胞Lovo的黏附性。结果 PCR及序列分析证实,缺陷突变株的espF基因缺失了162bp碱基,野生株对Lovo细胞的黏附率明显高于突变株(P<0.001)。结论成功构建EHECO157∶H7espF基因缺陷突变株,突变株黏附Lovo细胞能力减弱,表明EspF促进细菌的粘附,为进一步研究其在EHECO157∶H7的A/E损伤中的作用奠定基础。
- 杨瑜王春晖周莹万成松
- 关键词：同源重组
- RNA干扰用于抗HBV感染的研究进展
- 2008年
- 乙型肝炎病毒(HBV)感染可引起急性和慢性乙型肝炎,最终可能导致肝硬化、肝癌等严重后果。作为一种可以帮助生物抵抗外在感染的体内防御机制,近年来RNA干扰已成为人们进行抗感染和基因治疗研究的有力工具。本文对RNA干扰技术在抗HBV感染方面的研究进展进行综述。
- 彭亮刘志华丁振华曹虹
- 关键词：乙型肝炎病毒RNA干扰基因治疗
- 幽门螺杆菌基因克隆表达及其抗原表位分析被引量：2
- 2008年
- 目的克隆表达幽门螺杆菌基因hp0410,构建12肽噬菌体展示库,对hp0410的抗原表位进行筛选和分析,为构建多表位嵌合疫苗提供理论依据。方法从幽门螺杆菌NCTC11639基因组DNA中扩增出hp0410,并克隆入pGEX-4T-1中表达。利用纯化重组蛋白筛选出特异性单抗E018,利用该单抗和M13噬菌体12肽随机肽库,构建HP0410抗原表位的抗原展示库。竞争-抑制实验验证获得的阳性噬菌体并测序,生物信息学分析HP0410的抗原表位。结果成功构建可高水平分泌型表达HP0410的原核表达系统。对13株阳性噬菌体测序后获得8个表位,其中候选表位1个。HP0410可有效抑制展示该表位的噬菌体与单抗E018结合。分析表明,获得的8个表位与HP0410同源性不高,但处于生物信息学预测的区域。结论获得8个HP0410高抗原性区域的模拟表位,其中1个为模拟单抗E018特异性结合的抗原决定基的候选表位。
- 胡平罗军赵卫张文炳龙北国
- 关键词：生物信息学
