公共文化服务平台

暨南大学生命科学技术学院生物工程研究所: 作品数：329 被引量：1,452H指数：16; 相关作者：赵利淦朱保伟刘杰森陈迪陈琼玉更多>>; 相关机构：中山大学生命科学学院华南理工大学食品与生物工程学院同济大学附属第十人民医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学化学工程农业科学更多>>

合作机构

OX40L在小鼠B16黑素瘤细胞中表达及对活化淋巴细胞凋亡影响: 2009年; 目的:构建OX40L的真核表达载体,分析其在B16细胞中的表达,研究OX40L对活化T淋巴细胞凋亡的影响。方法:以小鼠C57BL/6脾脏的cDNA为模板,PCR扩增小鼠OX40L基因,构建真核表达载体pVAX1-OX40L,转染B16细胞后,荧光染色检测OX40L的表达;利用AnnexinV-PE凋亡试剂盒,检测B16黑素瘤细胞-淋巴细胞体外混合培养中对活化淋巴细胞凋亡的影响。结果:成功构建OX40L的真核表达载体,并转染B16细胞中,流式细胞术和激光共聚焦显微术均可检测到OX40L表达于B16细胞表面。淋巴细胞体外混合培养显示,表达OX40L的B16细胞组活化淋巴细胞的凋亡率为6.57%,而空质粒转染组为17.24%。结论:OX40L能表达于B16细胞表面,并能显著抑制活化淋巴细胞凋亡。; 高琦徐丽慧郭贺欧阳东云王笑迎何贤辉; 关键词：OX40L 黑素瘤淋巴细胞混合淋巴细胞培养

利用一种新型反应器——BelloCell培养动物细胞被引量：3: 2010年; 利用BelloCell这种新型的生物反应器,来培养COS7细胞和昆虫Sf 9细胞。COS7细胞和昆虫Sf 9细胞分别用T75培养瓶及spinner flask培养之后,经细胞计数接入BelloCell之中,同时检测并分析培养基中葡萄糖、谷氨酰胺、乳酸和氨浓度变化情况。COS7细胞初始接种量为4.208×107cells,最终在培养156h后细胞数量达到了4.68×108cells,是初始细胞量的11倍。sf 9细胞初始接种细胞量为1×108cells,在培养192h时,细胞总量达到了最高为4.01×109cells,是最初细胞量的40倍。培养基的代谢物进行有规律的变化。BelloCell适合COS7细胞和昆虫Sf 9细胞高密度大规模培养,为动物细胞高效大规模表达药物蛋白,奠定重要的基础。; 郑云程吴建虹孙奋勇廖美德谢秋玲; 关键词：COS7细胞昆虫细胞细胞培养

重组血管活性肠肽的制备及鉴定: 2009年; 为利用基因工程技术获得重组血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP),根据大肠杆菌的密码偏好性,设计并人工合成编码28个氨基酸的VIP的cDNA。克隆到表达载体PTWIN,构建重组质粒PTWIN-VIP,转化宿主菌E.coli Strain ER2566,构建表达工程菌。实现由重组VIP,内含肽与纤维素结合域(cellulose binding domain,CBD)组成的融合蛋白表达。融合蛋白经几丁质亲和层析纯化,通过改变温度和缓冲液PH值切割融合蛋白,获得目的多肽。所得的多肽经质谱测定分子量结果与理论值相符。生物活性分析表明,重组VIP能显著降低急性炎症小鼠血清中抵抗素的水平,发挥抗炎作用。重组VIP的制备及其抗炎活性的鉴定为其深入开发奠定了基础。; 谢珊珊余榕捷曾乐李娟王静静洪岸; 关键词：血管活性肠肽内含肽抗炎作用

二氢杨梅素对人乳腺癌细胞MDA-MB-231的体外抗增殖作用被引量：12: 2012年; 0引言二氢杨梅素（dihydromyricetin,DMY）,化学名为3,5,7,3′4′5′-六羟基-2,3双氢黄酮醇,是从藤茶（Ampelopsis grossedentata）等植物茎叶中提取的一种二氢黄酮醇化合物。; 周防震张晓元孙奋勇郭勇; 关键词：二氢杨梅素人乳腺癌细胞抗增殖细胞凋亡金属基质蛋白酶

hEGF和hbFGF的C端(78-154aa)融合蛋白的表达、纯化及活性测定被引量：3: 2002年; 目的 :将人表皮生长因子 (hEGF)与人碱性成纤维细胞生长因子 (hbFGF)的C端连接 ,构建出既可与肝素结合 ,又具有促进细胞生长活性的融合蛋白 ,并在大肠杆菌中高效表达。方法 :将PCR扩增hEGF全基因与PCR扩增hbFGF 5 端的 2 31bp的片段连接 ,克隆到表达载体pJN ,构建出含融合基因的表达质粒pJRH。将pJRH转化BL2 1(DE3)表达菌株 ,获得融合蛋白的表达菌株pJRH(BL)。Westernblot检测表达产物免疫学活性。表达产物上肝素亲和柱和分子筛进行纯化。结果 :融合蛋白表达产量为 30 % ,融合蛋白不仅能与肝素结合 ,而且具有促细胞增殖的活性。Westernblot检测结果显示融合蛋白有EGF的免疫活性。融合蛋白的等电点为 5 2。结论 :本研究构建了一个hEGF和hbFGF的C端的融合蛋白 ,该蛋白基本保持了两者原有的生物活性。作为一个新的活性因子 ,本研究为探讨活性因子蛋白结构与功能的关系奠定基础。; 余榕捷张玲林剑谢秋玲孙奋勇蒲含林李志英; 关键词：尿抑胃素成纤维细胞生长因子 HEGF

重组PTD-maxadilan的制备与鉴定被引量：3: 2009年; 为了构建能够有效进入血脑屏障的新型融合蛋白PTD-maxadilan(PTD-MAX),设计编码融合蛋白PTD-MAX基因,克隆到表达载体pKYB,构建重组表达载体pKYB-PTD-MAX,转化大肠杆菌ER2566中。采用IPTG诱导由PTD-MAX、内含肽和几丁质组成的融合蛋白的表达。利用IMPACT(Intein Mediated Purification with an Affinity Chitin-binding Tag)介导的纯化系统制备目的融合蛋白PTD-MAX。所得的目的蛋白经激光飞行质谱测定分子量,结果与理论值相符。动物实验结果表明融合蛋白PTD-MAX能够有效穿越血脑屏障,重组PTD-MAX具有比天然maxadilan更显著(P<0.05)的抑制小鼠摄食的作用。融合蛋白PTD-MAX的构建和制备为其生物学功能的深入开发奠定了基础。; 曾乐余榕捷徐明芳陈建苏王静静李娟; 关键词：MAXADILAN 内含肽血脑屏障

bFGF促进大鼠创伤修复的实验研究被引量：4: 1998年; 创面愈合是由多种细胞和组织成分参与的复杂生理修复过程，生长因子在创伤修复中起着十分重要的作用，特别是ｂＦＧＦ作为创伤修复的重要生长因子已被学术界承认［１，２］。本实验利用大鼠创伤模型，来研究ｂＦＧＦ促创伤修复的剂量效应规律。１材料与方法１．１动物模型...; 李校坤林剑付小兵; 关键词：BFGF 创伤

碱性成纤维细胞生长因子对β-淀粉样蛋白诱导PC12细胞凋亡的抑制作用被引量：3: 2002年; 目的 :利用体外培养的PC12表现出神经细胞的特性 ,用Aβ2 5-3 5诱导PC12细胞凋亡 ,建立神经细胞毒性作用的模型 ,来探索bFGF对Aβ2 5-3 5作用和治疗老年性痴呆 (AD)的机制。方法 :通过Giema’s、PI染色法、DNA琼脂糖凝胶电泳、Westernblot及流式细胞仪研究了加入Aβ2 5-3 5培养的以及Aβ2 5-3 5和bFGF共培养的PC12细胞的形态和分子生物学改变及凋亡相关基因Bcl- 2 ,Bax表达的变化。结果 :Aβ2 5-3 5可诱导PC12细胞核DNA发生降解 ,出现染色质浓缩成块状、胞浆浓缩、胞膜内陷、凋亡小体形成等 ;而Aβ2 5-3 5和bFGF共培养的PC12细胞则能缓解这种形态学上的变化 ,细胞凋亡率减少 ,Bcl- 2的表达量上调而Bax的表达量下调。结论 :bFGF能抑制Aβ2 5-3 5对神经细胞的毒性作用 ,其机制可能是通过调控Bcl- 2、Bax的表达来实现的。; 朱大明宋照雷孙奋勇杨媛段锐林剑洪岸; 关键词：成纤维细胞生长因子细胞凋亡淀粉样Β蛋白

碱性成纤维细胞生长因子与阿尔茨海默病被引量：3: 2002年; Alzheimer’s disease(AD),which is one type of senile deimentia, has three remarkable pathologic characteristics-senile plaque,neurofibrillar tangles and neuronal death. As a neurotrophic factor, basic fibroblast growth factor(bFGF)is closely related to AD. This article reviewed the interaction between bFGF and AD-associated gene products(such as amyliod β protein,presenilin, apoloprotein E and microtubulin associated protein tau)and neuronal apoptosis. Some researchers suggested that bFGF may be put forward as potential therapeutic agent in AD and play a role in preventing or retarding the pathological process of this disease, alleviating or even eradicating the pathological insults of this disease.; 朱大明洪岸林剑; 关键词：碱性成纤维细胞生长因子阿尔茨海默病细胞凋亡蛋白质类 BFGF

P253R突变型FGFR2Ⅲc胞外段的表达、复性及活性研究(英文): 2011年; 成纤维细胞生长因子(Fibroblast growth factor,FGF)具有促进细胞增殖,诱导新生血管形成等重要生理作用,与肿瘤的发生及发展也有十分密切的关系。P253R是Apert综合症中发现的一种突变,可使FGFR2IIIc与FGF2亲和力大大增加,从而导致过度自分泌和旁分泌活性,引起骨骼发育异常。从人胎盘组织提取总RNA,通过RT-PCR扩增得到野生型FGFR2IIIc胞外段基因片段(wsFGFR2);再利用重叠延伸法以wsFGFR2基因片段为模板扩增得到P253R突变型FGFR2IIIc胞外段基因片段(msFGFR2,P253R是Apert综合征中发现的一种突变,可使FGFR2与FGF2亲和力大大增加)。msFGFR2基因克隆到pET3c载体,并在大肠杆菌BL21(DE3)中以包涵体的形式表达。经凝胶层析复性和肝素亲和层析纯化得到复性成功的活性蛋白,复性率为12%,纯度大于95%。MTT结果表明,msFGFR2能显著抑制FGF2促NIH3T3细胞增殖能力,并抑制前列腺癌DU145细胞的增殖,提示msFGFR2能有效阻断FGFs的细胞内信号通路,具有很好的产业化和临床应用前景。; 刘雪婷喻志红何水连陈安安王丁丁何颖张志成汪炬; 关键词：包涵体复性

暨南大学生命科学技术学院生物工程研究所

合作机构

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

暨南大学生命科学技术学院生物工程研究所

合作机构

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈