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华南农业大学园艺学院园艺生物技术研究所: 作品数：46 被引量：365H指数：12; 相关作者：陈大成王瑞霞赵春香魏小伞秦于玲更多>>; 相关机构：浙江大学农业与生物技术学院浙江大学农业与生物技术学院果树科学研究所西南农业大学园艺园林学院园艺系更多>>; 发文基金：国家自然科学基金广东省重大科技专项公益性行业(农业)科研专项更多>>; 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程更多>>

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菠萝胚性细胞悬浮系的建立: 菠萝(Ananas cornosus)在固体培养基上进行体细胞胚发生时，由于不断有数量较多原球茎和不定芽等分化导致肉眼很难将它们与胚胎发生植株之间区分开来。因此，研究菠萝胚性细胞悬浮系形成对排除原球茎和不定芽等的干扰，建...; 何业华方少秋卢敏马均胡中沂彭兵曹莉夏靖娴; 关键词：菠萝胚性细胞悬浮系愈伤组织显微观察不定芽分化; 文献传递

笋瓜韧皮部特异性启动子的克隆分析及新型植物表达载体构建被引量：6: 2005年; 根据已报道具韧皮部组织特异性的笋瓜韧皮部蛋白2(PP2)基因序列设计引物,以山西本地种笋瓜叶片基因组DNA为模板,用PCR法扩增得到了长度为966bp的PP2基因启动子片段,克隆入pUCm-T载体后,经鉴定获得了新的重组质粒pUCm-PSP,测序和序列分析表明与两个已报道的片段分别有95%和99%的同源性,推测具有相似的启动子功能。分别用限制性内切酶PstI和BglII双酶切重组质粒pUCm-PSP和由CaMV35S组成型启动子驱动GFP报告基因的双元植物表达载体pCAMBIA1302,分别回收pUCm-PSP重组质粒中的PSP小片段和pCAMBIA1302植物表达载体中去掉GFP报告基因上游CaMV35S组成型启动子的大片段,经连接、转化和鉴定后,构建了由PSP驱动报告基因GFP的新型植物表达载体pHZ03。利用细胞感受态法将新植物表达载体分别导入根癌农杆菌EHA105、GV3101、LBA4404和发根农杆菌Ri15834中,为进一步研究其表达功能奠定了基础。; 胡桂兵张上隆徐昌杰林顺权; 关键词：笋瓜植物表达载体

枇杷LEAFY同源基因的克隆及序列分析被引量：25: 2005年; 为从分子水平研究枇杷成花的机理,通过分析植物花分生组织决定基因LEAFY(LFY)同源基因的保守区序列,设计了1对简并引物,用PCR方法从枇杷栽培品种‘早钟6号’基因组DNA中扩增出1个1317bp的片段,把该片段克隆到pUCm T载体,测序和序列分析结果表明获得了枇杷LFY同源基因(ejLFY) 3′端的1个片段,该片段有1个911bp的内含子,编码区共编码130个氨基酸,其序列已经在GenBank中登记(登录号为AY5 5 1183) .在GenBank中进行同源性搜索,发现该基因片段与其他作物中已经报道的LFY同源基因的同源性大都在94 %以上,特别是与同属于蔷薇科的苹果的同源性最高,达到98%的同源性。; 刘月学胡桂兵林顺权刘宗莉陈厚彬; 关键词：枇杷 LEAFY基因同源性成花

早食李成熟胚离体培养研究: 2011年; 以早食李成熟胚为研究材料，对影响早食李成熟胚培养的基本培养基、外源生长调节剂6-BA的浓度进行了初步研究，结果表明，早食李最佳的基本培养基为F14培养基，最适的BA浓度为0．5mg／L。; 谢志亮何业华; 关键词：成熟胚培养

不同着色期荔枝果皮总RNA的提取及mRNA差显分析被引量：11: 2008年; 以妃子笑和糯米糍2个主栽荔枝品种不同着色期的果皮为试材,经过大量的对比和筛选,采用改良Bugos法提取果皮中的总RNA,经核酸蛋白测定仪测定和凝胶电泳显示提取的总RNA完整性强,质量好,产率高(最高可达318.7μg/g),可用于RT-PCR等分子生物学实验。进一步的DDRT-PCR分析表明:高分辨力的cDNA片段在500～2 000 bp之间,不同品种、不同着色期的荔枝果皮,基因表达有较大差异。; 杨转英胡桂兵王惠聪欧阳若陈厚彬; 关键词：荔枝果皮总RNA

黄皮胚培养研究被引量：2: 2006年; 对黄皮[Clausenalansium(Lour.)Skeels.]3个品种(郁南无核黄皮、鸡心黄皮和甜黄皮)开花后10～60d的幼胚进行了离体培养。结果表明,在WPM+CH0.50g/L+PVP1g/L(或AC0.3%)+AgNO310mg/L+GA30.25mg/L+BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L上,花后10～23d的幼胚只形成愈伤组织,但以花后20d的幼胚愈伤组织形成率最高、褐化率低、生长较旺盛;花后30d的幼胚有11%～26%已能发育成苗,此后幼胚的成苗率随胚龄增加而升高,花后60d幼胚的成苗率在50%～73%。鸡心黄皮的愈伤组织诱导率最高,其次是甜黄皮,无核黄皮最低;无核黄皮愈伤组织褐化率最高,其次是鸡心黄皮,而甜黄皮的最低。在适宜的培养基(WPM+CH0.50g/L+AC0.3%+AgNO310mg/L+GA30.25mg/L+BA1.5mg/L+NAA或IBA1mg/L)上,黄皮愈伤组织能正常继代和增殖,生长调节剂是促进增殖的主要因素,但褐化、生长缓慢、很难分化仍是黄皮组织培养的主要难题。; 王瑞霞何业华罗吉余小玲韩景忠高爱平; 关键词：黄皮胚培养愈伤组织胚龄

实时荧光定量PCR检测荔枝果皮中基因表达方法的建立被引量：3: 2010年; 以不同发育阶段的‘糯米糍’荔枝果皮和成熟时不同色泽表型的‘糯米糍’(红色)、‘乌皮荔’(紫色)和‘鸭姆笼’(绿色)荔枝果皮为试材,以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(gapdh)基因做内标、类黄酮-3-O-葡糖基转移酶(ufgt)基因为目的基因,建立了基于SYBR Green I染料技术的Real-Time PCR检测体系,并分析ufgt基因在上述材料中的表达差异。结果表明:以cDNA为模板建立的标准曲线循环阈值(Ct)与标准cDNA模板在一定浓度范围内呈良好的线性关系,gapdh基因和ufgt基因标准曲线的相关系数分别为0.998和0.999,扩增效率分别为96.2%和95.3%,达到定量PCR分析的标准。利用该方法的分析结果表明,不同发育阶段的‘糯米糍’荔枝果皮和3个成熟时不同色泽品种荔枝果皮的ufgt基因表达有显著差异。; 魏永赞胡福初秦永华王惠聪胡桂兵; 关键词：荔枝 REAL-TIME PCR

转抗菌肽D基因沙田柚对柑橘溃疡病抗性的评价: 对农杆菌介导法转化沙田柚(Citrus grandis Osbeck cv．Shatian pummelo)下胚轴得到的转抗菌肽D(AP—D)基因的单株(T0H7)进行了无性繁殖并对无性繁殖系进行了 AP-D基因的整合和...; 郑启发胡桂兵陈大成黄自然林顺权; 关键词：转基因沙田柚抗菌肽D基因柑橘溃疡病抗病性; 文献传递

普通枇杷和栎叶枇杷APETALA1同源基因的克隆和序列分析被引量：12: 2006年; 分析植物花分生组织特征基因APETALA1(AP1)同源基因的保守区序列,设计特异引物;用PCR方法从枇杷栽培品种香钟11号和野生种栎叶枇杷基因组DNA中各扩增出1个350 bp左右的片段;将该片段分别克隆到pUCm-T载体.测序和序列分析结果表明获得了枇杷AP1同源基因的片段.该基因片段的序列在2个不同种的枇杷间差异较小,均含有2个内含子,特别是外显子部分只有1个碱基的差别;编码区共编码36个氨基酸,氨基酸序列也只有1个氨基酸的差异.其序列已经在GenBank中登记(登录号分别为AY549306和AY571786).同源性比较发现该基因片段与其他作物中已经报道的AP1同源基因的同源性大都在80%以上,特别是与同属于蔷薇科的苹果的同源性最高,达到91%(栽培种)和94%(野生种),推测它们具有相似的功能.; 刘月学胡桂兵林顺权刘宗莉陈厚彬; 关键词：枇杷 PER 分子克隆

韧皮部特异性启动子的克隆及含绿色荧光蛋白报告基因新植物表达载体的构建被引量：6: 2005年; 用PCR方法扩增得到了长度为966 bp的笋瓜韧皮部蛋白2基因启动子片段,克隆入pUCm-T载体后,获得了新的重组质粒pUCm-PSP.分别用限制性内切酶酶切重组质粒和pCAMB IA1302植物表达载体,经回收、连接、转化和鉴定后,构建了由PSP驱动绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的新型植物表达载体pHZ03.利用细胞感受态法将新植物表达载体分别导入根癌农杆菌EHA105、GV3101、LBA4404和发根农杆菌R i15834中.; 胡桂兵张上隆徐昌杰林顺权; 关键词：笋瓜植物表达载体

华南农业大学园艺学院园艺生物技术研究所

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