贵州大学动物科学学院动物疫病研究所
- 作品数：178 被引量：488H指数：11
- 相关作者：徐春志安廷贵王伟更多>>
- 相关机构：上海交通大学农业与生物学院四川民族学院环境与生命科学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省科技支撑计划贵州省农业厅兽医科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 山羊痘病毒P32蛋白在毕赤酵母中的表达与鉴定
- 2011年
- 为了获得具有生物安全性高的体外表达蛋白,以含山羊痘病毒贵州LD株P32基因的质粒pMD18-T-P32/LD为模板,应用PCR方法扩增P32基因不同片段,将基因片段克隆至毕赤酵母菌表达载体pPICZαA中,构建了重组表达载体,转化感受态毕赤酵母菌X-33中并诱导表达。SDS-PAGE分析结果显示,有分子量约为64 ku的融合蛋白获得表达,与预期结果相符;Western-blot证实该表达蛋白具有免疫学活性。
- 程振涛岳筠周碧君许乐仁王开功文明李永明朱时杰
- 关键词：山羊痘病毒P32基因毕赤酵母
- 携带pVAX1-GPV-P32重组减毒沙门氏菌诱导山羊免疫应答研究
- (目的)为探讨携带pVAX1-GPV-P32重组减毒沙门氏菌诱导山羊免疫应答效果。(方法)本研究将60只黑山羊随机分为3组即重组细菌组、弱毒疫苗组和空白对照组,重组细菌组灌服重组减毒沙门氏菌,弱毒疫苗组股内侧皮内注射山羊...
- 熊朝丽张华程振涛周碧君王开功文明
- 关键词：免疫应答山羊
- 文献传递
- 某奶牛场高危人群及牛群布鲁杆菌病检测结果分析
- 2009年
- 目的了解某奶牛场高危人群和奶牛群中布鲁杆菌病的感染状况。方法采用琥红平板凝集试验和试管凝集试验检测有奶牛接触史人群和感染者密切接触人员以及奶牛的血清样本,以全乳环状试验检测新鲜乳样。结果该奶牛场高危人群布鲁杆菌抗体阳性的检出率为6.7%(3/45),抗体阳性者均为挤奶工人;奶牛群布鲁杆菌抗体阳性的检出率为2.2%(4/180);新鲜乳样中均未检出布鲁杆菌。结论该奶牛场中高危人群和奶牛群已存在布鲁杆菌感染,应采取有效措施,控制疫情蔓延。
- 毛家志文明周碧君
- 关键词：高危人群奶牛群布鲁菌病
- 鼠伤寒沙门氏菌LT2 Hfq与fadL、ompN、ybfM mRNA 5′UTR结合位点的预测与验证分析
- 2022年
- 通过5′RACE技术分析fadL、ompN、ybfM mRNA的5′UTR,并筛查fadL、ompN、ybfM mRNA 5′UTR中Hfq结合偏好型基序(ARN)n.利用λ-Red同源重组酶和FLP重组酶系统构建fadL、ompN、ybfM基因(ARN)n基序缺失基础上的lacZ基因融合菌株,运用P22噬菌体转导技术构建相应的hfq基因缺失菌株,通过β-半乳糖苷酶试验检测重组菌株的蛋白水平.结果显示,fadL中筛选出ARN-1(AAAAAA)、ARN-2(AAAAATAAT),其缺失降低了fadL的蛋白表达量,分别降低72%、56%;ompN中筛选出ARN-1(GTTTTT)、ARN-2(TCTTTT)、ARN-4(TTTGCT),其缺失提高了ompN的蛋白表达量,分别提高了1.29、1.30、1.07倍,ARN-3(ATTATT)缺失使ompN的蛋白表达量降低了10%;ybfM中筛选出ARN-1(AAGAGG)、ARN-2(AGCAAT)、ARN-3(AGTAAA)、ARN-4(AAAAATAGT)、ARN-5(AACAGAAAG),其缺失均增加了ybfM蛋白水平变化,分别为4.20、3.99、10.90、227.00、46.00倍.结果表明,ybfM、ompN、fadL中(ARN)n位点不同缺失能导致ybfM、ompN、fadL表达水平出现上调或下调,部分(ARN)n序列缺失可影响Hfq对相应靶基因蛋白水平调控作用.
- 令狐远凤杨阳潘永段世宇张家莉张宝太杨琦
- 关键词：沙门氏菌外膜蛋白
- 贵州省H9N2亚型禽流感病毒的分离与鉴定被引量：2
- 2009年
- 杨均汪德生肖康隆华王开功李永明周碧君
- 关键词：H9N2亚型禽流感病毒生物学特性病死鸡鸡场
- 禽流感-新城疫重组二联活疫苗(rL-H5株)诱导鸡的免疫应答分析
- 为监测分析禽流感-新城疫重组二联活疫苗(rL-H5株)诱导鸡的体液免疫、细胞免疫和粘膜免疫的免疫应答效果,为该疫苗的临床应用提供理论指导。将实验动物鸡1 50只分为4个组,即禽流感-新城疫重组二联活疫苗(rL-H5株)组...
- 王开功韩建保文明周碧君汪德生
- 关键词：体液免疫应答细胞免疫应答粘膜免疫应答
- 文献传递
- 贵州省种猪场5种传染病的血清学调查分析被引量：6
- 2009年
- 张双翔文明方英陈军义周碧君王开功程振涛岳筠
- 关键词：病毒性传染病种猪场血清学调查呼吸道症状母猪繁殖障碍猪细小病毒病
- oppCDF基因缺失对鼠伤寒沙门菌致病性的影响
- 2024年
- [目的]沙门菌是常见的人畜共患病原菌,可引发多种食源性疾病,鼠伤寒沙门菌是沙门菌的重要血清型之一,具有重要的公共卫生研究意义。本试验旨在研究转运蛋白相关基因oppCDF对鼠伤寒沙门菌生物特性的影响,为新型沙门菌减毒疫苗的制备提供理论基础。[方法]本试验通过比较鼠伤寒沙门菌野生株及已成功构建的oppCDF基因缺失株的生化特性、遗传稳定性、耐药性、黏附性、侵袭力、半数致死量(LD_(50))及小鼠肝脏、脾脏载菌量,分析oppCDF基因与鼠伤寒沙门菌生物特性之间的关系。[结果]oppC、oppD和oppF基因分别缺失后鼠伤寒沙门菌生化特性未发生明显改变且能稳定遗传,表明oppCDF基因表型未发生变化;与野生株STM LT2相比,基因缺失株STM LT2ΔoppC对红霉素变为敏感、氯霉素敏感性降低,STM LT2ΔoppD对头孢氨苄敏感性降低,STM LT2ΔoppF对复方新诺明敏感性增强,3株基因缺失株均对氨苄西林不敏感。3株基因缺失株LD_(50)检测结果显示,与野生株STM LT2相比,STM LT2ΔoppC毒力下降,但STM LT2ΔoppD、STM LT2ΔoppF毒力分别上升1.6和8.6倍;STM LT2ΔoppC的黏附性显著降低(P<0.05),侵袭力降低,定植力极显著下降(P<0.01);STM LT2ΔoppD的黏附性、侵袭力降低,但定植力极显著上升(P<0.01);STM LT2ΔoppF的黏附性显著降低(P<0.05),但侵袭力显著增强(P<0.05),定植力极显著上升(P<0.01)。[结论]oppC基因缺失可降低鼠伤寒沙门菌的致病性,但oppD、oppF基因缺失可增强鼠伤寒沙门菌的致病性,以上结果为沙门菌的致病机制研究提供了理论基础。
- 叶景芬张家莉陈世雄杨婉武绍碧杨琦
- 关键词：鼠伤寒沙门菌生物学特性
- PRRSV特种野猪分离株NSP2基因序列分析和疫苗免疫效果
- 为了解流行于猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)发病特种野猪群的PRRSV进化特征,对发病猪场现场PRRSV流行毒株的NSP2基因进行序列分析,结果表明该现场毒株NSP2基因缺失90个核苷酸,与国内近年广泛流行的高致病性PRR...
- 周碧君毛君婷史开志王开功文明
- 关键词：特种野猪疫苗免疫
- 文献传递
- 中蜂囊状幼虫病毒RT-PCR检测方法的建立与应用被引量：4
- 2021年
- 为建立中蜂囊状幼虫病毒(CSBV)核酸的特异性检测方法,以CSBV结构蛋白VP3基因为靶基因,根据GenBank中序列合成1对特异性引物,建立了CSBV RT-PCR检测方法。以CSBV克隆质粒作为模板和蜜蜂6种不同病毒,分别进行特异性、敏感性、重复性试验。结果显示:所建立的RT-PCR检测方法能扩增出CSBV特异性片段,且不能扩增出蜜蜂以色列急性麻痹病毒、蜜蜂畸翅病毒、蜜蜂急性麻痹病毒、蜜蜂慢性麻痹病毒、黑蜂王台病毒、蜜蜂克什米尔病毒;CSBV阳性质粒最低检测质量浓度为2.82 fg/m L;对CSBV阳性质粒和双蒸水空白对照组重复检测3次,均能扩增出与预期一致的特异性片段。利用该检测方法对从贵州省不同养蜂场采集的100份中华蜜蜂样本进行检测,71份样本为阳性,通过序列比对分析,同源性高达99.16%,进一步证实为CSBV。结果表明,所建立的CSBV检测方法特异性强、敏感性高、重复性好,具有良好的实用性。
- 张明华韦小平周碧君文明文明田琴王开功
- 关键词：RT-PCRVP3基因中华蜜蜂
