福建医科大学药学院蛇毒研究所 作品数:81 被引量:317 H指数:11 相关作者: 刘广芬 王晴川 薛玲 王秀敏 李克华 更多>> 相关机构: 福建中医学院药学系 莆田学院医学院药学系 莆田学院医学院 更多>> 发文基金: 福建省自然科学基金 福建省教育厅科技项目 福建省教育厅B类科技/社科项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 化学工程 天文地球 更多>>
圆斑蝰蛇泰国亚种(Vipera russe lli siamensis)蛇毒凝血因子激活剂的纯化及部分特性研究 被引量:11 2002年 目的 从圆斑蝰蛇泰国亚种蛇毒中分离纯化凝血 因子 (F )激活剂并研究其部分特性。 方法 采用离子交换柱层析和凝胶过滤等方法进行分离纯化 ,以血液凝固时间及发色底物 (S- 2 2 2 2 )进行活性鉴定和温度、p H值、蛋白酶抑制剂对活性的影响 ,SDS- PAGE进行分子量、等电点及纯度测定 ,苯酚 -硫酸法及间苯二酚 -盐酸法测定糖含量。 结果 所得促凝组分 1 能特异性地活化牛 F ,从而水解 S- 2 2 2 2酰胺键。SDS- PAGE呈现单一蛋白带 ,分子量为 6 1.1± 1.5 k D(还原 ) ,6 0 .4± 1.9k D(非还原 )。等电点为 p H=8.0 0± 0 .0 6。含中性己糖 12 .4 %±0 .5 % ,唾液酸 0 .12 %± 0 .0 2 %。在 5 0℃以下稳定 ,最适 p H为 7.0~ 8.2。可被金属蛋白酶抑制剂 EDTA- Na2 完全抑制 ,二硫苏糖醇 (DTT)及 L -半胱氨酸部分抑制 ,不受胰蛋白酶抑制剂抑肽酶抑制。 结论 从圆斑蝰蛇泰国亚种蛇毒分离纯化的 F 激活剂是一种碱性糖蛋白 ,属于 Ca2 + 依赖性的金属蛋白酶。 杨丽娟 刘广芬 王晴川关键词:钙调蛋白 凝胶过滤 金属蛋白酶 灵芝多糖(polysaccharide of Ganoderm a lucidum)的药效学研究Ⅱ.防辐射及升高白细胞的作用 被引量:26 2000年 小鼠接受 6 0 Co辐射 (7.5 Gray)或 ip环磷酰胺 (CPM) (10 0 mg· kg- 1 1次 )使骨髓造血功能受损后 ,给小鼠 ig GL Ps(30mg· kg- 1× 15 d)以观察其对小鼠外周白细胞数、骨髓 DNA系数及胸腺、脾系数的影响。结果 :1.小鼠接受 6 0 Co辐射后 ,GL Ps组小鼠白细胞数 (× 10 9/ L,2 .8± 1.7)、骨髓 DNA系数 (8.6± 2 .0 )、胸腺系数 (2 .5± 0 .6 )及脾系数 (1.6± 0 .5 )分别与水组相应指标 (1.3± 0 .4、4.0± 0 .8、2 .0± 0 .6、1.1± 0 .3)比较均明显增高 (P<0 .0 5~ 0 .0 1)。 2 .小鼠 ip CPM后 ,GL Ps组小鼠白细胞数 (2 .4± 0 .4)、骨髓 DNA系数 (2 5 .8± 3.5 )及胸腺系数 (2 .5± 0 .4)分别与水组相应指标 (1.9± 0 .4、10 .8± 2 .8、2 .0± 0 .3)比较均明显增高 (P<0 .0 5~ 0 .0 1)。表明 GL Ps具有对抗 6 0 Co辐射及 CPM引起的小鼠白细胞下降 ,和防止小鼠骨髓 DNA含量降低的作用 ,同时有保护小鼠因辐射或 CPM引起的胸腺缩小。 陈建济 张瑜 王秀敏 李克华 刘广芬 王睛川 吴晓平 林斌辉关键词:灵芝多糖 白细胞 骨髓 舟山眼镜蛇毒神经毒素的分离纯化及镇痛作用研究 被引量:4 2007年 目的从舟山眼镜蛇毒中分离纯化神经毒素,并测定其部分理化性质及镇痛活性。方法应用SP.SephadexC-50离子交换色谱法分离眼镜蛇毒粗毒,用SephadexG-50凝胶过滤色谱、CM—SephadexC-25离子交换色谱纯化神经毒素;SDS.PAGE(Tfis-Tfieine系统)鉴定纯度;用Meier方法测定毒性;用热板法观察神经毒素的镇痛作用。结果应用SP—SephadexC-50离子交换柱层析,从舟山眼镜蛇毒中分离得到14个蛋白峰,其中6个组分(NNAV-Ⅶ~Ⅻ)经鉴定为含有神经毒素组分,将神经毒活性最强的组分Ⅻ经SephadexG-50、CM.SephadexC-25纯化得神经毒素纯品NTⅪ。该纯品分子量12.3kD,小白鼠静脉注射和腹腔注射的LDso分别为1.9875、2.2217mg·kg^-1。NTXI能显著提高小鼠对热板刺激的痛阈。腹腔注射0.2mg·kg^-1NTXI可使小鼠的热板痛阈提高84.35%。NTXI的镇痛作用具有时效性,给药后2h起效,4h作用达峰值。结论舟山眼镜蛇毒中分离得到一个神经毒素纯品NTXI,具有镇痛作用。 陈燕 许云禄关键词:眼镜蛇 神经毒素 镇痛 福建产舟山眼镜蛇毒细胞毒素的快速分离纯化及鉴定 被引量:9 2004年 目的 从舟山眼镜蛇毒中分离纯化细胞毒素 (CTX) ,并鉴定其理化性质。 方法 采用 SP- SephadexC- 2 5阳离子交换色谱及 Sephasil Peptide C1 8反相高效液相色谱法从舟山眼镜蛇毒中分离纯化 CTX,SDS- PAGE(Tris- Tricine系统 )鉴定纯度 ,Edman降解法测定 N端氨基酸序列。 结果 粗毒经阳离子交换色谱 ,得到 1 4个蛋白峰 ,其中第 ~ 峰具 CTX活性 ;再分别经反相色谱纯化 ,得到 4个 CTX,总得率为 32 .4 8% ;SDS- PAGE显示为均一蛋白 ,分子量依次为 :7.2 8,7.33,7.2 4和 7.38k D;测定它们 N端 2 0个氨基酸序列。 结论 采用阳离子交换和反相高效液相色谱可快速、高效地从眼镜蛇毒中获得 4个 张明芳 许云禄 刘广芬关键词:眼镜蛇毒液类 细胞毒素类 色谱法 高压液相 色谱法 蕲蛇酶对大白鼠和家兔实验性脑血栓的溶栓作用 被引量:5 1997年 采用血小板聚集诱导剂二磷酸腺苷(ADP)加肾上腺素(Ad)从家兔颈内动脉或大白鼠颈总动脉注入,以形成脑血栓,2h后各组动物分别从静脉给予不同剂量蕲蛇酶(150、300和600mg/kg),阳性对照药潘生丁(10mg/kg)及空白对照生理盐水(1ml/kg)。以脑组织对伊文思蓝通透性改变及脑组织切片计算血栓数目为指标,判断蕲蛇酶对血栓的影响。结果不同剂量蕲蛇酶组对大鼠或家兔的实验性脑血栓均比生理盐水组血栓消褪加快,形成的血栓数目减少,脑组织伊文思蓝含量亦明显减少; 刘广芬 王晴川 王秀敏 汪效英关键词:溶栓 蕲蛇酶 凝血酶样酶 脑血栓形成 蕲蛇酶抗栓作用机理的初步分析 被引量:20 1997年 动物实验结果示,蕲蛇酶能裂解纤维蛋白原成为可溶性纤维蛋白,降低血中纤维蛋白原浓度,抑制血小板聚集,对抗由凝血酶诱导的血浆凝块聚集的血浆凝块回缩,因而发挥预防血栓形成作用。对纤维蛋白平板试验无直接溶纤作用,但能增加实验动物血中t-PA活性。 王晴川 刘广芬 许云禄关键词:蕲蛇酶 凝血酶样酶 血栓溶解 药理学 血栓形成 蕲蛇酶在实验性动物的尿、粪排泄率和血浆蛋白结合率研究 被引量:3 1997年 用131I标记方法研究蕲蛇酶在大鼠尿、粪中排泄情况和与家兔血浆蛋白结合率,结果表明,其自大鼠尿中排泄率为结合量的32.8±s0.48%,粪中排泄率为4.96±s0.99%,与家兔血清蛋白结合率为30.63%。 王晴川 刘广芬 卢玉秀 余缙荣关键词:蕲蛇酶 凝血酶样酶 血浆蛋白结合率 排泄 广西圆斑蝰蛇毒凝血因子X激活剂的分离纯化及其止血作用的研究 被引量:1 2010年 目的从广西圆斑蝰蛇毒中分离纯化凝血因子X激活剂(factor X activator of Russell’sviper venom,RVV-X)并研究其止血作用。方法应用阴离子交换色谱和凝胶过滤从广西圆斑蝰蛇毒中分离纯化RVV-X,以复钙化时间进行活性鉴定,以SDS-PAGE测定纯度和分子量。观察RVV-X对家兔肝脏创伤出血模型出血时间及出血量,家兔和肝素化小鼠凝血时间的影响。结果广西圆斑蝰粗毒经阴离子交换色谱获得六个蛋白峰,将RVV-X所在第V峰用凝胶过滤获得的组分A为RVV-X纯品,其凝血活性具有钙依赖性。SDS-PAGE非还原性条件下呈单一蛋白条带,分子量约为97.8kDa,还原性条件下呈二蛋白条带,为一条重链(约76.3kDa)和一条轻链(约21.5kDa)。RVV-X可显著减少家兔肝脏切口的失血量,缩短切口出血时间;能显著缩短家兔及肝素化小鼠凝血时间。结论用层析方法从广西圆斑蝰蛇毒中分离得到的凝血因子X激活剂具有较强的止血活性。 谢芸 许云禄关键词:离子交换 凝胶过滤 止血作用 蕲蛇酶在健康人的药物代谢动力学 被引量:4 1997年 健康自愿者14人,男9人,女5人,除研究者本身(女,64岁)外,平均年龄25.8±s6.5岁,分3组。分别一次iv蕲蛇酶注射液1U(150),2U(300)和3U(450μg)。用ELISA方法检测药后不同时间血药浓度以研究药代动力学。结果显示血药-时间曲线符合二室开放模型,其t1/2α分别为0.66±0.10,0.97±0.34和1.22±0.77h,t1/2β分别为15.95±2.4,18.80±4.94和19.73±4. 王晴川 刘广芬 王秀敏 汪效英关键词:蕲蛇酶 凝血酶样酶 药代动力学 舟山眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶的分离纯化、理化及酶学性质 被引量:3 2007年 目的从舟山眼镜蛇蛇毒中分离L-氨基酸氧化酶(LAO),测定其理化和酶学性质。方法应用Sephadex G-100凝胶色谱和POROS CM20离子交换色谱分离纯化LAO;Wellner和Lichtenberg法测定LAO活力;SDS-PAGE法测定相对分子质量。结果舟山眼镜蛇蛇毒经Sephadex G-100凝胶色谱和两次POROS 20离子交换色谱后,获得LAO纯品(暂定名NA-LAO)。NA-LAO在非还原和还原条件下相对分子质量均为58 kD左右;其反应最适pH为8.0,最适温度为60℃,对L-苯丙氨酸的米氏常数(Km)为3.08 mmoL/L。结论应用凝胶过滤色谱和离子交换色谱可从舟山眼镜蛇毒中分离纯化LAO。 林丽珊 张志强 陈洲 许云禄关键词:眼镜蛇毒液类 色谱法 色谱法 离子交换