复旦大学附属华山医院检验医学中心
- 作品数：59 被引量：344H指数：8
- 相关作者：倪赞明苏兵沈雪芳罗艺高云霞更多>>
- 相关机构：复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部重点实验室复旦大学上海医学院泌尿外科研究所青岛大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划上海市卫生局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学水利工程更多>>
- 肠球菌耐药及临床对策被引量：11
- 2004年
- 叶信予吕元
- 关键词：肠球菌耐药致病菌医院感染生物学特性抗生素
- 色素上皮细胞衍生因子对脑胶质瘤抑制作用的研究被引量：1
- 2006年
- 目的评价重组色素上皮细胞衍生因子(rPEDF)对与胶质瘤有关的血管活性因子、增殖和侵袭的影响。方法采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血管内皮细胞生长因子(VEGF)与血小板反应素-1(TSP-1)的变化;四甲基偶氮唑蓝[3-(4,5-dimthy-2-2thiazoly)2,5-dipheny-2H-tetrazoliunbromide,MTT]法检测胶质瘤细胞增殖率;细胞侵袭实验检测rPEDF抑制胶质瘤细胞侵袭性。结果实验数据显示:A172PEDF组(将rPEDF加入胶质瘤细胞A172中)中VEGF表达量为0·29±0·03,与未加PEDF蛋白的胶质瘤细胞作对照组(A172con组,1·31±0·02)相比,减少4·4倍,(P<0·05),同时TSP-1的表达量A172PEBF组为1585±105·67,与A172con组的,351±20·65相比,表达上调4·5倍(P<0·01);侵袭实验结果表明:胶质瘤细胞穿透数为88·67±3·32明显多于rPEDF处理过的细胞(44·41±13·81,2·0倍),加入促血管生成因子—VEGF后,细胞穿透数仍减少至69·4%(69·42±6·35,P<0·05),表明rPEDF能有效抑制胶质瘤细胞的体外侵袭性,至少部分是在血管生成因子调节的作用下。结论rPEDF是抑制胶质瘤增殖和侵袭的主要因素。
- 张弢关明吕元
- 关键词：色素上皮细胞衍生因子胶质瘤增殖
- 色素上皮细胞衍生因子对脑胶质瘤抑制作用的研究
- 色素上皮细胞衍生因子(Pigment Epithelial Derived Factor，PEDF)是一种具有多种生物学活性的蛋白质，由RPE细胞分泌至视网膜光感受器基质中，玻确体和房水中浓度也较高。多年的研究表明，PE...
- 张弢关明吕元
- 关键词：脑胶质瘤色素上皮细胞衍生因子胶质瘤细胞肿瘤侵袭血管活性因子
- 文献传递
- 应用SYBR GreenI荧光聚合酶链反应检测人类白细胞抗原-B27被引量：3
- 2005年
- 目的采用SYBRGreenI荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测人类白细胞抗原-B27(HLA-B27)。方法对56例风湿科门诊及住院怀疑为强直性脊柱炎(AS)的患者,以HLA-B27的特异引物和内对照β-Globin引物对标本DNA分别进行常规PCR和SYBRGreenI荧光PCR检测,并对HLA-B27阳性DNA进行不同倍数稀释后用两种方法进行检测比较。结果常规PCR检测HLA-B27阳性的样本上具有136bp的条带,所有的阴性和阳性样本都有268bp的β-Globin条带,共有30例患者HLA-B27阳性。SYBRGreenI荧光PCR检测结果显示,阴性标本的熔解曲线图上(86.3±0.5)℃处有β-Globin的Tm峰,HLA-B27阳性的样本在熔解曲线上有(90.2±0.6)℃HLA-B27的Tm峰。两种方法结果符合率达100%。即使1:100稀释的DNA也可用SYBRGreenI荧光PCR检测出结果,而常规PCR只有用原倍DNA才能检测出结果。结论SYBRGreenI荧光PCR法快速、准确、敏感、实时、简单和环保的特点是常规PCR法所没有的,完全能够替代常规PCR法,成为检测HLA-B27的新手段。
- 陈宇明邹和建张炯徐黎明关明
- 关键词：人类白细胞抗原-B27强直性脊柱炎荧光熔解曲线
- VEB-3型与VEB-1型超广谱β-内酰胺酶生化特性的比较被引量：1
- 2005年
- 目的研究VEB-3型超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的生化特性,并与VEB-1型ESBL进行比较。方法将blaVEB-3和blaVEB-1基因连接至pET28a载体上,并用重组质粒转化大肠埃希菌BL21进行克隆表达,分别挑选blaVEB-3或blaVEB-1阳性表达的菌落测定β-内酰胺类抗生素对其最低抑菌浓度(MIC),同时提取酶蛋白进行等电点和酶动力学分析。结果VEB-3和VEB-1型ESBL具有基本一致MIC和相同的等电点(pI=7.45),但两者的酶动力学性质存在一定的差异:对头孢他啶和头孢噻肟,VEB-3较VEB-1表现出更高的亲和力,两者Km相差一倍左右;对头孢噻吩,VEB-1比VEB-3更具亲和力;而对阿莫西林,VEB-1型ESBL表现出很高的亲和力,而VEB-3仅有低的亲和力,两者Km相差20多倍。结论VEB-3和VEB-1型ESBL具有相同的等电点,不同的动力学参数,blaVEB-1基因中Leu56→Phe突变可能导致了两者酶动力学性质的差异。
- 张哲蒋晓飞李敏吕元
- 关键词：Β-内酰胺酶酶动力学生化特性
- 定量检测系统的方法学性能验证实验结果的评价被引量：40
- 2007年
- 检验科对每一检测项目的临床允许误差与所进行的精密度和准确度验证实验观察的检测系统的总误差进行比较,运用 Westgard 方法决定图初步判定检测系统的方法学性能。此外,检验科需对精密度和准确度以外的分析性能验证实验的结果的可接受性进行判定,从而对检测系统的所有方法学性能验证实验结果进行综合评估,最终判断整个检测系统的可接受性。
- 毕波吕元
- 关键词：方法论
- SHV-12型超广谱β-内酰胺酶特性的研究被引量：11
- 2006年
- 目的研究SHV-12型超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的特性。方法将b laSHV-12基因连接至pET28 a载体上,并用重组质粒转化大肠埃希菌BL21进行克隆表达,挑选b laSHV-12阳性表达的菌落,提取其酶蛋白进行等电点测定和酶动力学分析。结果SHV-12型ESBL等电点为8.2。同时,在所测的几种抗生素中,该酶对头孢他啶和头孢噻肟的Km相同且最小;对头孢噻吩,有着最大的Vm ax/Km;而对阿莫西林,表现出最大的Km和最低的Vm ax。结论SHV-12型ESBL对头孢他啶和头孢噻肟具有高的亲和力,而对头孢噻吩有最大的催化效能。
- 张哲蒋晓飞李敏吕元
- 关键词：Β-内酰胺酶酶动力学
- PI3K的致癌作用
- 本文分析了磷酯酰肌醇激酶(PIKs)通路和癌症之间的主要联系，研究了PI3K通路中其他类型的基因改变，论述了PI3K通路的功能异常在肿瘤形成中的作用的证据。
- 林勇吕元
- 关键词：致癌作用癌症肿瘤形成PI3K通路
- 文献传递
- 蛋白芯片筛选胶质瘤蛋白标志物的初步应用被引量：3
- 2005年
- 目的探索表面加强激光解吸电离飞行时间质谱(surfaceenhancedlaserdesorption/ionizationtimeofflightmassspectrometry,SELDITOFMS)蛋白芯片技术在星形细胞瘤早期诊断和预后判断中的应用。方法应用蛋白芯片生物系统(proteinchipbiosystems,PBSⅡ)以及强阴离子交换芯片(stronganionexchange,SAX2),对26例星形细胞瘤患者和22例正常人血清进行蛋白芯片检测,并用蛋白芯片软件包3.0进行数据处理和质谱分析。结果肿瘤组与对照组在质荷比(mass/charge,M/Z)为5911Da、4948Da、16494Da、4521Da和8593Da处蛋白含量有显著差异,并且构建成的蛋白树状分析模式可以有效区分肿瘤患者,其灵敏度为88.46%(23/26),特异度达100%(22/22)。此外,在不同级别的星形细胞瘤之间也存在差异表达的蛋白峰。结论应用蛋白芯片质谱技术可以得到星形细胞瘤患者血清中特异性的蛋白质谱图,在早期诊断及预后判断中具有重要意义。
- 张海石刘维薇屠红关明黄峰平
- 关键词：星形细胞瘤蛋白质芯片生物学标志物质谱分析
- 应用荧光定量PCR检测异基因骨髓移植后嵌合体比例
- 2004年
- 陈字苏兵丁天凌叶静谢弘谢毅
- 关键词：荧光定量PCR异基因骨髓移植嵌合体
