遵义医科大学基础医学院免疫学教研室
- 作品数：18 被引量：21H指数：3
- 相关机构：中南大学湘雅医学院基础医学院中南大学湘雅医学院温州医科大学附属第六医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省科学技术基金湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- DOCK8的分子结构及生物学功能被引量：1
- 2020年
- DOCK8(dedicator of cytokinesis 8)是一种非典型鸟嘌呤核苷酸交换因子(guanine nucleotide exchange factors,GEF),参与细胞内信号网络的调节和小分子G蛋白的激活。DOCK8在免疫应答的信号传导、肌动蛋白骨架的重建、免疫突触形成、免疫细胞的功能调节等方面有着重要的作用,成为了科研人员探究的热点。现对DOCK8的分子结构和生物学特性研究进展进行综述,进一步阐明DOCK8在免疫系统中的生物学功能以及相关疾病的发病机制。
- 黄景雄管晓燕于红松胡欢刘建国
- 关键词：GEF结构特征生物学功能
- MTB Hsp16.3重组蛋白通过Fractalkine/CX3CR1信号轴调控小鼠肺泡巨噬细胞M2型极化
- 2023年
- 目的初步探讨Fractalkine/CX3CR1信号轴在MTB Hsp16.3重组蛋白诱导小鼠肺泡巨噬细胞向M2型极化中的作用及机制。方法提取小鼠肺泡巨噬细胞,观察细胞形态后用其特异性标志CD68鉴定;MTB Hsp16.3(100 ng/mL)刺激肺泡巨噬细胞后,采用Real-time qPCR检测TNF-α、Arg-1等极化相关分子mRNA表达水平,Western blot检测Fractalkine、CX3CR1的表达情况。用慢病毒干扰肺泡巨噬细胞CX3CR1的表达后,荧光显微镜观察病毒感染情况;流式细胞术检测感染效率;Real-time qPCR和Western blot检测感染前后肺泡巨噬细胞CX3CR1的表达情况。采用MTB Hsp16.3刺激慢病毒感染过的肺泡巨噬细胞,Real-time qPCR检测各组极化相关分子mRNA表达水平;Western blot检测CD206、Arg-1的蛋白表达情况。利用Western blot检测各组中JNK、p38、ERK的磷酸化水平。结果显微镜下观察发现新分离的肺泡巨噬细胞为圆形,大小不等,约2 h后贴壁较牢,24 h后,肺泡巨噬细胞呈圆形、梭形等多种形态,且胞体更大,通过CD68鉴定为肺泡巨噬细胞;经MTB Hsp16.3处理后巨噬细胞TGF-β、IL-10、Arg-1、Fizz1的mRNA水平明显增高(P<0.05),巨噬细胞表面Fractalkine、CX3CR1的表达增高(P<0.05),与JNK、p38的磷酸化水平升高(P<0.05)相关。干扰肺泡巨噬细胞CX3CR1的表达后,慢病毒感染效率在72 h达到最高峰,并且可降低巨噬细胞表面CX3CR1的表达。经MTB Hsp16.3刺激慢病毒感染过的肺泡巨噬细胞发现,TGF-β、IL-10、Arg-1、Fizz1 mRNA水平降低(P<0.05),CD206、Arg-1的表达水平降低(P<0.05),与JNK、p38磷酸化水平被抑制(P<0.05)相关。结论Fractalkine/CX3CR1信号轴可能参与调控MTB Hsp16.3重组蛋白诱导的肺泡巨噬细胞M2型极化,并且可能通过激活JNK、p38的磷酸化水平发挥作用。
- 卫麟娜李茂刘利萍冯继红覃明高雪涵董品志张浪浪罗军敏
- 经口摄入微塑料致小鼠肺部炎性损害及其机制初探
- 2024年
- 目的 研究微塑料(MPs)经口摄入途径对小鼠肺组织的影响,并初步探索其影响机制。方法 采用聚苯乙烯微塑料(PS-MPs)模拟环境中MPs。将Balb/c雄性小鼠随机分为3组:对照组(Control)、0.05μm和0.5μm的MPs实验组,设计小鼠发育期和成熟期两个阶段暴露剂量。在发育期分别灌胃0.05μm、0.5μm MPs(0.3 mg/d),连续4周,进入成熟期,将剂量改为0.6 mg/d,再持续8周。对照组灌胃同体积蒸馏水,所有小鼠在16周时被处死。HE染色观察肺组织形态;分析PanglaoDB数据库中小鼠肺组织中表达NLRP3的细胞簇;免疫印迹法测定肺组织中NLRP3炎症小体相关蛋白的表达。结果 HE染色肺组织结果显示,0.05μm和0.5μm MPs组均能诱导小鼠肺组织炎性损害;PanglaoDB数据库中肺组织表达NLRP3的细胞簇为巨噬细胞;免疫印迹法检测肺组织样本结果显示,相比Control组,微塑料组小鼠肺组织蛋白表达均有增加趋势,但仅有0.05μm MPs实验组中蛋白表达有统计学意义(P<0.05)。此外,与0.5μm MPs组相比,0.05μm MPs实验组小鼠肺组织中的蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论 经口摄入微塑料可能过度激活NLRP3炎症小体引发肺脏炎性损害。同时,针对0.05μm和0.5μm的微塑料,粒径越小对肺的炎性损害越严重。
- 张浪浪董品志吴荧浓田坤明覃明王海燕
- 关键词：炎性损害
- 寻常性银屑病患者皮肤菌群差异研究
- 2024年
- 目的:阐明贵州地区银屑病患者皮损样本、正常皮肤样本及健康人群皮肤样本之间皮肤定植微生物的差异。方法:纳入15例寻常性银屑病患者及6例健康志愿者,采集患者皮损样本、正常皮肤样本及志愿者健康皮肤样本微生物,提取DNA并扩增细菌、真核微生物、真菌、古细菌扩增子,采用16S rDNA基因测序,分析微生物组成及丰度。结果:银屑病患者皮损部位微生物多样性较银屑病患者正常皮肤微生物高;组成成分分析发现其组成与正常皮肤表面微生物分离,呈现明显的聚类趋势。与银屑病患者正常皮肤微生物组成比较,银屑病患者皮损部位特异性高分布的菌群包括梭状芽胞杆菌纲-梭菌目-瘤胃菌科、梭状芽胞杆菌纲-梭菌目-毛螺旋菌科以及拟杆菌纲-拟杆菌目-拟杆菌科;而微生物低丰度菌群为乳杆菌目-乳酸细菌科以及假单胞菌目-莫拉菌科。结论:相比于银屑病患者正常皮肤定植的微生物,皮损部位微生物呈现特征性改变,提示差异性分布菌群可能是银屑病潜在的生物标志物。
- 秦欢熊琦马龙徐运娥黄洋晏文王玉
- 关键词：银屑病生物标志物
- DNA甲基化与系统性红斑狼疮的相关性研究进展被引量：3
- 2019年
- 系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种严重的全身性自身免疫性疾病,其发病机制及病因尚不十分明确,目前普遍认为的病因包括遗传学、表观遗传学、免疫学及环境因素等。DNA甲基化是重要的表观遗传学修饰,目前已经证明DNA甲基化异常在SLE发病机理中发挥重要作用。本文从DNA甲基转移酶诱发的DNA甲基化异常、T/B细胞DNA甲基化异常、X染色体异常DNA甲基化以及紫外线导致的异常DNA甲基化几个方面,综述DNA甲基化与SLE的相关性研究进展。
- 谭贵琴王欣杜娟于红松
- 关键词：SLE自身免疫DNA甲基化
- Ⅰ型辅酶脱氢酶1α亚复合物4过表达对人结直肠癌细胞上皮-间质转化的作用被引量：1
- 2019年
- 目的Ⅰ型辅酶脱氢酶1α亚复合物4(NDUFA4)在人结直肠癌发生中的作用和机制尚未阐明。文中旨在探讨NDUFA4过表达对人结直肠癌细胞上皮-间质转化(EMT)的作用。方法将p-NDUFA4重组质粒(p-NDUFA4组)和空载对照质粒(对照组)体外分别瞬时转入人结直肠癌HCT116细胞;利用Real-timePCR和Western blot 检测各组细胞中 NDUFA4 的表达;划痕实验、Transwell 小室迁移实验检测细胞的迁移能力变化;实时荧光定量 PCR 法检测 MMP2、MMP9、CXCR4 等表达;Western blot 检测 Twist、Snail、E-cadherin 等表达;免疫荧光法检测细胞中 E-cadherin 和 Vimentin 蛋白的表达。结果p-NDUFA4组 NDUFA4-mRNA、NDUFA4蛋白相对表达量[(1.94±0.08)%、(1.07±0.12)%]较对照组([ 0.96±0.15)%、(0.6±0.05)%]明显上调(P<0.05)。p-NDUFA4 组细胞的体外迁移能力、细胞迁移率([ 54.36±4.08)%、(1.85±0.10)%]较对照组([ 29.51± 3.17)%、(0.99±0.12)%]明显升高( P<0.01)。p-NDUFA4 组肿瘤细胞转移相关因子 MMP2、MMP9、CXCR4、间质标志物 N-cadherin、Vimentin,及转录相关因子 Snail、Twist 的 mRNA 表达较对照组显著上调,上皮标记分子 E-cadherin mRNA 明显下调(P<0.01)。结论过表达NDUFA4能明显促进人结直肠癌细胞EMT的发生。
- 刘士明丁涛雷良玉胡琳冒灵陈超郭萌萌徐林
- 关键词：上皮-间质转化
- 新形势下医学免疫学实验课新型混合式教学初探被引量：4
- 2023年
- 随着千万兆级的互联网和移动通信“5G”技术的迅猛发展,给高等教育的医学教育模式带来了机遇和挑战,打造新形势下符合时代需求的医学教育模式已成为教学改革的新热点。基于新形势下对医学教育的新需求,遵义医科大学医学免疫学教研室针对传统线下实验教学模式的弊端,尝试了线上有机结合线下的混合式教学的创新型模式,即线下传统教学模式、线上线下混合式教学模式、线上平台自主教学模式3种模式,其中包括搭建线上互联网和移动共享资源学习平台、线下分小组讨论教学、翻转课堂互动教学、综合实验设计等多样化教学手段,并有机融入课程思政的教学内容,不断优化不同模式课程考核的评估体系,对医学免疫学传统的线下实验教学进行了初步探索和尝试,为线上线下混合式新模式教学实践提供了丰富的经验。
- 宋涛郭站稳秦娜琳张继东覃明
- 关键词：医学免疫学实验教学混合式教学
- 结核分枝杆菌抗原Rv2654重组蛋白的表达和纯化及其诱导的免疫应答特征被引量：3
- 2021年
- 目的:随着卡介苗的保护效应日趋减弱,以及结核分枝杆菌耐药株的广泛存在,全球尚缺乏控制结核病的有效疫苗,全球结核病发病率和病死率仍然较高。本研究旨在分析结核分枝杆菌抗原Rv2654重组蛋白在诱导小鼠细胞免疫和体液免疫应答中的作用,评价其作为抗结核病候选疫苗的潜力。方法:在细菌的对数生长期加入诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-beta-D-thiogalactoside,IPTG)诱导细菌表达Rv2654重组蛋白,用亲和层析纯化,蛋白质印迹法鉴定Rv2654重组蛋白。采用ELISA方法检测不同人群血清与Rv2654重组蛋白的免疫反应性。以Rv2654重组蛋白免疫昆明小鼠,采用细胞因子磁珠阵列法检测小鼠外周血Th1/Th2类细胞因子水平,并以流式细胞术分析小鼠脾T、B淋巴细胞亚群分布。结果:成功表达Rv2654重组蛋白,以Rv2654重组蛋白作为抗原的ELISA结果显示其与卡介苗接种者或活动期结核患者血清均有反应性。Rv2654重组蛋白免疫小鼠可促进小鼠外周血IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-6和IL-10等多种细胞因子表达(均P<0.05),流式细胞术结果显示Rv2654重组蛋白可显著刺激CD4+T细胞和CD8+T细胞分化为效应T细胞,这种作用在联合卡介苗应用时更为明显,Rv2654重组蛋白也能刺激小鼠B细胞活化增殖并向记忆细胞分化。结论:Rv2654重组蛋白可诱导小鼠的细胞免疫应答,而且与卡介苗接种者和活动性肺结核患者血清有较好的结合能力,有望作为结核病免疫学预防和诊断类疫苗的候选抗原。
- 陈富超朱权朱权万康林万康林罗奇志
- 关键词：结核分枝杆菌细胞免疫体液免疫结核疫苗
- 长链非编码RNA LINC00943对结核分枝杆菌感染小鼠肺泡巨噬细胞迁移能力的影响及机制被引量：1
- 2021年
- 目的探究长链非编码RNA LINC00943对结核分枝杆菌感染小鼠肺泡巨噬细胞迁移能力的影响及机制。方法取小鼠巨噬细胞MH-S随机分为对照组和模型组,对照组常规培养,模型组细胞使用感染复数为10的结核分枝杆菌H37Ra感染,随后将LINC00943小干扰RNA设为si-LINC00943组,阴性对照小干扰RNA设为si-NC组,miR-125b-5p模拟物设为miR-125b-5p mi组,阴性对照寡核苷酸设为miR-NC组转染至模型组细胞中。采用激光共聚焦显微镜观察细胞内细菌荧光强度及细胞感染比例;划痕愈合实验检测细胞迁移能力;双荧光素酶实验验证LINC00943与miR-125b-5p的结合关系;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-125b-5p的表达水平。结果与对照组相比,模型组细胞内的细菌荧光强度及细胞感染比例显著增加(P<0.05),说明MH-S细胞感染H37Ra菌株的模型建立成功;敲低LINC00943可降低细胞内的细菌荧光强度、细胞感染比例及细胞迁移率;双荧光素酶实验证实LINC00943可与miR-125b-5p靶向结合;敲低LINC00943可促进miR-125b-5p的表达。结论敲低LINC00943可抑制结核分枝杆菌感染小鼠肺泡巨噬细胞的迁移,其作用机制可能与上调miR-125b-5p的表达有关。
- 朱杰华杜文胜陈莉陈光红罗军敏
- 关键词：结核分枝杆菌迁移
- hsa-miR-181a-5p靶基因预测及生物信息学分析
- 2024年
- 目的对hsa-miR-181a-5p进行系统的生物信息学分析,预测hsa-miR-181a-5p的靶基因、基因功能及信号通路,并对其进行生物学功能注释。方法利用数据库对hsa-miR-181a-5p基因定位,分析其序列保守性和在人类组织器官中的表达情况;利用数据库进行靶基因预测分析;并将预测交集靶基因进行GO功能分析及KEGG通路富集分析和蛋白间相互作用(PPI)网络分析;最后利用A549细胞进行hsa-miR-181a-5p转染实验,进行转录组测序同步验证生物信息学预测结果。结果发现基因定位于人类基因组chr1、chr9染色体,成熟序列在物种间具有高度保守性。3个数据库交集靶基因有483个,包含PTEN、MAPK8、AKT3等基因,其分布在胞浆等细胞组分,执行蛋白质结合等生物功能,并参与信号转导等生物学过程。靶基因富集于MAPK、PI3K-Akt、胰岛素抵抗、癌症中的miRNA等信号通路,其编码的蛋白间形成复杂网络图。实验后转录组测序结果验证了生信分析的准确性,对预测及富集结果提供了有力支撑。结论hsa-miR-181a-5p在多种生物学过程发挥重要作用,尤其是在神经系统疾病、血液免疫系统疾病以及癌症的发生发展中其将成为相关疾病发生机制和防治研究的新靶点。
- 王艳阳刘婵周雪张隆泽余丽梅何志旭
- 关键词：生物信息学分析信号通路蛋白质相互作用
