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南方医科大学检验与生物技术学院抗体工程研究所: 作品数：30 被引量：83H指数：5; 相关作者：王小平李纪良陈慧芹彭迎霞郭欣欣更多>>; 相关机构：浙江大学附属第一医院中山大学中山医学院干细胞与组织工程研究中心中山大学中山医学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学理学更多>>

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玉溪地区高敏肌钙蛋白T在人群中的分布特点分析: 2019年; 目的了解玉溪地区高敏肌钙蛋白T(high sensitive cardiac troponin-T,hs-cTnT)在普通人群中的分布特点。方法以玉溪市人民医院2017年7月至10月的1 594例18～89岁健康体检者为研究样本,对hs-cTnT在普通健康人群检出率、分布特点及与常规生化指标的相关性进行统计分析。结果 (1)hs-cTnT在普通健康人群检出率为57.31%,其中男性的检出率是74.52%,女性的检出率是23.75%;(2)普通健康人群中男性的hs-cTnT平均水平为(5.59±5.08)ng/L,女性为(3.46±1.45)ng/L,男性与女性hs-cTnT水平有统计学差异(P<0.05),各年龄段hs-cTnT水平比较男性均高于女性;(3)hs-cTnT水平随年龄增长而增大,男性和女性66岁以上人群与其它各年龄组人群的hs-cTnT水平比较均有统计学差异(P<0.05);(4)hs-cTnT与年龄和肾功能指标尿素(urea nitrogen,Urea)、肌酐(creatinine,Crea)尿酸(uric acid,UA)呈明显正相关。结论 hs-cTnT存在性别和年龄的分布差异,应建立不同性别、不同年龄的参考区间;56岁以下女性hs-cTnT检出率较低,将其作为心脑血管疾病早期筛查和监测的指标意义有限。; 叶丹冯磊吴英松; 关键词：高敏肌钙蛋白T 早期筛查

可诱导表达RN181逆转录病毒载体的构建及其在肝癌细胞中的表达被引量：1: 2017年; 目的构建可诱导表达RNl81的逆转录病毒载体，探讨其在肝癌细胞中的表达，为进一步研究RNl81基因的生物学功能奠定基础。方法基于基因克隆技术，构建pRetrox—TRE3G／RNl81重组载体。常规鉴定后，反应质粒pRetroX—TRE3G／RNl81和调控质粒pRetroX．Tet3G分别与EnvelopeVector共转染GP2-293细胞包装逆转录病毒。两种病毒共同感染目的细胞SMCC7721，经G418筛选得到稳定细胞株。加强力霉素（Dox）诱导表达RNl81，经实时荧光PCR（RT．PCR）、蛋白印迹检测（Westernblotting）鉴定后，CCK-8实验和Transwell检测细胞增殖和侵袭情况。结果重组载体经测序证实构建成功。筛选出的阳性克隆在Dox诱导下，经RT．PCR、Westernblotting鉴定证实重组细胞中RNl81的mRNA及其蛋白表达水平在诱导与未诱导的细胞系问的差异具有统计学意义（P〈0．05）。增殖实验显示Dox诱导后的7721RNl81细胞生长减慢。细胞侵袭实验显示RNl81上调后细胞侵袭力减弱。结论我们成功构建的可诱导表达RNl81的SMCC7721-RNl81重组细胞系为研究RNl81的生物学功能提供了有效的细胞模型。研究初步证实了RNl81在体外对SMCC7721细胞增殖和侵袭的抑制作用。; 李坤平王穗海罗小仔梁志坚陈武业方永平; 关键词：肝癌锌指蛋白蛋白表达

伤寒沙门氏菌质粒DNA参考物质的研制被引量：3: 2020年; 目的制备包含伤寒沙门氏菌的三种检测靶标序列se、st、aceA的质粒DNA参考品。方法设计一种质粒DNA包含目前用于沙门氏菌检测和分型常用的se、st、aceA的质粒(pDNA Salmonella),对其序列的稳定性,均一性和量值可追溯性进行评价,并验证其与沙门氏菌基因组DNA参考品在实时定量PCR应用中的可比性。结果经多个实验室定值后,pDNA Salmonella最终定值结果为30.08μg/mL pDNA。Salmonella均一性,稳定性良好,可在-20℃长期保存,并且在实时定量PCR应用中与基因组参考品具有可比性。结论 pDNA Salmonella具有良好的序列准确性和可追溯性,这项研究重点是证明了快速合成的质粒作为鉴定伤寒沙门氏菌qPCR参考品的可行性。; 努色热提·阿布都沙拉木袁慕云林晓峰许龙岩陈瑶; 关键词：实时荧光PCR 伤寒沙门氏菌

溴结构域蛋白4的结构和功能及其抑制剂在肿瘤研究中的应用被引量：3: 2023年; 溴结构域和超末端结构域(bromodomain and extraterminal domain,Bet)家族是表观基因组的调节因子,也是肿瘤细胞生存所依赖的肿瘤相关基因表达的关键驱动因子。溴结构域蛋白4(bromodomain-containing protein 4,Brd4)是溴域和端外蛋白家族中的一员,通常识别乙酰化组蛋白,并定位于目的基因的启动子或增强子区域,启动并维持肿瘤相关基因的表达。Brd4与多种转录因子调控和染色质修饰密切相关,并参与DNA损伤修复、维持端粒功能,从而维持肿瘤细胞的存活。本文围绕Brd4蛋白的结构、功能及其抑制剂在肿瘤研究中的应用进行综述。; 黄千慧丁一祎谭钰雯莫雯欣李彤昕黄颖而郝文波; 关键词：转录因子

肺癌患者EGFR及KRAS基因突变检测方法的建立和临床应用被引量：5: 2017年; 目的本研究拟在评估二代测序(next generation sequencing,NGS)技术在肺癌临床分子诊断中应用的可行性。方法本研究选取108例肺癌石蜡包埋样本(formalin fixed paraffin embedded,FFPE),同时进行一代测序(sanger sequencing)和NGS检测样本中EGFR和KRAS基因的突变情况。结果在108例肺癌样本中,一代测序检出突变在二代测序中均检出,另外NGS还检测出目标区域外其他突变。结论 NGS的检测准确性可达到100%。NGS可以应用于肺癌临床分子诊断,同时NGS能给临床提供更详细的基因突变信息,为分子靶向治疗提供依据,更具有市场潜力及应用前景。; 张洁明杨学习; 关键词：肺癌 EGFR KRAS

NGS检测乙型肝炎病毒耐药基因突变情况及其临床意义被引量：2: 2017年; 目的检测乙型肝炎患者的HBV YMDD突变情况,探究下一代测序技术(next generation sequencing,NGS)检测HBV耐药基因突变的可行性及患者性别与其YMDD突变的相关性,并为临床用药提供参考。方法运用NGS测序技术对收集的100例临床样本进行HBV YMDD突变的检测,并与临床检测金标准Sanger测序法的测序结果进行比对。结果运用NGS检测100例HBV样本,其中YMDD野生型88例,HBV YMDD耐药基因突变12例,与Sanger测序法的测序结果完全相符。结论本研究结果显示,NGS技术可用于HBV耐药基因突变检测,患者性别与HBV耐药突变无明显相关性。; 王创俊王庆曹治家杨学习; 关键词：NGS HBV 耐药基因突变

可溶性fms样酪氨酸激酶1时间分辨荧光免疫分析法的建立被引量：1: 2022年; 为建立基于磁性微球可溶性fms样酪氨酸激酶1(soluble fms-like tyrosine kinase 1,sFlt-1)的时间分辨荧光免疫分析法(sFlt-1 time-resolved fluoroimmunoassay, sFlt-1-TRFIA),用磁珠偶联抗sFlt-1单克隆抗体,Eu^(3+)(铕)标记抗sFlt-1单克隆抗体,采用双抗体夹心法建立基于磁珠的sFlt-1-TRFIA。结果显示,自制试剂的检测灵敏度为10.78 pg/mL,线性范围10.78~25 000 pg/mL;样品的回收率为98.23%~107.71%,分析内变异系数(intraassay coefficient of variation, CV)为5.29%~6.50%,分析间变异系数(intreassay coefficient of variation, CV)为6.55%~8.23%;与电化学发光法的检测结果比较,相关系数r^(2)值为0.971 9。由此,基于磁性微球建立的sFlt-1-TRFIA灵敏度、特异度以及准确度等均符合临床应用要求,有望用于临床血清样本中sFlt-1浓度的检测。; 吴鸿峰邓昊翁孔燕黄颖而陈佳灵李志雄吴英松郝文波; 关键词：磁性微球时间分辨荧光免疫分析法先兆子痫

凝血及炎性因子检测在类风湿关节炎并发冠心病患者中的临床意义被引量：18: 2018年; 目的探讨实验室凝血指标及相关炎性指标检测在类风湿关节炎(RA)并发冠心病(CHD)患者中的临床意义。方法选择2015年1月至2016年12月昆明医科大学第六附属医院住院患者为研究对象,按照疾病种类将研究对象分为RA并发CHD组、单纯RA组,单纯CHD组,同时选取健康体检者作为对照组,每组研究对象120例。分析各组抗环瓜氨酸抗体(ACCP)、类风湿因子(RF)、白细胞介素-6(IL-6)及凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、血浆纤维蛋白原(FIB)水平和凝血酶时间(TT)、D-二聚体(D-D)和纤维蛋白(原)降解产物(FDP)的水平。结果 RA并发CHD组中,RF、ACCP、IL-6水平均明显高于其他3组(P<0.012 5);单纯RA组的RF、ACCP和IL-6水平与其他3组比较,差异均有统计学意义(P<0.012 5);单纯CHD组RF、ACCP水平与单纯RA组和RA并发CHD组比较,差异有统计学意义(P<0.012 5)。单纯RA组和RA并发CHD组的D-D、FIB、FDP水平与其他3组比较差异均有统计学意义(P<0.012 5);单纯CHD组的D-D、FDP水平与单纯RA组和RA并发CHD组比较,差异有统计学意义(P<0.012 5)。结论 ACCP、IL-6及凝血指标D-D、FIB、FDP的检测能及时反映RA并发CHD患者的病情发展及体内凝血和纤溶系统失衡情况,可在临床推广使用。; 杨宇溪潘宝龙冯磊潘丽吴英松; 关键词：类风湿关节炎 D-二聚体炎性指标凝血功能

人白细胞介素10受体α基因真核表达及与JAK1蛋白的相互作用的检测: 2017年; 构建含人白介素10受体α(IL-10RA)基因的真核表达质粒p ENTER-IL-10RA-His,并在HEK293中进行真核表达,并用免疫共沉淀检测JAK1与IL10RA在细胞内的相互作用。在He La细胞中提取人总RNA,通过RT-PCR获得人IL10RA的基因全长,并将其克隆至真核表达载体p ENTER-His中。经PCR扩增、双酶切、测序鉴定后,将重组质粒p ENTER-IL-10RA-His转染至HEK293细胞中。免疫印迹法检测IL-10RA蛋白在HEK293细胞中的表达。结果显示,经PCR扩增和双酶切,测序鉴定质粒克隆正确。免疫印迹可见63 k D的目的蛋白。共同转染JAK1和IL-10RA的质粒,免疫印迹可见分别为133 k D和63 k D的目的条带,免疫共沉淀鉴定了JAK1和IL-10RA的相互作用。IL-10RA基因成功构建在p ENTER-His中,并在HEK293细胞中成功表达,并成功共转染JAK1和IL-10RA质粒,免疫共沉淀检测两者的相互作用。这为JAK1和IL-10RA相互作用的机制研究奠定基础。; 郭欣欣王刚邓巧亭吴涵韬李坤吴英松刘天才; 关键词：真核表达免疫共沉淀蛋白相互作用

携带荧光素酶基因肝癌细胞株的构建及在肝癌原位移植瘤模型中应用: 2018年; [目的]构建稳定表达荧光素酶基因的人肝癌细胞株,建立可实时观察的肝癌原位移植瘤模型。[方法]构建含有萤光素酶基因的慢病毒载体,利用慢病毒三质粒系统磷酸钙共转染HEK 293T细胞,收集纯化病毒感染肝癌细胞SMMC7721,嘌呤霉素(puromycin)结合有限稀释法筛选稳定转导细胞株,将细胞原位注射裸鼠肝组织,建立原位肝癌动物模型。[结果]包装纯化的慢病毒悬液的滴度为8.4×106TU/m L,感染肝癌细胞后成功筛选到稳定表达的肝癌细胞株。利用该细胞株成功建立原位注射肝癌裸鼠模型,经活体荧光成像系统观察到肝癌细胞在活体动物体内的分布情况。[结论]荧光素酶肝癌细胞株的成功构建及利用该细胞株建立的原位移植瘤肝癌动物模型为肝癌的治疗研究奠定了基础。; 翟向明雷川梁芷冰李红卫杜红延; 关键词：荧光素酶肝癌细胞原位移植瘤

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