中国医科大学基础医学院医学遗传学教研室
- 作品数：133 被引量：300H指数：8
- 相关作者：林长坤李春义孙桂凤李晓明张炫更多>>
- 相关机构：东北大学中荷生物医学与信息工程学院北京大学人民医院四川大学生命科学学院遗传医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 曲古抑菌素A对神经细胞神经型一氧化氮合酶蛋白及一氧化氮水平的影响
- 2010年
- 目的探讨曲古抑菌素A(TSA)对神经细胞神经型一氧化氮合酶(nNOS)蛋白表达水平及nNOS催化的一氧化氮(NO)合成的影响。方法以大鼠神经胶质瘤C6细胞为研究对象,应用Western印迹杂交方法检测TSA刺激对nNOS蛋白表达水平的影响;分别应用TSA、7-NI(nNOS特异性抑制剂)及二者联合作用细胞,应用DAF-2DA荧光染料检测NO合成水平的变化,从而分析TSA对nNOS催化的NO合成水平的作用。结果 TSA使C6细胞nNOS蛋白表达显著升高,达到对照的2.8倍(P<0.001);同时TSA的作用使nNOS催化的NO合成明显上升,为基础状态的3.5倍(P<0.001)。结论 TSA可上调C6细胞中nNOS蛋白及其催化的NO合成,这可能为TSA的临床应用提供一定的分子基础。
- 李英慧陈芳杰李苗赵彦艳
- 关键词：一氧化氮合酶曲古抑菌素
- HOXD13、FHL1和先天性马蹄内翻足的相关研究被引量：7
- 2008年
- 为研究HOXD13、FHL1和先天性马蹄内翻足的关系,应用变性梯度凝胶电泳技术检测HOXD13基因在先天性马蹄内翻足个体中的突变,应用半定量RT-PCR及免疫组织化学技术检测HOXD13、FHL1在先天性马蹄内翻足患者肌肉组织中的表达;并用软件预测FHL1基因上游HOXD13的结合位点,凝胶阻滞试验(Electrophoretic mobility shift assay,EMSA)验证HOXD13和FHL1的相互作用。结果84例先天性马蹄内翻足患者中未发现HOXD13基因编码区突变存在。与同期正常足部肌肉组织相比HOXD13(33.3%),FHL1(46.6%)在先天性马蹄内翻足患者肌肉组织中表达明显下调。EMSA结果表明,当HOXD13存在时出现特异的DNA阻滞条带。上述结果说明:HOXD13的编码区突变可能不是先天性马蹄内翻足发生的原因,而HOXD13和FHL1表达水平的改变可能与马蹄内翻足畸形的发生有关,HOXD13可能通过直接调控FHL1发挥作用。
- 王莉莉富伟能李增刚孙开来
- 关键词：先天性马蹄内翻足FHL1突变
- 右半结肠癌p27^(Kip1)蛋白的表达及预后意义被引量：1
- 2004年
- 目的 :研究 p2 7Kip1蛋白在右半结肠癌组织中的表达并探讨其预后应用价值。方法 :通过免疫组化S P方法对 76例右半结肠癌组织标本进行p2 7Kip1蛋白表达的检测。结果 :p2 7kip1染色阳性 40例 ,占 52 .6%。p2 7kip1蛋白水平与右半结肠癌临床分期、浸润深度、淋巴结转移、病理分级及复发均显著相关。结论 :检测p2
- 孙涛刘艳茹魏雷震高雅苓
- 关键词：右半结肠癌免疫组织化学P27^KIP1蛋白
- 人核糖体小亚基蛋白24剪接变异体mRNA在胃癌中的表达被引量：2
- 2004年
- 目的探讨人核糖体小亚基蛋白(RPS)24剪接变异体mRNA在胃癌中的表达及其意义。方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)结合剪接位点特异性引物技术,检测60例胃癌和7例胃溃疡标本中RPS24剪接变异体mRNA表达情况,并分析其与临床病理因素的关系。结果 所有的胃癌和胃溃疡标本中均出现RPS24a mRNA表达;而RPS24c mRNA在胃癌组织表达率为96.7％,癌旁正常黏膜为11.7％;并且低、未分化型胃癌、淋巴结转移≥5个、TNMⅢ、Ⅳ期病例的RPS24c mRNA表达比率分别显著高于分化型胃癌、淋巴结转移<5个、TNM Ⅰ、Ⅱ期胃癌病例(P<0.05)。胃癌组织中RPS24 mRNA的总体表达水平显著高于癌旁正常黏膜(P<0.01),而且TNMⅢ、Ⅳ期胃癌中RPS24 mRNA表达水平显著高于Ⅰ、Ⅱ期胃癌(P<0.05);胃溃疡中RPS24mRNA的表达水平与正常胃黏膜差异无显著性(P>0.05)。结论RPS24剪接变异体的异常表达与胃癌的发展、转移有关,可作为胃癌生物学行为评估和判断预后的指标。
- 李健徐惠绵孙秀菊孙开来
- 关键词：胃癌变异体TNM剪接位点核糖体
- RECK基因GFP融合蛋白表达载体的构建、鉴定及在脑胶质瘤细胞中的表达
- 2007年
- 目的:获得RECK基因GFP融合蛋白表达载体并使其在脑胶质瘤细胞SHG44中表达。方法:用基因克隆的方法构建RECK基因GFP融合蛋白表达载体,通过酶切和测序鉴定,用绿色荧光蛋白表达载体对RECK基因在人脑胶质瘤细胞SHG44中进行亚细胞定位。结果:所得RECK基因融合蛋白表达载体序列与预期相符。pEGFP-RECK表达质粒转染SHG44细胞后,荧光信号主要集中在与细胞质有关的部位。结论:成功构建了GFP-RECK融合蛋白表达质粒,这为进一步研究该基因的功能奠定了基础。
- 李喆魏雷震王运杰
- 关键词：RECK基因胶质瘤绿色荧光蛋白基因克隆
- 多个顺式作用元件调节血管紧张素原基因表达被引量：1
- 1998年
- 血管紧张素原是最强的血管活性物质——血管紧张素Ⅱ的唯一前体，在不同的生理和病理条件下，其水平各异．为了研究血管紧张素原基因表达的调控，将人血管紧张素原基因５′端侧翼序列１．２ｋｂ同氯霉素乙酰转移酶（ＣＡＴ）基因编码序列连接，构成表达载体，并且在此基础上构建５′端系列缺失的突变表达载体，用这些表达载体转染ＨｅｐＧ２和ＣＯＳ－７，确定了正负调控元件；同时应用ＤＮＡ－蛋白质凝胶泳动检测技术，发现核蛋白质与该顺式元件的结合，从而证明多个顺式作用元件调节血管紧张素原基因的表达．
- 赵彦艳孙开来
- 关键词：血管紧张素原顺式作用元件基因表达
- 干扰素-β对胶质瘤的生长抑制以及对其他细胞因子的调节作用的初步研究被引量：2
- 2006年
- 目的研究干扰素-β(IFN-β)对胶质瘤细胞系SK-MG-1的生长抑制作用和诱导凋亡的作用。并研究IFN-β在SK-MG-1细胞系中对其他细胞因子的调节作用。方法分别用IFN-β基因和蛋白刺激胶质瘤细胞系SK-MG-1,通过MTT方法检测细胞增殖情况,并运用流式细胞技术检测其对凋亡的影响,同时用实时定量PCR的方法检测细胞因子的变化。结果结果显示IFN-β可以抑制细胞增殖,诱发细胞凋亡,定量PCR结果显示在胶质瘤细胞细中IFN-β上调白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA表达,同时一过性下调白细胞介素-6(IL-6)的mRNA表达。结论IFN-β可以抑制胶质瘤细胞系SK-MG-1的增殖,诱发细胞的凋亡。可以调节其他细胞因子的表达。
- 李光宇郭宗泽刘薇赵彦艳
- 关键词：胶质瘤实时PCR
- 泌尿生殖系统畸形的遗传学分析被引量：3
- 2009年
- 目的 系统分析22q11．2区基因在胚肾中的表达规律，并在患者中筛查候选基因的潜在突变。方法 用逆转录-聚合酶链反应测定33个人类基因的同源体在不同胚龄以及成年小鼠肾脏中的表达水平，选取其中具有特异性表达者，在44例泌尿生殖系统畸形以及220名正常对照中进行突变筛查或排除，并对疑似突变者进行测序验证。为了减少误差，基因表达检测以及测序验证均重复两次。结果 Kmeans聚类分析提示，9个基因在胚肾发育全程均无表达；18个基因自发育初期或稍晚开始持续表达、强度仅呈微弱波动；6个基因在胚肾发育中呈短暂的一过性表达。结合文献研究，从后者中选择SNAP29基因进行全编码区突变筛查。聚合酶链反应-单链构象多态性及测序分析提示，在上述病例中，1例（隐睾）具有SNAP29基因第2外显子内的错义突变（GAG→AAG），2例（分别为隐睾和尿道下裂）在第3外显子中存在错义突变（AGC→GGC），对照组则未见相同突变。结论 初步阐明了22q11．2区基因在小鼠胚肾发育期的表达规律，并证实多名泌尿生殖系统畸形患者具有候选基因SNAP29的错义突变，提示后者可能在泌尿生殖系统的发育中扮演关键角色。
- 张静淑傅煜赵艳辉李斐钱爱丽吴斌李岭
- 关键词：泌尿生殖系统畸形胚胎发育突变
- HEK293细胞中DDAH2蛋白的乙酰化
- 一氧化氮(NO)是一种重要的血压调节因子,它由左旋精氨酸在一氧化氮合酶(NOS)催化下合成.NOS包括三种亚型：神经性(nNOS)、诱导型(iNOS)及内皮型(eNOS).非对称性二甲基精氨酸(ADMA)是三种NOS的共...
- 孙陆李英慧李家亓初国铭李春义赵彦艳
- 关键词：乙酰化基因表达
- 曲古抑菌素A对神经胶质瘤细胞NOS1基因转录的影响被引量：1
- 2010年
- 目的以曲古抑菌素A(TSA)为乙酰化作用因素,研究大鼠神经胶质瘤C6细胞中乙酰化对神经型一氧化氮合酶(NOS1)基因转录水平的影响。方法应用real-time RT-PCR方法检测C6细胞中NOS1基因mRNA在不同时间及不同浓度TSA作用下表达水平的变化;采用nuclear run-off实验检测TSA作用下NOS1基因转录效率的改变。结果 TSA以时间及浓度依赖方式上调C6细胞中NOS1 mRNA水平;NOS1基因转录效率在TSA作用下显著提高。结论 TSA引起的乙酰化使C6细胞中NOS1基因转录水平明显增加。
- 李英慧李春义陈芳杰赵彦艳
- 关键词：TSA乙酰化
