承德医学院微生物与免疫学教研室
- 作品数：6 被引量：5H指数：2
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所中国医学科学院北京协和医学院基础医学院上海交通大学医学院更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金国家高技术研究发展计划河北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 二甲基亚硝胺诱发大鼠肝纤维化模型肝脏超微结构形态学与血清透明质酸、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原含量的变化(英文)被引量：1
- 2007年
- 背景:肝纤维化的发展伴随诸多的形态学和机能学的改变,二甲基亚硝胺所致的大鼠肝纤维化模型病变类似于人类肝纤维化病变。目的:观察二甲基亚硝胺诱发大鼠肝纤维化发生过程中形态学与血清透明质酸、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原含量的动态变化。设计:随机对照动物实验。单位:延边大学医学院病理教研室实验室。材料:选用80只3月龄Wistar雄性大鼠,清洁级,体质量175～200g,由延边大学医学院动物中心提供。试剂:二甲基亚硝胺美国Sigma公司产品,α-平滑肌肌动蛋白为Dako公司产品,天狼猩红(Siriusred)为Aldrichchem公司产品,血清透明质酸、层粘连蛋白和Ⅳ型胶检测试剂盒为华美生物工程公司产品,兔抗鼠的一抗为Dako,Denmak生物公司的产品。仪器:日本产JEM-1200EX透射电镜;日本产酶联免疫检测仪;北京航空航天大学研制开发的CMTAS多功能真彩色病理图象分析系统。方法:实验于2004-06/2005-12在延边大学医学院完成。摸球法随机将大鼠分成2组。模型组(n=40):给予腹腔注射10g/L二甲基亚硝胺(10μL/kg),1周连续注药3d(1次/d),持续4周;对照组(n=40):在同一时间段内注射同样剂量的生理盐水;分别在实验开始7,14,21,28d处死大鼠,处死前左心室取血,血清样品被冷冻在-70℃的低温冰箱中备实验用,处死后取其肝组织用于光镜和电镜的样品制备。①用ELISA法测定在肝纤维化形成过程中血清透明质酸、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原含量的动态变化。②采用苏木精-伊红染色、组织化学的天狼猩红染色观察肝纤维化形成过程中组织形态学变化及对肝纤维化分级(肝纤维化程度分为0～4级,0级:没有肝纤维化;1级:汇管区有纤维化;2级:汇管区与汇管区之间形成纤维间隔;3级:肝小叶中出现纤维间隔,并且肝的正常结构出现病理改变;4级:形成肝硬化),同时计算胶原纤维的面密度。③采用透射电镜技术、免疫组织�
- 李春辉潘理会朴东明尹正日许文燮
- 关键词：纤维化二甲基亚硝胺形态学层粘连蛋白
- 日本血吸虫Mf1和胞质氨基肽酶基因的亚克隆表达与免疫保护效果测定
- 目的:在大肠杆菌中高效表达日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)Mf1蛋白和胞质氨基肽酶(cytosol aminopeptidase,CA),并对表达产物进行免疫保护效果测定。方法:将Sj Mf...
- 王庆林易新元曾宪芳罗新松何永康彭兴华
- 文献传递
- 人白细胞介素-3基因cDNA的克隆及其真核表达质粒的构建
- 2006年
- 目的:克隆人白细胞介素-3(hIL-3)基因cDNA,构建其真核表达质粒pcDNA3/hIL-3。方法:从人外周血单个核细胞中提取IL-3mRNA,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增IL-3基因cDNA,通过T/A克隆法,首先构建pUCm-T/hIL-3,然后构建其真核表达型载体pcDNA3/IL-3。结果:pUCm-T/hIL-3内插入片段序列与hIL-3基因序列一致;pcDNA3/IL-3经酶切鉴定与预期结果一致。结论:成功完成了hIL-3基因克隆和pcDNA3/IL-3真核表达质粒的构建。
- 赵秀荣周晓春米术斌段一娜徐大为王庆林
- 关键词：白细胞介素-3基因克隆真核表达质粒
- 人IL-3基因cDNA的克隆及其在造血干细胞的表达被引量：2
- 2006年
- 目的 克隆人IL-3基因cDNA并转导人脐带血造血干细胞，然后研究这一细胞因子的表达情况，从而为脐血扩增及移植打下理论基础。方法 从人外周血单个核细胞中提取IL-3mRNA，用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）扩增IL-3 cDNA，通过T／A克隆法，构建真核表达型载体pcDNA3／IL-3。将pcDNA3／IL-3质粒转导脐血造血干细胞，并于1—7d检测IL-3表达情况。结果 pcDNA3／IL-3重组质粒的目的基因与ID3基因序列相同；pcDNA3／IL-3转导脐血造血干细胞后，经检测能够有效表达。结论 成功克隆了hIL-3并构建重组质粒pcDNA3／IL-3，该质粒转导脐血造血干细胞后，能在短期内有效表达。
- 赵秀荣王庆林徐大为许倩周晓春颜勇
- 关键词：IL-3克隆造血干细胞
- 癌症腹腔／全身过继免疫联合治疗的试验与临床研究
- ＜正＞对22例卵巢癌患者腹腔积液腹腔冲洗液中的肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）在体外用小剂量rIL-2 诱导、扩增;测定其扩增前后的CD3、CD4、CD8、CD16、IL-2R水平。NK细胞杀伤活性。针对
- 李瑞民徐大为郑建军张玉娟刘静李瑞芳
- 文献传递
- 抗Aβ人源融合抗体在毕赤酵母中的高效表达纯化及性质研究被引量：2
- 2005年
- 抗β-淀粉样多肽(Aβ)的抗体对老年性痴呆(AD)病变有清除作用,人源融合抗体由可识别结合Aβ的多肽序列A与人抗体Fc段连接重组构成。构建的单拷贝表达载体PA0815-αAFc,可以在毕赤酵母中高效表达。此表达载体含有一个AFc表达单元,并在受严格调控的醇氧化酶启动子的控制下由甲醇诱导表达,并利用α因子前导肽引导融合抗体分泌。载体线性化后整合入甲醇营养型酵母Pichia pastoris(Pp)GS115基因组中,经鉴定表达单位具有良好的遗传稳定性。对筛选得到的高分泌表达融合抗体的细胞株进行表达和培养条件的优化,使诱导上清液中融合抗体的产量选到100mg/L。利用Protein A层析柱分离、纯化,获得纯度较高的融合抗体。经鉴定分析其具有正确的分子量和N末端,且融合抗体可与Aβ抗原结合并能吸引巨噬细胞吞噬和清除抗原抗体复合物,具有抗体生物学活性。这是首次利用甲醇营养型酵母表达系统成功实现了抗Aβ融合抗体的高效分泌表达及产物纯化鉴定,为进一步研究AD及其治疗提供了新的途径。
- 刘立颖许士奇赵雪梅杜洪震张伟梁平
- 关键词：阿尔茨海默病免疫治疗
