作物基因工程湖南省重点实验室 作品数:97 被引量:791 H指数:17 相关作者: 施春霖 胡婷丽 王悦 周小芸 更多>> 相关机构: 湖南农业大学 国家杂交水稻工程技术研究中心 中国科学院遗传与发育生物学研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技重大专项 湖南省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 自动化与计算机技术 更多>>
甘蓝型油菜pep基因片段的克隆和种子特异性反义表达载体的构建 被引量:11 2005年 丙酮酸羧化酶(PEP)是控制油菜蛋白质/油脂含量比例的一个关键酶,抑制种子中pepc基因的表达,使其底物(丙酮酸)更多地朝生成油脂的方向流动,对提高种子的含油量,增加油菜的经济价值具有重要的意义.利用PCR技术从甘蓝型油菜湘油15号基因组中扩增了PEP基因片段,并将其克隆到pGEM-TEasy载体上进行测序.测序结果表明:扩增片段长576bp,与Yannai报道的PEP基因相应区域的同源性为95%.用扩增引物上设计的BamHI和SacI两位点酶将PEP基因片段切下,反向插入到pBI121.N质粒的Napin启动子之后,构建了种子特异性反义PEP表达载体,并通过农杆菌介导法将反义PEP基因转化到湘油15号中. 张志刚 白德朗 陈烈臣 熊兴华 李栒 官春云关键词:甘蓝型油菜 PCR 拟南芥DWF4基因的内含子影响自身表达 被引量:3 2012年 为了进一步确定DWF4基因的内含子是否影响自身表达,构建了35S启动子驱动的带内含子和不带内含子的DWF4基因表达载体,分别转入拟南芥DWF4基因的弱突变体psc1。对T2代幼苗进行表型分析发现,转入带内含子的DWF4基因的转基因株系TgD4能完全恢复突变体的表型,而转入不带内含子的DWF4基因的转基因株系TcD4只能部分恢复突变体的表型。RT–PCR分析显示,TgD4的DWF4表达水平明显增加,说明内含子对DWF4基因的表达有增强作用。 彭志红 黄颖 袁利兵 任春梅关键词:拟南芥 内含子 基因表达 拟南芥sscd1–1点突变对其表达的影响 被引量:1 2016年 为了探明拟南芥sscd1–1突变体中sscd1–1突变基因表达水平的降低是由剪切效率所致还是由自身启动子影响所致,分别构建了由外源35S启动子驱动的SSCD1正常基因和sscd1–1突变基因的表达载体及由内源自身启动子驱动的SSCD1正常基因和sscd1–1突变基因的表达载体,并将其转入到拟南芥sscd1–1突变体中。采用RT–PCR分析sscd1–1突变基因的表达。结果显示:外源35S启动子驱动的sscd1–1突变基因的表达与正常基因相比没有明显差别,而内源自身启动子驱动的sscd1–1突变基因的表达显著降低,这表明sscd1–1的点突变没有影响其剪切效率;sscd1–1突变基因表达水平的降低是由内源自身启动子影响所致。 黄弈 韩成云 支添添 任春梅关键词:拟南芥 启动子 基因表达 分子标记辅助选择Pi9基因改良籼型三系不育系三香A稻瘟病抗性 被引量:3 2022年 以籼稻品系75-1-127作为广谱持久抗稻瘟病基因Pi9的供体亲本,先后以籼型三系保持系三香B及其不育系三香A为受体亲本,利用Pi9基因内共显性In Del标记Co In DF1R1开展分子标记辅助选择连续回交育种,定向改良三香B和三香A的稻瘟病抗性。以三香B、三香A、75-1-127和感病对照CO39为材料,用来自国内外不同稻区的28份稻瘟菌菌株进行室内苗瘟接种试验,结果表明,75-1-127的抗性频率为85.71%,三香A和三香B的抗性频率均为28.57%。共显性标记Co In DF1R1从75-1-127基因组中扩增出一条320 bp的清晰条带,而从三香A和三香B基因组中的扩增产物约410 bp,多态性明显且稳定。用Co In DF1R1开展了连续10年的辅助选择回交育种实践,培育出改良抗病不育系三香A-Pi9及其配套抗病保持系三香B-Pi9。田间自然病圃苗瘟抗性鉴定表明,三香A和三香B高感苗瘟,而75-1-127、三香A-Pi9和三香B-Pi9均高抗苗瘟。花粉镜检和田间育性调查结果表明,三香A-Pi9和三香A花粉少,花粉粒以圆败为主,套袋自交结实率为0;而三香B和三香B-Pi9花粉较多,花粉粒碘染及田间结实正常。此外,三香A-Pi9具有优良的异交习性,柱头外露率达61.70%。三香A-Pi9和三香B-Pi9田间群体整齐一致,主要产量性状与对应受体亲本相似,而单穗颖花数极显著增加,丰产性更好,杂种优势潜力更大。 张婷 黄俊 梁毅 李博文 车凡昊 邹玉莹 邓吉奇 姚威 刘金灵 刘雄伦 刘雄伦关键词:分子标记辅助选择 水稻黄绿叶突变体djyg的遗传分析与基因定位 被引量:2 2015年 在粳稻品种Dongjin大田种植过程中,发现一个黄绿叶自然突变体,命名为djyg。该突变体在苗期表现明显的黄绿叶表型,抽穗以后,叶色逐渐恢复正常。叶绿素含量测定结果表明,在苗期、分蘖盛期及抽穗期叶绿素b的含量分别下降53%、62%、36%。电镜结果表明,分蘖期突变体中基粒、类囊体垛堆凌乱、排列疏松,类囊体基质较为稀薄。qRT-PCR结果证实,PORA、Cab1R、PsbA的表达量在突变体中均较野生型明显下调。遗传分析结果表明,黄绿叶突变体djyg由一对隐性主效核基因控制,图位克隆确定该候选基因为编码叶绿素合成酶基因YGL1的一个新等位基因。该突变体未影响植株的主要农艺性状,可作为一个理想的表型标记应用于杂交稻育种工作中。 李智强 朱丹 王志龙 丁波 王国梁关键词:水稻 突变体 图位克隆 泛素化在病原物相关分子模式诱导的植物先天免疫反应中的作用 被引量:1 2017年 泛素化广泛参与调控植物体内多种生理生化反应,如生长发育、先天免疫反应等。综述了泛素化在病原物相关分子模式(PAMPs)激发的植物先天免疫反应(PTI)中的作用,重点介绍了泛素化在细菌鞭毛蛋白和真菌几丁质等PAMP引起的PTI反应中的作用及其机制。此外,还综述了病原微生物分泌的部分效应因子泛素化靶标或者通过抑制植物靶标泛素化以抑制PTI反应并达到侵染的目的,以为解析植物体内抗性调节机制和植物病原菌的防治提供参考。 雷苏炜 李魏 董铮 李利华 戴良英关键词:植物 泛素化 病原物 外源DNA浸泡水稻种子的电镜观察 被引量:7 1997年 利用扫描电镜和透射电镜对水稻DNA浸种法受体进行研究,结果显示水稻胚生长点细胞在浸泡过程中内部和表面发生了一系列显微和亚显微结构变化.这些结构变化对外源DNA直接导入受体是非常有利的,但DNA导入的具体途径还有待进一步的实验来证明. 阮颖 刘春林 董延瑜关键词:水稻 种子 外源 脱氧核糖核酸 浸泡法 甘蓝型油菜WRI1基因cDNA的克隆与序列分析 被引量:7 2013年 通过RT-PCR方法克隆了甘蓝型油菜湘油15号5个WRI1基因cDNA。测序结果显示,BnWRI1-1大小为1 248 bp,BnWRI1-2和BnWRI1-3大小为1 254 bp,BnWRI1-4、BnWRI1-5大小为1 242 bp;聚类分析结果显示,所克隆WRI1基因cDNA在进化关系上属于AP2/ERF转录因子家族,同拟南芥AtWRI1(At3G54320)同处1个分支,并且所克隆基因cDNA来自甘蓝型油菜不同的基因组;通过核苷酸序列比对分析,得到所克隆WRI1基因cDNA单核苷酸变异位点40个;特异性酶切位点分析显示,来源于A基因组的BnWRI1-1、BnWRI1-2、BnWRI1-3第892位与来源于C基因组的BnWRI1-4和BnWRI1-5第880位的核苷酸发生变异,导致Bcl I识别位点的变化;酶切试验结果表明,采用BclI酶可区分甘蓝型油菜的AtWRI1-like WRI1基因的A或C基因组来源。 施春霖 刘聪 肖旦望 陈社员 官春云 熊兴华关键词:甘蓝型油菜 CDNA 台盼蓝染色鉴定拟南芥sdl1突变体的细胞死亡 被引量:14 2013年 拟南芥突变体sdl1在光周期为16 h黑暗/8 h光照条件下生长叶片出现先萎蔫后白化现象,采用台盼蓝染色的方法研究萎蔫及白化苗的死亡情况,结果证实突变体sdl1萎蔫处发生细胞死亡,但细胞完全死亡(完全白化)后不能被染色,所以台盼蓝染色只能对突变体sdl1细胞死亡的早期进行鉴定。 支添添 周舟 韩成云 任春梅关键词:拟南芥 细胞死亡 水稻Pi2/9位点3个抗瘟基因的抗菌谱及稻瘟病菌遗传多样性分析 被引量:1 2012年 采用35个不同来源的稻瘟病菌菌株,对3个稻瘟病抗性基因Pi9、Pi2、Pizt的供体亲本和以日本晴为遗传背景的转基因近等基因系进行室内接种鉴定,比较分析3个基因的抗谱差异。结果表明:Pi9和Pi2的抗谱较广,抗性频率均达到94.2%,Pi9对菌株ROR1和X2007A–7表现感病,Pi2对菌株CHNOS60–2–3和RB14表现感病,Pizt抗谱较窄,抗性频率仅为60%,使用13对SSR引物分析其中20个稻瘟病菌菌株的遗传多样性,可划分为4个宗谱,菌株的遗传宗谱和来源相关性不显著,与致病性有一定的相关性。 江南 王素华 李智强 文婷 梁毅 吴俊 杨婷婷 戴良英 王国梁 刘雄伦关键词:水稻 稻瘟病菌 抗性基因 抗菌谱