国家自然科学基金(31000076)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 相关作者：张海方朱云霞赵昕翁晓琴张晓磊更多>>
- 相关机构：江苏大学苏州大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金江苏省博士后科研资助计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 细菌线性质粒的复制研究被引量：2
- 2014年
- 细菌的线性质粒是近年来基础微生物学研究的一个新热点。线性质粒的复制与环状质粒相比,其最突出的特点就是它的5'末端填补机制——填补因为5'末端引物被切除所留下的缺口。根据线性质粒末端结构的不同将其分为两大类:一类具有共价闭合的发夹末端,另一类具有共价结合的末端蛋白。就细菌线性质粒复制的研究现状作一综述,重点介绍了具有两种不同末端结构的线性质粒5'末端填补机制。
- 朱云霞赵昕张绮思张海方
- 关键词：线性质粒细菌
- 伤寒沙门菌线性质粒pBSSB1的p17基因的生物学功能分析
- 2014年
- H:z66阳性伤寒沙门菌含有一特有的介导鞭毛单向相变换的线性质粒pBSSB1,其上第17号基因(p17)编码一未知功能蛋白(P17)。利用λ-Red系统制备p17基因缺陷变异株,测定变异株和野生株的生长曲线,比较其生长差异,同时通过半固体LB培养基进行动力试验比较其动力差异。利用PCR技术扩增获得p17基因,构建其重组表达载体pET28a(+)-p17,通过镍柱纯化目的蛋白P17-His6,纯化后蛋白作为抗原免疫兔子以制备多克隆抗体。结果显示,制备了p17基因缺陷变异株,变异株的生长明显迟缓于野生株(P<0.05),变异株的动力明显减弱。构建了重组表达载体pET28a(+)-p17,纯化获得了高纯度的目的蛋白P17-His6并制得相应的多克隆抗体。
- 朱云霞吴佳龚明玉侯书宁张绮思陈敏洁张海方
- 关键词：伤寒沙门菌线性质粒
- OxyR蛋白对不同应激条件下伤寒沙门菌生存能力的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:研究OxyR蛋白对伤寒沙门菌(Salmonella enterica serovar Typhi,S.Typhi)在应激条件下生存能力的影响。方法:用λ-Red系统制备S.Typhi oxyR基因缺陷变异株;通过重组质粒pBAD/gⅢ将oxyR基因和pBAD/gⅢ空质粒分别导入oxyR基因缺陷变异株;构建oxyR缺陷回补株和oxyR缺陷回补空质粒株;制作生长曲线,观察野生株、oxyR缺陷株、oxyR缺陷回补株及oxyR缺陷回补空质粒株在不同应激条件下的生长状况;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析OxyR对S.Typhi氧化调节相关基因表达的影响。结果:成功制备S.Typhi oxyR基因缺陷变异株、oxyR基因缺陷回补株和空质粒对照株;生长能力分析结果表明,与野生株相比,oxyR缺陷株在氧应激时生长缓慢(P<0.05),oxyR缺陷回补株的生长能力得到恢复;qRT-PCR结果显示,在氧应激时OxyR蛋白可以抑制hemH基因的表达,活化uxuA基因的表达。结论:OxyR蛋白参与S.Typhi对氧应激的调节,为进一步研究S.Typhi的致病性奠定了基础。
- 詹莉芳张晓磊翁晓琴张海方徐顺高黄新祥
- 关键词：伤寒沙门菌OXYR氧应激
