国家自然科学基金(81170710)
- 作品数：8 被引量：27H指数：2
- 相关作者：张杰徐长庚王伟周向军许明伟更多>>
- 相关机构：武汉大学湖北理工学院中南大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 地塞米松对内毒素诱导的肾小管上皮-间质转化的抑制作用
- 2016年
- 目的:探讨地塞米松(dex)抑制内毒素诱导的大鼠正常肾小管上皮细胞(NRK-52E)上皮-间质转化的作用和机制。方法:按照不同的处理方式分为:对照组(Control),内毒素组(LPS 5mg/L),地塞米松小剂量组(LPS 5mg/L+dex 0.5mg/L),地塞米松中剂量组(LPS 5mg/L+dex 5mg/L)和地塞米松大剂量组(LPS 5mg/L+dex50mg/L)。处理24h后,取各组培养基200μl,1 500 g、15min离心后去沉淀,分析IL-1和TNF-α的分泌量。通过细胞免疫荧光检测上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维黏连蛋白(Fibronectin)。Western blotting检测核转录因子(NF-κB-p65),磷酸化Smad3(p-Smad3),核因子转录抑制蛋白α(IκB-α)的表达。结果:ELISA结果显示,内毒素组IL-1,TNF-α分泌较对照组明显增多,加入地塞米松后分泌逐渐减少,大剂量效果尤为显著。细胞免疫荧光结果显示,内毒素组较对照组E-cadherin的表达减少,α-SMA和Fibronectin表达增多,加入地塞米松后能够阻止这种改变,并呈剂量依赖。Western blotting结果显示地塞米松能上调IκB-α表达,并减少NF-κB-p65,p-Smad3的表达。结论:地塞米松可能通过NF-κB/Smad信号通路抑制内毒素诱导的肾小管上皮-间质转化。
- 吴品张礼军周向军王伟秦聪张杰
- 关键词：地塞米松内毒素上皮-间质转化NF-ΚB
- Lefty-2蛋白对转化生长因子β1诱导的大鼠肾成纤维细胞NRK-49F转分化的逆转作用及其机制
- 2016年
- 目的观察Lefty-2蛋白对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的肾成纤维细胞(NRK-49F)转分化的逆转作用,并探讨其机制。方法对照组:NRK-49F不做处理;刺激组:加入TGF-β1(10ng/ml);低剂量治疗组:TGF-β1(10ng/ml)+Lefty-2(10ng/ml);中剂量治疗组:TGF-β1(10ng/ml)+Lefty-2(20ng/ml);高剂量治疗组:TGF-β1(10ng/ml)+Lefty-2(50ng/ml)。通过细胞免疫荧光法观察各组α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤连蛋白(FN)和波形蛋白(Vimentin)的表达水平,通过Western blot法检测各组α-SMA、FN、Vimentin、p-Smad3蛋白、Smad7蛋白的表达水平。结果细胞免疫荧光结果显示,刺激组α-SMA、FN、Vimentin表达量均显著增加,治疗组较刺激组表达量均明显减少。Western blot法结果显示,治疗组α-SMA、FN、Vimentin的表达量较刺激组均下降(P<0.01),而且呈现剂量效应。刺激组p-Smad3蛋白表达上调,治疗组p-Smad3蛋白的表达量较刺激组明显下调(P<0.01);刺激组Smad7蛋白表达下调,治疗组Smad7蛋白的表达量较刺激组明显上调(P<0.01)。结论 Lefty-2蛋白可逆转TGF-β1诱导的NRK-49F的转分化,可降低α-SMA、FN、Vimentin的表达,可能是通过活化Smad7信号通路,抑制Smad3的磷酸化,从而抑制Smad3信号通路来实现的。
- 秦聪张杰张礼军吴品
- 关键词：TGF-Β1转分化
- 间充质干细胞在肾损伤修复中的应用被引量：1
- 2012年
- 肾脏被认为是体内高度终末分化的脏器之一，其可增殖潜能极低。但在临床上，通过急性肾损害的恢复使我们看到了肾脏再生的可能，而关键在于如何诱发损伤肾的再生潜能以及如何将这种潜能发挥到最好。干细胞（SC）和合适的微环境（如局部的细胞因子及细胞外基质的存在）对于肾损害的再生或修复是必要的。
- 白志明张杰
- 关键词：间充质干细胞肾脏急性肾损害细胞外基质终末分化增殖潜能
- 去势抵抗性前列腺癌的治疗策略被引量：12
- 2012年
- 内分泌治疗是目前晚期前列腺癌的主要治疗方法,但大多数患者经过14～30个月的治疗后均逐渐发展为去势抵抗性前列腺癌(CRPC),其中位生存期小于20个月。相关生物靶向治疗研究较为深入,多西他赛联合泼尼松方案已成为CRPC治疗的一线化疗方案,唑来膦酸盐能明显减少骨相关事件的发生率。然而,CRPC治疗策略制定仍是目前临床的一个难题,本文结合文献报道综述CRPC的治疗策略。
- 许明伟张杰
- 关键词：激素难治性前列腺癌药物治疗
- 肌层浸润性膀胱癌药物治疗进展被引量：1
- 2012年
- 肌层浸润性膀胱癌分为局部进展性膀胱癌和转移性膀胱癌,对于前者,以根治性膀胱切除为主,药物化疗为辅;后者以化疗为主。肌层浸润性膀胱癌药物化疗分为新辅助化疗、辅助化疗和分子靶向治疗。本文综述肌层浸润性膀胱癌药物治疗进展。
- 徐长庚张杰
- 关键词：膀胱癌化疗新辅助化疗靶向治疗
- 肾细胞癌靶向治疗新进展
- 2012年
- 肾细胞癌(RCC)是恶性度极高的泌尿系统肿瘤,早期病例主要以根治性切除为主,但进展性和转移性RCC的临床治疗效果不佳。随着分子生物学研究的进展,近期RCC靶向治疗不断取得新突破,本文综述进展性透明细胞癌和不同病理分型非透明细胞癌的分子发病基础及近年靶向治疗新进展。
- 王伟张杰王浩徐长庚许明伟
- 关键词：肾细胞癌靶向治疗
- 茯苓酸对梗阻性肾积水间质纤维化的作用被引量：13
- 2014年
- 目的 探讨茯苓酸（PA）改善梗阻性肾积水后导致的肾间质纤维化的作用及其机制.方法 将28只C57雄性小鼠按照随机列表法分为4组：A组：假手术组;B组：模型组;C组：茯苓酸小剂量组;D组：茯苓酸大剂量组.建模及给药7d后,处死小鼠并取材,苏木素-伊红（HE）染色观察肾脏病理损伤变化,天狼猩红染色检测间质胶原纤维的表达,免疫组织化学染色及实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测间质中胶原纤维蛋白-1（COI-1）、纤维粘连蛋白（FN）和平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达,Western blot检测转化生长因子-β1（TGF-β1）,磷酸化Smad2/3（pSmad2/3）,基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达.结果 输尿管梗阻（UUO）小鼠给予茯苓酸治疗7d后,HE染色显示肾脏病理改变较对照组减轻.天狼猩红染色可见肾间质纤维化程度较对照组明显减轻,且大剂量组减轻更明显.免疫组织化学结果显示COI-1、FN、α-SMA在梗阻后表达明显升高,给予茯苓酸治疗可降低基质中COI-1、FN、α-SMA的表达.Real-time PCR结果显示,在模型组、小剂量茯苓酸组、大剂量茯苓酸组COI-1 mRNA水平相对表达量分别为4.20±1.42、2.30±0.76、1.70 ±0.70;FN在mRNA水平相对表达量分别为5.20 ±2.22、3.00±1.70、1.70±1.06;α-SMA在mRNA水平相对表达量分别4.60±1.23、2.30 ±0.98、1.40 ±0.70.给药组与模型组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.Western blot结果显示茯苓酸可下调TGF-β1、pSmad2/3、MMP-9的表达.结论茯苓酸可改善单侧肾积水导致的间质纤维化,可能是通过下调TGF-β1、pSmad2/3、MMP-9的表达来实现的.
- 王伟徐长庚周向军胡威周庞虎张杰
- 关键词：茯苓酸肾积水肾纤维化金属基质蛋白酶-9
- lefty1基因真核表达载体构建鉴定及转染
- 2016年
- 目的:构建lefty1基因与pcDNA3.1(+)相融合的真核表达载体,并在lefty1基因的下游加上Flag标签,转染人肾小管上皮细胞株验证重组质粒活性。方法:设计并合成lefty1基因上下游引物,同时加上Flag标签序列,PCR扩增基因,并将其连接到真核表达载体pcDNA3.1(+)上,双酶切图谱分析和扩增产物测序鉴定所构建的真核表达载体。脂质体转染法将重组质粒pcDNA3.1(+)-lefty1-Flag和pcDNA3.1(+)分别转染至人肾小管上皮细胞株HK-2,qPCR和Western blot检测lefty1在mRNA和蛋白水平的表达。结果:以lefty1基因质粒模板扩增得到的片段约1 150bp,双酶切得到目的基因片段,测序的结果显示与lefty1基因序列相同。转染肾小管上皮细胞后,pcDNA3.1(+)-lefty1-Flag能表达lefty1蛋白。结论:成功构建lefty1基因真核表达载体,为一步研究lefty1基因功能奠定了基础。
- 徐长庚张杰
- 关键词：真核表达载体
