重庆市卫生局医学科研项目(2009-2-290)
- 作品数:1 被引量:1H指数:1
- 相关作者:刘成邓琴张静李刚更多>>
- 相关机构:重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金:重庆市自然科学基金重庆市卫生局医学科研项目国家临床重点专科建设项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 敲除C3G对H9C2心肌细胞增殖及凋亡的影响被引量:1
- 2018年
- 该研究构建了NT CRISPR/Cas9(阴性对照)及C3G CRISPR/Cas9质粒,分别将其包装成重组慢病毒,并感染H9C2心肌细胞,以研究敲除C3G(Crk SH3域结合鸟嘌呤核苷酸交换因子)对H9C2心肌细胞增殖和凋亡的影响及其机制。将实验分为NT CRISPR/Cas9组、C3G CRISPR/Cas9组、NT CRISPR/Cas9低氧组和C3G CRISPR/Cas9低氧组。通过RT-PCR检测C3G m RNA的表达;Western blot检测相关蛋白表达;CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡。结果显示,C3G CRISPR/Cas9组和C3G CRISPR/Cas9低氧组的C3G m RNA和蛋白无表达;分别与NT CRISPR/Cas9组和NT CRISPR/Cas9低氧组比较,C3G CRISPR/Cas9组和C3G CRISPR/Cas9低氧组的p-ERK1/2和Bcl-2蛋白以及细胞增殖水平均降低(P<0.05),Bax蛋白及细胞凋亡水平均增加(P<0.05);与NT CRISPR/Cas9组相比,NT CRISPR/Cas9低氧组C3G m RNA和蛋白表达均降低(P<0.05),p-ERK1/2和Bcl-2蛋白及细胞增殖水平均降低(P<0.05),Bax蛋白及细胞凋亡水平均增加(P<0.05);与C3G CRISPR/Cas9组相比,C3G CRISPR/Cas9低氧组的p-ERK1/2和Bcl-2蛋白及细胞增殖水平均降低(P<0.05),Bax蛋白及细胞凋亡水平均增加(P<0.05)。以上结果表明,敲除C3G能通过调控p-ERK1/2、Bcl-2及Bax抑制H9C2心肌细胞增殖并促进其凋亡。
- 邓琴刘成张静李刚
- 关键词:增殖凋亡心肌细胞