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排序方式：

甘蔗乙烯受体基因Sc-ERS的克隆与序列分析被引量：1: 2010年; 根据已知乙烯受体基因的序列信息,设计1对简并引物和1对特异引物,对甘蔗叶片基因组DNA进行PCR扩增,获得1个甘蔗乙烯受体基因(Sc-ERS)的片段,其大小为4310 bp,包含1个由5个外显子和4个内含子组成的4219 bp大小的完整编码区。Sc-ERS编码区与玉米乙烯受体ERS1基因(AY359578)、水稻乙烯受体ERS1基因(AY043031)编码区的同源性分别为91.4%、61.6%;推导Sc-ERS编码的蛋白包含636个氨基酸残基,与玉米、水稻乙烯受体基因所编码蛋白的氨基酸同源性分别为94.1%、89.4%。其推导蛋白结构分析结果显示,Sc-ERS编码的蛋白和玉米、水稻ERS1所编码的蛋白相同,在N段保守区含有3个跨膜结构,并由3个跨膜结构、GAF结构、HisKA和HATPase_c组成功能域。核苷酸序列分析和蛋白质结构分析结果表明,Sc-ERS基因属于ERS1基因。; 魏源文邓智年黄诚梅潘有强吕维莉李杨瑞; 关键词：甘蔗乙烯受体基因克隆

豌豆MAR的分离及其功能分析: 2010年; 从3个不同品种豌豆中分离获得3个具有MARs序列特征的DNA片段MMAR、DMAR、HMAR。根据GenBank同源性搜索结果,发现这些片段均为未注册的DNA序列。经转化烟草并测定其GUS活性,结果发现两侧顺式重复连接MAR对外源基因的表达具有明显的增强作用,MMAR、HMAR和DMAR均不同程度提高了GUS的表达,分别为载体对照植株的4.16、3.66和2.08倍,但不同转化体间表达水平差异仍比较明显。; 邓智年魏源文黄诚梅潘有强吕维莉李杨瑞; 关键词：豌豆

土壤自然干旱胁迫对甘蔗幼苗根系保护酶系统的影响被引量：8: 2012年; 【目的】研究干旱胁迫对甘蔗苗期根系保护酶系统及相关指标的影响,探讨甘蔗苗期根系对干旱胁迫的应答机制。【方法】以新台糖22号为材料,在甘蔗苗期进行土壤自然干旱胁迫,测定甘蔗根系保护酶系统及质膜过氧化产物相关指标的变化,并进行相关性分析。【结果】随着干旱胁迫程度的加强,根系中可溶性蛋白质、丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)含量逐渐增加,细胞膜脂过氧化保护酶系统的酶活性均呈先升后降的趋势,干旱胁迫处理15d后SOD和POD活性达到峰值然后降低,CAT活性于11d到达峰值后下降。甘蔗苗期根系保护酶活性与膜脂过氧化作用呈显著或极显著正相关。【结论】甘蔗根系保护酶系统的干旱胁迫响应机制为:轻度干旱与中度干旱时表现为积极应对,重度干旱时则为被动忍耐。根系保护酶系统与甘蔗抗旱性的关系密切。; 郭元元罗海斌曹辉庆何海波杨翠芳邓智年魏源文李杨瑞; 关键词：甘蔗幼苗根系土壤干旱胁迫保护酶系统

10种CpG-ODNs对罗非鱼抗海豚链球菌感染的作用: 2012年; 采用人工合成的10种未甲基化CpG-ODNs序列分别注射健康的吉富罗非鱼Oreochromis niloticus,48 h后注射海豚链球菌(Streptococcus iniae)进行人工感染,分别于感染24 h和48 h后检测鱼体血清溶菌酶(Lysozyme,LSZ)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)和碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,AKP)的活性,并记录死亡率。结果显示:注射ODN-205的罗非鱼LSZ、AKP和SOD活性变化均不显著(P>0.05),推测注射ODN-205后罗非鱼能较好的维持机体的平衡,增强机体的抗菌能力;注射ODN-1681、1670、2133和2006的罗非鱼LSZ活性逐渐降低,而注射ODN-1826、2143、1668、2102、1669的罗非鱼LSZ活性呈现先升高后降低的趋势。AKP活性的变化趋势同LSZ活性变化大体相似,而SOD活性前后变化不显著(p值>0.05)。注射CpG-ODNs的实验组抑制海豚链球菌感染的作用差异显著(p值<0.05),其中以注射ODN-205组的死亡率最低(18%),其次为注射ODN-1670、1681、2006和2133组,死亡率均低于30%,而ODN-1669组和生理盐水组的死亡率均超过90%。实验表明,注射一定量的ODN-205、1670、1681、2006和2133能明显提高吉富罗非鱼抗海豚链球菌感染能力。; 黄婷张彬陈福艳陈明雷爱莹王瑞余晓丽罗永巨梁万文李昭信; 关键词：吉富罗非鱼海豚链球菌抗感染

4种微生物DNA对罗非鱼抗海豚链球菌感染的初步研究被引量：1: 2012年; 将4种微生物基因组DNA腹腔注射罗非鱼(Oreochromis niloticus),48 h后腹腔注射海豚链球菌,在攻毒后24和48 h采血,通过测定血清溶菌酶(LSZ)、超氧化物歧化酶(SOD)和碱性磷酸酶(AKP)活性的变化,以及血液中病原菌感染量和死亡率,探讨注射4种微生物DNA对罗非鱼抗海豚链球菌感染的作用。结果显示,注射大肠杆菌DNA的实验组,LSZ、AKP和SOD均无明显变化(P>0.05),表现为先略低于对照组后升至正常水平;而注射鮰爱德华氏菌DNA、毕赤酵母DNA和生理盐水的实验鱼,LSZ和AKP表现出明显变化(P<0.05),LSZ变化趋势为先增加后降低,而AKP变化趋势则不同。注射感染后除对照组外,其他处理组均有不同程度的细菌感染,其中24 h大肠杆菌组感染量显著低于生理盐水组(P<0.05),而48 h各试验组的细菌感染量均显著低于生理盐水组(P<0.05),尤其以大肠杆菌组和嗜水气单胞菌组最低,且其死亡率也最低,表明注射一定量的大肠杆菌基因DNA和嗜水气单胞菌基因DNA能增强罗非鱼抗海豚链球菌感染能力。; 黄婷张彬梁万文陈福艳陈明余晓丽雷爱莹王瑞罗永巨甘西; 关键词：罗非鱼海豚链球菌溶菌酶碱性磷酸酶

干旱胁迫下甘蔗苗期根系全长cDNA文库构建及EST序列分析被引量：7: 2012年; 【目的】构建甘蔗根系全长cDNA文库,并进行测序,为分离克隆甘蔗抗旱候选基因奠定基础。【方法】在干旱胁迫条件下,以新台糖22号甘蔗根系为材料,采用SMART技术构建cDNA文库,并进行EST序列分析。【结果】文库构建质量鉴定结果显示,文库库容量为1.0×106PFU/mL,重组率约95%,文库插入片段长度在500～2000bp,平均长度约1102.1bp。挑选526个阳性克隆进行单向测序后,共获得523个ESTs序列,去除载体、接头序列以及长度低于100bp的序列后,进行聚类分析并组装,共得到468个Uni-ESTs,其中congtig29个,singlets439个,分别占总数的6.5%和93.5%。通过与NCBI非冗余蛋白库进行BLASTX比对,发现444个Uni-ESTs在GenBank有同源序列,占94.87%;获得24个未知蛋白功能基因,占5.13%。【结论】构建了干旱胁迫下甘蔗苗期根系全长cDNA文库,获得523个ESTs序列和468个Uni-ESTs,并获得一批新的未知蛋白功能基因。; 罗海斌曹辉庆魏源文邓智年潘有强郭元元何海波李杨瑞; 关键词：甘蔗根系表达序列标签

杀虫基因高效植物表达载体的构建被引量：3: 2010年; 以质粒pCAMBIA1200、pBI121、pMMAR和pC1300MAR为基础,通过酶切连接,构建植物中间载体pC2MARHyg;再利用pAVAc质粒、载体pGA1611和中间载体pC2MARHyg,构建含有Ubi-1启动子、顺向重复MAR和杀虫基因AVAc的高效植物表达载体pC2MAR-AVAc,然后转化农杆菌EHA105,经筛选鉴定获得阳性克隆,为进一步开展植物抗虫基因工程研究奠定基础。; 邓智年魏源文黄诚梅潘有强吕维莉李杨瑞; 关键词：杀虫基因植物表达载体 MAR序列

乙烯利调控甘蔗基因差异表达研究被引量：6: 2011年; 【目的】建立并优化乙烯利调控甘蔗基因差异表达的cDNA-AFLP分析体系和银染体系,利用该技术对乙烯利处理的甘蔗进行基因差异表达研究,探讨乙烯利调控甘蔗生长的分子机理。【方法】以甘蔗品种ROC16为材料,在甘蔗生长40d左右时,叶面喷施200mg/L乙烯利溶液(对照为清水)0、3、6、12、24、48h后,分别取甘蔗叶片提取总RNA,建立cDNA-AFLP分析体系和银染体系;利用193对引物组合对乙烯利处理和对照的甘蔗叶片RNA混合池的样品进行差异表达分析,对部分差异转录片段进行回收、克隆、反向Northern杂交验证、序列分析和功能分析等。【结果】经cDNA-AFLP体系反应扩增,乙烯利处理和对照每个样品的扩增条带数均在35～80之间,处理和对照之间条带多态性明显。在反向Northern杂交验证分析中,24个测试样品中有11个无差异,假阳性率高达46%;在乙烯利作用下,甘蔗的CHI、GST、ARP、LHC、核结合蛋白基因以及一批未知基因差异表达,其中CHI、GST、LHC和核结合蛋白基因是与促进植物的抗病抗逆、提高光合作用等密切相关的因子。【结论】cDNA-AFLP技术是研究乙烯利诱导甘蔗相关基因差异表达和调控的一种较有效方法,具有可行性。乙烯利可能是通过调控甘蔗体内GST、CHI、ARP和LHC等基因的表达,从而表现出促进甘蔗生长、提高光合作用、增强抗病抗逆性等生理效应。; 魏源文邓智年黄诚梅李杨瑞; 关键词：甘蔗乙烯利 CDNA-AFLP 基因差异表达

罗非鱼和斑点叉尾鮰血清IgM的纯化及兔抗血清的制备被引量：3: 2010年; 为深入了解罗非鱼和斑点叉尾鮰免疫机理及建立相关免疫检测方法,采用rProtein A Sepharose亲和层析一步法纯化罗非鱼和斑点叉尾鮰血清免疫球蛋白(IgM),并制备其兔抗血清。结果表明,rProtein A Sepharose亲和层析法可以较好地分离获得高纯度的罗非鱼和斑点叉尾鮰血清IgM,通过SDS-PAGE电泳检测,发现罗非鱼血清IgM重链和轻链分子量分别为88.0、21.0 kDa,斑点叉尾鮰血清IgM重链分子量为101.0 kDa。以纯化的罗非鱼和斑点叉尾鮰血清IgM为抗原,制备其兔抗血清,间接ELISA检测其效价分别为1∶32000和1∶16000;Western blotting检测分析,发现罗非鱼和斑点叉尾鮰的兔抗血清分别在88.0和101.0 kDa附近各出现1条反应条带,说明其兔抗血清具有免疫活性。; 黄婷张彬陈明陈福艳雷爱莹余晓丽杨传萍梁万文; 关键词：罗非鱼斑点叉尾鮰纯化

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广西省自然科学基金(0991021)

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