浙江省教育厅科研计划(20070479)
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
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- 相关机构：湖州师范学院更多>>
- 发文基金：浙江省教育厅科研计划国家自然科学基金湖州市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 精原干细胞研究概况被引量：2
- 2009年
- 介绍了精原干细胞(SSCs)的起源、分化潜能、分离纯化、体外培养、特征鉴定、移植及其介导的转基因技术,概括了SSCs研究的意义,并对其应用前景进行了展望。
- 采克俊周国庆张易祥丁志丽刘莉
- 关键词：精原干细胞
- 第28期鸡胚原始生殖细胞的分离培养被引量：1
- 2009年
- [目的]进一步优化生殖细胞(PGCs)细胞体外培养条件。[方法]从第28期(5.5 d)鸡胚生殖嵴分离PGCs,将PGCs与性腺基质细胞共培养进行原代培养,比较2种培养温度和3种培养浓度对PGCs原代培养的影响,以及2种饲养层细胞对PGCs传代培养的影响,并通过倒置显微镜下形态学观察、碱性磷酸酶(AKP)和过碘酸希夫反应(PAS)染色方法鉴定PGCs。[结果]培养浓度为2.5×105个/m l和培养温度为37℃时PGCs增殖较多,不易分化,存活能力较强,以第2代鸡胚成纤维细胞作饲养层时传代培养效果较好,获得了PGCs增殖的未分化集落,为后期的细胞标记及移植研究提供了较多数量和较高活力的PGCs。[结论]获得了PGCs原代与传代培养较好的培养体系,为禽类EG细胞系的建立和转基因研究奠定了基础。
- 丁志丽采克俊刘莉张易祥张念慈
- 关键词：鸡胚原始生殖细胞
- 鸡睾丸生精上皮细胞冷冻保存研究被引量：1
- 2009年
- 以广西土鸡为试验材料，利用两步酶解法从出壳后20～30日龄公鸡睾丸中获取生精上皮细胞，以含20％胎牛血清的DMEM为基础培养液，比较了不同浓度DMSO和蔗糖对生精上皮细胞冷冻保存效果的影响。结果表明：DMSO的最佳浓度为10％，添加蔗糖对冻存有害。以10％DMSO为防冻剂，复苏后生精上皮细胞原代混合培养可形成典型的精原干细胞集落，集落呈碱性磷酸酶（AKP）阳性，说明以10％DMSO为防冻剂的冷冻体系适合鸡睾丸生精上皮细胞的冷冻保存。
- 采克俊张易祥丁志丽谢小丹周源刘莉
- 关键词：精原干细胞冷冻保存体外培养
- 不同冷冻液对鸡精原干细胞冷冻-解冻后存活力的影响被引量：1
- 2009年
- 采用两步酶解和差异贴壁法分离、纯化鸡精原干细胞(SSCs),比较了6种冷冻保护液对其冷冻保存效果,结果表明:FBS浓度为10%时,10%DMSO与10%甘油解冻后细胞存活率分别为54.05%和37.49%,差异显著(P<0.05);以10%DMSO为冷冻保护剂时,FBS浓度从10%增加到20%,解冻后细胞存活率分别为54.05%和69.06%,差异显著(P<0.05);在冷冻液Ⅰ基础上,添加3种不同浓度的蔗糖溶液,解冻后细胞存活率分别为52.49%、47.65%和51.94%,三者之间差异不显著(P>0.05),且与冷冻液Ⅰ组差异也不显著(P>0.05);将解冻后细胞接种饲养层上培养,除甘油组外,SSCs均能增殖并形成AKP阳性集落,但10%DMSO加上20%FBS组细胞增殖速度和集落数优于其他组合,表明10%DMSO加上20%FBS为鸡SSCs最佳冷冻保护剂。
- 丁志丽采克俊刘莉曹访张易祥
- 关键词：精原干细胞冷冻保存
