国家科技重大专项(2009ZX08012-013B)
- 作品数：5 被引量：18H指数：3
- 相关作者：崔海峰俞晓平叶子弘金荣愉韩吉春更多>>
- 相关机构：中国计量学院浙江大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项浙江省重点科技创新团队项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学机械工程更多>>
- 转cry1Ab基因棉花质粒标准分子的构建与分析
- 2013年
- 为缓解转基因检测用标准品严重缺乏的现状,本研究构建了含转基因棉花cry1Ab基因序列及棉花fsACP(fiber-specific acyl carrier protein)内标基因序列的质粒标准分子,经PCR、酶切、测序等方法的验证,证明了所构建质粒的正确性。利用荧光定量PCR技术系统地分析了所建质粒的重复性、特异性、均匀性、均一性和不同温度下处理不同时间的质粒标准分子的稳定性。结果表明,所构建质粒的重复性、特异性、均匀性及均一性良好,质粒溶液在低温条件(70℃、20℃和4℃)下可稳定储存6个月,且具有稳定的质粒量值,不宜高温(20℃和40℃)保存。本研究为质粒标准分子的制备、性状分析及保存环境等相关研究提供了试验依据。
- 金荣愉崔海峰俞晓平叶子弘
- 关键词：质粒稳定性均匀性
- 棉花叶片双向电泳体系的研究被引量：7
- 2012年
- 以棉花叶片为材料,比较分析了不同叶位棉花叶片总蛋白提取方法、线性固相pH梯度(Immobilized pHgradient,IPG)胶条pH值、上样量、水化上样缓冲液中还原剂和两性电解质等对电泳结果的影响。结果表明,三氯乙酸-丙酮沉淀法结合甲醇等有机溶剂洗涤纯化样品能获得纯度较高的棉花叶片蛋白样品。24 cm pH 5～8的线性IPG胶条,300μg上样量,水化上样缓冲液中用还原剂TBP(三丁基膦)代替DTT(二硫苏糖醇),两性电解质pH 3～10和pH 5～8按1∶1(V/V)的比例混合使用,并结合适宜的双向电泳参数,可获得背景清晰、重复性较好、蛋白点数目多且分辨率高的双向电泳图谱。从而建立了一套适合于棉花叶片蛋白组学分析的双向电泳技术体系。
- 韩吉春崔海峰时鹏涛祝水金叶子弘俞晓平
- 关键词：棉花叶片蛋白组学双向电泳
- 实时荧光定量PCR仪中荧光检测装置的设计被引量：3
- 2011年
- 设计了基于LED光源的积分球式聚合酶链式反应(PCR)荧光检测装置。系统采用单色LED作为光源,经过积分球的均匀辐射后,减少光源对样品的影响,再通过光电倍增管与后续电路,得到PCR循环中的实时荧光光强,这有效地减小了荧光检测装置的体积,提高了仪器的性价比。实验通过装置和iCycler-iQ5实时荧光PCR仪的检测数据进行比对,仪器偏差分别为9.44%和25.98%,发现装置具有更高的精确度,更好的稳定性和重复性。
- 程琦孔明周洋
- 关键词：聚合酶链式反应积分球光电倍增管荧光检测
