国家自然科学基金(31000029) 作品数:11 被引量:26 H指数:3 相关作者: 彭明 孙海彦 刘恩世 黎娟华 赵平娟 更多>> 相关机构: 中国热带农业科学院 海南大学 北京市科学技术情报研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 化学工程 轻工技术与工程 理学 更多>>
黑曲霉G-1125生淀粉糖化酶基因的克隆与序列分析 被引量:2 2015年 从黑曲霉Aspergillus niger G-1125克隆到了生淀粉糖化酶菌基因的DNA及c DNA序列。序列分析表明,该生淀粉糖化酶基因组DNA序列编码区长2172 bp,c DNA编码区长1923 bp,该基因含有4个内含子,共编码640个氨基酸,前18个氨基酸为信号肽序列,该氨基酸序列中共含有2个潜在的糖基化位点,软件预测出该酶的分子质量约为68 ku,等电点为p H值4.07。 孙海彦 黎娟华 刘恩世 易小平 杨景豪 尹一伊 彭明关键词:黑曲霉 生淀粉糖化酶 克隆 纤维素酶高产菌株的筛选及鉴定 被引量:7 2011年 [目的]从热带雨林土壤中分离纤维素酶高产菌,并对其进行鉴定。[方法]形态观察和18S rDNA序列分析。[结果]筛选到一株纤维素酶高产菌,其形态与里氏木霉很相似,18S rDNA序列与红褐肉座菌同源性为99.9%。[结论]筛选到的纤维素酶产生菌为里氏木霉。 孙海彦 赵平娟 黎绢华 刘恩世 彭明关键词:热带雨林 纤维素酶 里氏木霉 响应面方法优化黑曲霉产β-葡萄糖苷酶培养基成分的研究 被引量:1 2012年 通过Plackett-Burman实验确定了培养基组分中对Aspergillus niger Glu05产β-葡萄糖苷酶影响较为显著的因子是麸皮、蛋白胨和Na+;在Plackett-Burman实验基础上开展响应面实验优化培养基组分,优化后的β-葡萄糖苷酶活力达到了48.11 IU/mL,较初始酶活力32.87 IU/mL提高了46%。 孙海彦 王茜 刘恩世 彭明关键词:黑曲霉 Β-葡萄糖苷酶 培养基 Selection and Identification of a Cellulase-producing Strain 2012年 [ Objective ] This study aimed to identify a cellulase-producing strain selected from tropical rain forestry soils. [ Method ] Morphologic observation and sequence analysis of 18S rDNA were conducted. [Result] A cellulase-preducing strain with high activity was obtained, and morphology of the strain was highly similar to that of Trichoderma reesei. Results of sequence analysis show that the 18S rDNA sequence shares 99% homology with Hypocreajecorina. [ Conclusion] The isolated cellulase-producing strain belongs to Trichoderma reesei. Haiyan SUN Pingjuan ZHAO Juanhua LI Enshi LIU Ming PENG关键词:CELLULASE Aspergillus nigerF-01生淀粉糖化酶基因的克隆与序列分析 被引量:1 2015年 本研究从Aspergillus niger F-01中克隆到了生淀粉糖化酶菌基因的DNA及c DNA序列。序列分析表明,该生淀粉糖化酶基因DNA序列编码区长2 169 bp,c DNA编码区长1 920 bp,该基因含有4个内含子,共编码639个氨基酸,前18个氨基酸为信号肽序列,该氨基酸序列中共含有2个潜在的糖基化位点,软件预测出该酶的分子量约为68.36 k D,等电点为4.2。该研究为今后构建高产的生淀粉糖化酶基因工程菌奠定了基础。 孙海彦 黎娟华 刘恩世 彭明关键词:黑曲霉 生淀粉糖化酶 克隆 气相色谱法和蒸馏-酒精计法测定木薯发酵液中酒精含量的比较 被引量:7 2012年 分别采用气相色谱法和蒸馏-酒精计法测定了不同发酵时间段木薯发酵液中的酒精含量。研究结果表明,气相色谱法的测定结果更加准确、稳定,而蒸馏-酒精计法的精确度较低、误差较大。 孙海彦 刘恩世 赵平娟 黎娟华 卢诚 王文泉 彭明关键词:气相色谱法 酒精 Aspergillus niger F-01和Aspergillus niger G-1125生淀粉酶糖化酶基因启动子的克隆与比较分析 被引量:1 2015年 从生淀粉低产菌Aspergillus niger F-01和高产菌Aspergillus niger G-1125中克隆到生淀粉糖化酶的启动序列,这两个菌种生淀粉糖化酶基因启动子序列长分别是651bp和613bp,两个启动子都含有真核生物启动子的典型序列CCAAT和TATAAAT,通过序列比对发现,这两个启动子的同源性为84.4%。 孙海彦 黎娟华 刘恩世 易小平 杨景豪 彭明关键词:生淀粉糖化酶 启动子 克隆 利用黑曲霉β-葡萄糖苷酶催化香兰素葡萄糖苷水解 被引量:4 2011年 本文通过在香兰素葡萄糖苷溶液中加入黑曲霉菌种发酵制取的β-葡萄糖苷酶,进行酶促反应实验,定时取样进行高效液相分析检测,结果表明在反应过程中,溶液中香兰素葡萄糖苷的含量呈逐步下降趋势,香兰素的量呈逐步增加趋势;而在没有加β-葡萄糖苷酶的对照实验中,整个反应过程中香兰素葡萄糖苷的含量基本没有出现什么变化,在反应液中也没有检测到香兰素,这说明黑曲霉β-葡萄糖苷酶能够催化香兰素葡萄糖苷分解为香兰素的反应。 孙海彦 王茜 彭明关键词:Β-葡萄糖苷酶 香兰素 地衣芽孢杆菌耐高温α-淀粉酶基因的克隆、烟草瞬时表达及转化拟南芥的研究 被引量:1 2015年 从地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)中克隆到耐高温α-淀粉酶基因全长,构建了原核表达载体,转入大肠杆菌(Escherichia coli)中,使用IPTG于28℃诱导6小时后,通过SDS-PAGE检测到目的蛋白,分子量约为55 kDa,并通过酶活力检测实验证明该蛋白具有耐高温α-淀粉酶活性。同时构建了该基因融合GFP的植物表达载体,通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导瞬时转化烟草(Nicotiana tabacun)下表皮细胞并在荧光显微镜下观察,发现在烟草下表皮细胞的细胞质和液泡中均有绿色荧光。使用I_2-KI溶液对乙醇脱色后的烟草叶片进行染色,显色反应表明在烟草中表达的耐高温α-淀粉酶具有酶活性。最后,采用农杆菌介导的花蕾浸泡法将重组载体转化到拟南芥(Arabidopsis thaliana)中,筛选到稳定遗传的耐高温α-淀粉酶基因的拟南芥纯合子。研究结果为后期开展表达耐高温α-淀粉酶的转基因植物的相关研究奠定了实验基础。 李潇 孙海彦 阮孟斌 王霈虹 彭明关键词:地衣芽孢杆菌 拟南芥 一株生淀粉酶高产菌的选育 被引量:1 2012年 采用平板初筛、平板复筛以及摇床筛选从腐烂木薯中筛选出一株产生淀粉酶活力较强的菌种AspergillusnigerX-01,所产生淀粉酶活力为142 U/mL,对其进行紫外和亚硝基胍诱变后,得到高产突变株Aspergillus niger N T G-4酶活力达到377 U/mL,较出发菌株提高了2.65倍。 孙海彦 黎娟华 赵平娟 刘恩世 彭明关键词:黑曲霉 生淀粉酶 菌种