莆田市科技计划项目(2005S07)
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 相关作者：林丽珊陈洲许云禄薛玲黄剑钧更多>>
- 相关机构：莆田学院福建医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶分离纯化及对血管内皮细胞的抑制作用被引量：7
- 2009年
- 目的从眼镜蛇毒中分离纯化L-氨基酸氧化酶(L-a-mino acid oxidase of Naja atra venom,NAV-LAAO),观察其对血管内皮细胞是否有抑制作用。方法应用阳离子交换层析和亲和层析方法分离纯化NAV-LAAO;采用MTT法、Western blot测定caspase及细胞小管形成实验观察NAV-LAAO对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)生长和血管生成的影响。结果眼镜蛇毒粗毒经两步层析法得到的LAAO,分子量约为58 ku。NAV-LAAO抑制HUVEC细胞的生长和细胞小管形成,其抑制细胞生长的IC50为21.42 mg.L-1。与对照组相比,LAAO组caspase-3、caspase-8升高。结论应用两步层析法从眼镜蛇毒中分离出的NAV-LAAO具有剂量依赖性的抑制HUVEC细胞的生长和影响细胞小管形成的作用。
- 陈洲黄剑钧薛玲许云禄林丽珊
- 关键词：眼镜蛇毒分离纯化血管内皮细胞
- 眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶活性检测方法的优化
- 2009年
- 目的优化眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶(L-amino acid oxidase of Naja atra venom,NAV-LAO)酶活性测定方法。方法采用邻联茴香胺(ODA)、邻苯二胺(OPD)和3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)三种供氢体测定NAV-LAO的活性并比较其灵敏度和重复性。结果OPD方法测定L-氨基酸氧化酶酶活性的检测限为0.0025mg.mL-1,相对标准偏差(RSD)为2.1%。结论OPD方法测定NAV-LAO活性具有较好的灵敏度和稳定性。
- 陈洲黄剑钧薛玲许云禄林丽珊
- 关键词：眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶邻苯二胺
- 舟山眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶的分离纯化、理化及酶学性质被引量：3
- 2007年
- 目的从舟山眼镜蛇蛇毒中分离L-氨基酸氧化酶(LAO),测定其理化和酶学性质。方法应用Sephadex G-100凝胶色谱和POROS CM20离子交换色谱分离纯化LAO;Wellner和Lichtenberg法测定LAO活力;SDS-PAGE法测定相对分子质量。结果舟山眼镜蛇蛇毒经Sephadex G-100凝胶色谱和两次POROS 20离子交换色谱后,获得LAO纯品(暂定名NA-LAO)。NA-LAO在非还原和还原条件下相对分子质量均为58 kD左右;其反应最适pH为8.0,最适温度为60℃,对L-苯丙氨酸的米氏常数(Km)为3.08 mmoL/L。结论应用凝胶过滤色谱和离子交换色谱可从舟山眼镜蛇毒中分离纯化LAO。
- 林丽珊张志强陈洲许云禄
- 关键词：眼镜蛇毒液类色谱法色谱法离子交换
