湖北省科技攻关计划(2002012)
- 作品数:1 被引量:2H指数:1
- 相关作者:贺永文潘延凤刘薇郭劲松王华更多>>
- 相关机构:华中科技大学郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金:湖北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 绿色荧光蛋白/PAP-a融合表达载体的构建及其在SMMC-7721细胞中的表达被引量:2
- 2005年
- 目的构建绿色荧光蛋白/PAPa融合表达载体,并检则其在肝癌细胞SMMC7721细胞中的表达。方法采用PCR方法获得PAPa基因;将该基因片段克隆入带有绿色荧光蛋白(greenfluorescentprotein,CFP)报告基因的真核表达载体pEGPN1中,构建融合表达载体pEGFPPAPa;通过脂质体介导的方法将该载体转染到SMMC7721中,Westernblot检测PAPa的瞬时表达,荧光显微镜检测绿色荧光蛋白表达。结果pEGFPPAPa转染SMMC7721细胞后,在细胞中检测到PAPa基因片段,Westernblot可以检测到PAPa在SMMC7721细胞表达,用荧光显微镜观察到转染细胞中有绿色荧光蛋白表达。结论pEGFPPAPa在SMMC7721细胞中获得了表达,表达的融合蛋白具有PAPa和绿色光蛋白的双重活性,该载体的成功表达是研究PAPa抗肿瘤或抗病毒活民生的基础。
- 贺永文潘延凤王华刘薇郭劲松
- 关键词:绿色荧光蛋白核糖体失活蛋白