广东省医学科学技术研究基金(A2008240)
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
- 相关作者：徐建华黄宪章庄俊华张秀明黎美贤更多>>
- 相关机构：广东省中医院广东药学院更多>>
- 发文基金：广东省医学科学技术研究基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 构建survivin shRNA重组载体及靶向下调PC3细胞survivin mRNA的表达被引量：3
- 2011年
- 背景:survivin基因特异性表达于肿瘤和胚胎组织,与肿瘤细胞的分化增殖、浸润转移以及多药耐药密切相关。目的:构建靶向survivin基因的shRNA重组质粒表达载体,转染前列腺癌细胞PC3,验证该载体能否下调细胞survivin基因mRNA水平。方法:以survivin基因为靶点设计具有短发夹结构的shRNA序列,经退火成互补双链后克隆入pENTR/U6建立重组表达载体pENTR/U6-SUR;转化E.coliTOP10菌株,挑取阳性菌落进行菌落PCR和测序鉴定;将重组质粒转染前列腺癌细胞株PC3细胞,RT-PCR检测重组质粒对细胞survivin基因mRNA水平的抑制效果。结果与结论:将设计合成的shRNA序列经退火后克隆至pENTR/U6载体中,菌落PCR可扩增出目的条带,测序结果证实插入片段为所需序列;pENTR/U6-SUR重组质粒转染后PC3细胞survivin基因mRNA表达水平显著下降,且24h比48h作用更明显。成功构建了靶向survivin基因的shRNA质粒表达载体,并证实该载体显著下调了PC3细胞中survivin基因mRNA水平。
- 徐建华陈丹娜何敏黄宪章庄俊华黎美贤金小宝卢雪梅朱家勇
- 关键词：短发夹RNASURVIVIN基因前列腺癌细胞
- RNA干扰技术及其在肿瘤研究中的应用被引量：4
- 2008年
- 徐建华张秀明黄宪章庄俊华
- 关键词：RNA干扰基因沉默肿瘤治疗
