国家重点新产品计划(2007GRC60031) 作品数:7 被引量:22 H指数:4 相关作者: 王宝琴 孙红武 王文秀 张彬彬 张艳 更多>> 相关机构: 滨州学院 第三军医大学 山东省滨州畜牧兽医研究院 更多>> 发文基金: 国家重点新产品计划 博士科研启动基金 山东省高等学校科技计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 轻工技术与工程 生物学 更多>>
高纯度碱提灰树花发酵菌丝体β-葡聚糖的免疫活性研究 被引量:5 2011年 【目的】探讨高纯度碱提灰树花菌株GF-932发酵菌丝体β-葡聚糖的免疫活性,以期为灰树花菌的开发利用提供依据。【方法】以碱提、酶解的方法,从灰树花菌株GF-932发酵菌丝体中提取β-葡聚糖,经过超滤和QSepharose FF凝胶柱层析纯化冻干得高纯度β-葡聚糖,采用分子排阻法测定该β-葡聚糖的相对分子质量和分子质量分布宽度,以HPLC法测定其β-葡聚糖含量;根据人体口服推荐剂量每kg体质量2.5 mg/d,分别设低剂量组(12.5mg/d)、中剂量组(25.0 mg/d)、高剂量组(75.0 mg/d),对SPF小鼠连续经口灌胃纯化的β-葡聚糖30 d,以灌胃灭菌蒸馏水作对照,通过迟发型变态反应、碳粒廓清和抗体生成细胞检测试验,观测灰树花β-葡聚糖对SPF小鼠吞噬细胞的足跖肿胀度、吞噬指数、溶血空斑数及小鼠体质量和脏器指数的影响。【结果】每100 g灰树花菌丝体中可得0.89gβ-葡聚糖纯品,其相对分子质量为136.43 ku,分子质量分布宽度为1.64。经口给予SPF小鼠不同剂量的灰树花β-葡聚糖30 d后,与对照组相比,各组动物体质量均呈增长状态,但差异不显著(P>0.05)。高纯度碱提灰树花β-葡聚糖能提高SPF小鼠吞噬细胞的足跖肿胀度、吞噬指数、抗体生成细胞数和脏器指数,即能增强小鼠吞噬细胞的吞噬功能及细胞、体液和免疫器官的免疫功能。【结论】高纯度碱提灰树花β-葡聚糖能显著提高小鼠的细胞吞噬功能及特异性免疫和非特异性免疫功能。 王宝琴 徐泽平 杨传伦关键词:灰树花 菌丝体 Β-葡聚糖 免疫活性 灰树花菌丝体β-葡聚糖的制备及其免疫调节作用 对灰树花发酵菌丝体进行碱提酶解得到灰树花β-葡聚糖,经过Sepharose凝胶柱层析纯化冻干得高纯度β-葡聚糖。采用分子排阻法测定该β-葡聚糖的相对分子量和分子量分布宽度,以HPLC法测定其β-葡聚糖含量。通过巨噬细胞吞... 王宝琴 徐泽平 王文秀关键词:灰树花 菌丝体 Β-葡聚糖 免疫调节 小鼠 灰树花β-葡聚糖体外抗Ⅰ型单纯疱疹病毒的试验 被引量:5 2012年 本研究通过观察细胞病变效应对其细胞毒性、病毒灭活、吸附和增殖等进行体外抗病毒研究,从而研究其抗病毒效应。结果显示,β-葡聚糖对Ⅰ型单纯疱疹病毒在Vero E6细胞上的增殖有明显的抑制作用,测定其IC50为5.18mg/mL,TI为34.1。结果表明,灰树花β-葡聚糖能明显抑制Ⅰ型单纯疱疹病毒引起的CPE效应,具有较好的抗Ⅰ型单纯疱疹病毒的作用。 王文秀 孙红武 徐泽平关键词:灰树花 Β-葡聚糖 抗病毒 分子排阻色谱法测定灰树花菌丝体β-葡聚糖的相对分子质量及其分布 2011年 采用分子排阻色谱法,利用3台不同的液相色谱仪及相应GPC软件测定并计算β-葡聚糖受试物的相对分子质量及其分布。选择的色谱条件为SB-804HQ凝胶色谱柱(7.8 mm×300mm),流动相为0.2g·L^(-1)叠氮化钠溶液,流量0.5mL·min^(-1),柱温35℃,进样量25μL,2410示差折光检测器(RI),以系列标准葡聚糖Shodex STANDARD P-82为相对分子质量标准品。灰树花GF-932发酵菌丝体β-葡聚糖的重均相对分子质量(M_r)在134 195~251053amu范围内,相对分子质量分布宽度(M_r/M_n)在1.64~2.61之间。受试物灰树花菌丝体β-葡聚糖是具有一定分子质量分布范围的高纯度的聚合物。 徐泽平 王宝琴 苏亚平关键词:相对分子质量 相对分子质量分布 Β-葡聚糖 灰树花 菌丝体 灰树花β-葡聚糖的镇痛抗炎作用 被引量:4 2009年 初步探讨灰树花β-葡聚糖的抗炎和镇痛作用。通过小鼠热板舔足反应和小鼠扭体反应,观察灰树花β-葡聚糖的镇痛作用;通过二甲苯诱导小鼠耳肿胀试验和松节油诱导大鼠气囊肉芽增生模型,观察灰树花β-葡聚糖的抗炎作用。肌肉注射4.0mg·kg-1灰树花β-葡聚糖,可显著减少冰醋酸引起的小鼠扭体反应次数和抑制二甲苯诱导的小鼠耳肿胀,肌肉注射3.2mg·kg-1灰树花β-葡聚糖,就可明显抑制松节油诱导的大鼠气囊肉芽肿增生。研究结果初步表明,灰树花β-葡聚糖对实验动物急性、慢性炎症均有明显的抗炎作用;并且对冰醋酸引起化学刺激引起的疼痛反应有明显镇痛作用。 张彬彬 徐泽平 王宝琴 孙红武 张艳关键词:灰树花 多糖 Β-葡聚糖 抗炎 镇痛 灰树花蛋白聚糖的提取、分离及氨基酸组成分析 被引量:4 2011年 目的:研究灰树花(Grifola frondosa)蛋白聚糖的提取与分离方法及氨基酸组成。方法:采用碱提法提取蛋白聚糖,QSepharose FF离子交换层析进行纯化,SDS-PAGE电泳分离蛋白聚糖及结合蛋白,高效液相色谱法鉴定蛋白聚糖的纯度及分子量,并测定18种氨基酸的含量。结果:分离出蛋白聚糖GFPⅠ、GFPⅡ和GFPⅢ,糖含量分别为:43.69%、40.88%、28.33%,蛋白含量分别为:40.42%、34.65%、51.19%。其中GFPⅢ为均一成分,纯度93.61%,重均相对分子量(Mr)150kDa,GFPⅢ结合蛋白分子量约为33.0kDa,为单一谱带。氨基酸组成分析结果显示:GFPⅢ的氨基酸总和达到66.60g/100g,其中8种必需氨基酸总量为26.14g/100g,4种呈味氨基酸总量为25.43g/100g,Asp、Glu、Leu、Ala和Lys含量较高。结论:分离出的蛋白聚糖为结构均一成分,纯度较高,可用于质量研究和生物学研究。 虞凤慧 徐泽平 杨传伦 张心青 王秀芝 黄宝生 周传兵关键词:灰树花 蛋白聚糖 分离纯化 氨基酸组成分析 灰树花菌丝体β-葡聚糖的制备及其免疫调节作用 对灰树花发酵菌丝体进行碱提酶解得到灰树花β-葡聚糖,经过Sepharose凝胶柱层析纯化冻干得高纯度β-葡聚糖。采用分子排阻法测定该β-葡聚糖的相对分子量和分子量分布宽度,以HPLC法测定其β-葡聚糖含量。通过巨噬细胞吞... 王宝琴 徐泽平 王文秀关键词:灰树花 菌丝体 Β-葡聚糖 免疫调节 小鼠 文献传递 灰树花菌丝体β-葡聚糖的毒理学实验 被引量:5 2010年 目的:对灰树花菌株GF-932发酵菌丝体β-葡聚糖的食用安全性进行初步研究及评价。方法:采用最大限量法进行急性毒性实验;通过微生物回复突变实验(Ames实验)和小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验考察其致突变性;通过小鼠精原细胞染色体畸变实验和小鼠精子畸形实验考察其生殖毒性;通过大鼠30d喂养实验进行体质量、进食量、血液和生化等指标测定。结果:灰树花菌丝体β-葡聚糖小鼠急性毒性实验LD50大于20g/kgbw;灰树花菌丝体β-葡聚糖对鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型菌株的回复突变实验结果为阴性;无致小鼠骨髓嗜多染红细胞微核作用,无致小鼠精原细胞染色体畸变作用,也无致小鼠精子畸形作用;大鼠30d喂养实验期内,与对照组相比,体质量、食物利用率、血常规、血液生化、脏器系数等各项指标均无显著差异(P>0.05),各实验组大鼠生长发育良好。结论:灰树花菌株GF-932发酵菌丝体β-葡聚糖属实际无毒物质,无遗传毒性作用,对动物的生长发育无不良影响。 王宝琴 徐泽平 杨传伦关键词:灰树花 Β-葡聚糖 急性毒性实验 遗传毒性 不同通气方式对灰树花液态深层发酵的影响 被引量:2 2010年 在气升式搅拌的基础上,对发酵设备进行改造,安装机械式搅拌以增大溶氧从而提高产量。对比分析研究安装机械搅拌前后还原糖、氨基态氮及菌丝生物量积累3项指标的变化,确定机械搅拌的应用在发酵的前期(24h内)对该指标没有影响,但在发酵后期能明显加速还原糖、氨基态氮的消耗,加快菌丝生物量的积累,从而缩短发酵周期达24h,但对总的发酵菌丝得率没有影响。 王宝琴 徐泽平 杨传伦关键词:灰树花 液态发酵 机械搅拌