国家高技术研究发展计划(2014AA021703)
- 作品数：22 被引量：51H指数：4
- 相关作者：陈可泉黄和纪晓俊陈祥松任路静更多>>
- 相关机构：南京工业大学嘉必优生物工程(武汉)有限公司中国科学院等离子体物理研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学化学工程理学更多>>
- 液相色谱-串联质谱法测定ARA&DHA油脂中的壬基酚被引量：2
- 2016年
- 采用将内标溶于油脂中的方法对样品前处理,冷冻高速离心去除油脂及杂质干扰,应用高效液相色谱柱进行分离,采用电喷雾(ESI),以负离子检测方式进行质谱分析,同位素内标法定量,建立了液相色谱-质谱(LC-MS-MS)法检测ARA&DHA油脂中壬基酚(NP)含量的方法。实验结果表明,壬基酚质量浓度在5μg/kg^500μg/kg范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系,相关系数R^2=0.9998,检出限为0.3μg/kg。在3个添加水平下,样品的加标回收率为96.9%~105.2%,相对标准偏差(RSD)在2.9%~7.3%之间(n=6)。该方法的建立为ARA&DHA油脂中壬基酚的检测提供了一种前处理简便、选择性好、灵敏度高的检测方法。
- 李翔宇舒敏肖敏柴莎莎汪志明
- 关键词：壬基酚液相色谱-质谱
- LC-MS-MS法测定包装材料中壬基酚含量及其迁移量被引量：10
- 2016年
- 采用冷冻高速离心去除油脂及杂质干扰的样品前处理方式,应用高效液相色谱柱进行分离,采用电喷雾（ESI）,以负离子检测模式进行质谱分析,同位素内标法定量,建立了液相色谱-质谱（LC-MSMS）法检测ARA＆DHA产品及包装材料壬基酚（NP）的含量检测分析方法。实验结果表明,壬基酚质量浓度在5~500μg/kg范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系,相关系数R2=0.9998,检出限为0.3μg/kg,定量限为1.0μg/kg。ARA＆DHA的微胶囊样品、油脂样品及包装袋三种不同样品的壬基酚不同添加量加标回收率在93.2%~102.9%之间,相对标准偏差（RSD）在2.2%~7.0%之间（n=6）。该方法前处理简便、选择性好、灵敏度高,运用此方法同时研究了包装袋中的壬基酚在ARA＆DHA油脂及微胶囊样品中的迁移量,结果表明,壬基酚含量高的包装袋存在显著的壬基酚迁移现象,故需对包装袋的壬基酚进行严格控制。
- 李翔宇舒敏陆姝欢柴莎莎肖敏汪志明
- 关键词：壬基酚液相色谱-质谱
- 大气压化学电离源-质谱法分析花生四烯酸油脂成分被引量：1
- 2016年
- 采用大气压化学电离源-质谱法（APCI-MS）对花生四烯酸（ARA）油脂成分进行定性分析。结果表明：在APCI正离子模式,高压放电针电流8μA,样品锥孔电压5 V,离子源温度130℃,APCI加热器温度500℃,脱溶剂气流量300 L/h,锥孔气流量100 L/h,质量扫描范围（m/z）100~1 000的质谱条件下,分析得出ARA油脂中含有167种甘油酯,其中有10种甘油一酯、55种甘油二酯及102种甘油三酯。此方法简单、快捷,不仅适用于油脂中的饱和脂肪酸甘油酯的定性分析,还可以用于不饱和脂肪酸甘油酯的定性分析。
- 陆姝欢余超柴莎莎汪志明李翔宇
- 大肠杆菌产L-苯丙氨酸发酵调控及代谢通量分析被引量：2
- 2015年
- 考察了外源添加中间代谢产物、维生素B1和硫酸镁对大肠杆菌发酵产L-苯丙氨酸的影响,结果表明,添加1g/L柠檬酸三钠、1g/Lα-酮戊二酸、150mg/L维生素B1及3g/L硫酸镁均对L-苯丙氨酸的合成有利。根据构建的大肠杆菌合成L-苯丙氨酸的生化反应网络,利用代谢通量分析其原因。结果表明,这些物质的添加均可以调节G6P和PEP节点处的代谢通量分布,为L-苯丙氨酸的合成提供更多的前体物质赤藓糖四磷酸(E4P)、磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)和还原力NADPH。通过补料分批发酵实验得出,优化后菌体对总葡萄糖的消耗提高了24.49%,菌体终浓度提高了23.50%,L-苯丙氨酸的终浓度提高了62.87%,L-苯丙氨酸的收率提高了30.88%,乙酸的合成降低了56.51%。
- 袁佩佩曹伟佳王震张博文陈可泉李艳欧阳平凯
- 关键词：中间代谢产物维生素B1硫酸镁L-苯丙氨酸代谢通量分析
- 利用大肠杆菌全细胞催化赖氨酸发酵液生产1,5-戊二胺被引量：4
- 2017年
- 1,5-戊二胺是一种具有生物活性的生物胺。赖氨酸脱羧酶可以催化L-赖氨酸生产1,5-戊二胺。为了减少生产成本,本文利用大肠杆菌AST1以赖氨酸发酵液作为底物进行全细胞催化生产1,5-戊二胺。研究转化p H、菌体浓度、转化温度、磷酸吡哆醛(PLP)添加量以及不同酸种类对转化的影响,并对菌体的重复利用性进行了研究。在最优条件下:p H6.8、转化温度37℃、PLP添加量0.1mmol/L、菌体浓度(DCW)2.5g/L,用乙酸来调节转化过程p H,可以转化含有赖氨酸123.8g/L的发酵液,得到含有86.18g/L戊二胺的转化液,转化率可达到99.61%。并且菌体在赖氨酸发酵液中重复利用5次的情况下转化率可以达到50%以上,重复利用性明显比在赖氨酸溶液中转化时强,这极大程度地节约了生产成本,为1,5-戊二胺连续工业化生产打下了基础。
- 齐雁斌马伟超陈可泉
- GC-MS同时测定多不饱和脂肪酸微胶囊中氯丙醇酯和缩水甘油酯的含量被引量：1
- 2017年
- 建立了检测多不饱和脂肪酸微胶囊中氯丙醇酯和缩水甘油酯的同位素稀释气相色谱-质谱(GCMS)法。首先使用石油醚、乙醇等对微胶囊中的油脂进行多次的萃取,萃取所得的油脂经四氢呋喃,酸性溴化钠、正庚烷脱脂净化以及苯基硼酸的衍生化后,再使用正庚烷萃取衍生物两次,萃取液经氮气吹干,复溶、再过膜进样,最后使用内标法定量,文中所测氯丙醇酯和缩水甘油酯的含量,分别以氯丙醇和缩水甘油计。结果表明:3-MCPD标曲的相关系数为0.999,检出限为0.05mg/kg,线性范围:0.11~16.5μg/m L;2-MCPD标曲的相关系数为0.999,检出限为0.05mg/kg,线性范围:0.110~16.995μg/m L;缩水甘油标曲的相关系数为0.999,检出限0.03mg/kg,线性范围:0.055~3.3μg/m L。样品的加标回收率均在93.5%~115.2%,相对标准偏差(RSD)在3.0%~5.7%之间(n=6),说明该方法准确可靠,可用于多不饱和脂肪酸微胶囊中氯丙醇酯和缩水甘油酯的分析测定。
- 肖敏程思舒敏柴莎莎陆姝欢李翔宇
- 关键词：氯丙醇缩水甘油气相色谱-质谱联用多不饱和脂肪酸
- 微生物油脂中花生四烯酸含量的准确快速测定被引量：1
- 2014年
- 建立了快速、准确测定微生物油脂中花生四烯酸（ ARA）含量的气相色谱检测方法。选用DB 23毛细管色谱柱，设置合适的载气压力，采用FID检测器，对ARA含量进行了定量分析。测定结果表明：油脂中各脂肪酸组分可有效分离，分析时间仅需 min，ARA的回收率为.146％～100.634％，相对标准偏差为.175％。
- 颜佳铖纪晓俊聂志奎邓中涛任路静黄和
- 关键词：气相色谱分析微生物油脂
- 高山被孢霉高产ARA的原生质体融合子筛选被引量：3
- 2017年
- 利用原生质体融合技术,对两株单一优良性状差异显著的高山被孢霉菌株F24和G12进行原生质体融合,再采用双灭活或流式细胞分选法筛选优良性状相结合的高产菌株,对双亲菌株原生质体的制备、融合和再生的相关条件进行了研究,并对双灭活和流式细胞分选的具体方法进行了研究.经研究发现,采用培养16 h的高山被孢霉菌丝于混合酶液(蜗牛酶15.0 mg·m L^(-1)、纤维素酶6.0 mg·m L^(-1)、溶菌酶0.5 mg·m L^(-1)和几丁质酶0.2 mg·m L^(-1))中30℃酶解4 h为原生质体制备的最佳条件.并探究得出两种融合子筛选方法的最佳方案,成功筛选出融合子,进一步再生培养验证ARA产量,最终挑选出一株ARA产量达6.32 g·L^(-1)的高产菌株.以前尚未发现此方法在高山被孢霉上的应用,为高山被孢霉育种提供了一种有效的手段.
- 潘淼孙立洁陈祥松袁丽霞吴金勇姚建铭
- 关键词：高山被孢霉花生四烯酸原生质体融合流式细胞
- 气相色谱-质谱法测定微胶囊粉剂中18种邻苯二甲酸酯被引量：3
- 2017年
- 建立了二十二碳六烯酸(DHA)和二十碳四烯酸(ARA)微胶囊粉剂中18种邻苯二甲酸酯类塑化剂的分析方法。考察了不同溶剂和不同净化方式,对前处理的条件进行了优化,最终前处理方法为选用v(乙酸乙酯)∶v(环己烷)=1∶1提取两次,离心后取上清氮吹干,甲醇复溶后冷冻1h,再冷冻离心除杂质。16种邻苯二甲酸酯的方法线性范围为0.5~10 mg/L,邻苯二甲酸二异壬酯(DINP),邻苯二甲酸二异癸酯(DIDP)线性范围为5~100 mg/L,相关系数均大于0.998,加标样品的平均回收率为69.4%~112.6%,RSD(n=6)为1.3%~8.4%。该方法前处理过程简单、溶剂用量小、满足检测需要,可用于不同种类微胶囊粉剂中邻苯二甲酸酯类增塑剂的测定。
- 陆姝欢柴莎莎程思肖敏周强杨刚汪锋汪志明李翔宇
- 关键词：二十二碳六烯酸塑化剂气相色谱-质谱
- 高山被孢霉遗传操作系统的构建与应用
- 2016年
- 高山被孢霉是一种重要的产油丝状真菌,其油脂积累量高达细胞干重的50%,其中具有重要生理活性的多不饱和脂肪酸含量较高且种类丰富。近年来,针对高山被孢霉遗传操作系统建立的分子生物学研究进展迅速,这为进一步提高其多不饱和脂肪酸合成水平奠定了基础。对高山被孢霉遗传操作系统的最新应用进展进行了综述,包括高山被孢霉的转化方法、筛选标记的种类、各种方法的优缺点及遗传操作系统的应用。
- 曾斯雨施天穹石焜任路静黄和纪晓俊
- 关键词：高山被孢霉遗传操作系统多不饱和脂肪酸
