国家自然科学基金(30371710)
- 作品数：13 被引量：160H指数：9
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- 温补肾阳药对甲状腺切除的肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组的影响被引量：12
- 2009年
- 目的:研究温补肾阳药对肾阳虚动物肝线粒体蛋白质组的影响。方法:12只SD大鼠,随机分为3组,每组4只。模型组和治疗组切除两侧甲状腺,正常组做相应的假手术,但不切除甲状腺。喂养7 d后模型组和治疗组大鼠出现拱背耸毛、大便稀溏等肾阳虚的症状。从第8天开始,治疗组每天喂饲温补肾阳药1次,给药剂量6.7 g.kg-1,其他2组喂饲等体积的生理盐水,连续6 d后,断头处死3组大鼠,分离提取其肝线粒体蛋白质,分别用荧光染料Cy3,Cy5标记,每个Cy3及Cy5标记的样品与等量Cy2标记的内标混合后在同一块凝胶中进行电泳分离,经不同光激发后扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。经DeCyder 6.5软件进行差异蛋白质组分析,并对差异蛋白质进行质谱鉴定。结果:双向电泳后,平均每块胶检测到997个蛋白质点,其中所有图谱共有的点有687个,并从中筛选到22个差异蛋白,其中热休克蛋白60、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物、氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ,ATP合成酶、乳铁传递蛋白、ATP酶质子通道蛋白、电子传递黄素蛋白和类钙离子激活中性蛋白酶12在肾阳虚状态下表达量均增加,而二氢硫辛酰胺支链酰基转移酶、脂酰辅酶A脱氢酶、鸟氨酸转氨酶和GTP结合调节蛋白在肾阳虚状态下表达量均降低。经温补肾阳药治疗后,热休克蛋白60、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物、ATP合成酶、乳铁传递蛋白、ATP酶质子通道蛋白、电子传递黄素蛋白二氢硫辛酰胺支链酰基转移酶、脂酰辅酶A脱氢酶和GTP结合调节蛋白表达量均增加,而氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ和类钙离子激活中性蛋白酶12表达量减少。结论:温补肾阳药可能通过调节物质代谢、保护线粒体膜稳定性和维护细胞内信号传导而起到治疗肾阳虚的作用。
- 卢德赵沃兴德沃立科李毅唐利华杨贞
- 关键词：蛋白质组肾阳虚温补肾阳药线粒体
- RAW264.7细胞中姜黄素抗动脉粥样硬化作用机制的蛋白质组学研究被引量：7
- 2011年
- 目的:应用凝胶内差异显示电泳技术和质谱技术研究姜黄素抗动脉粥样硬化的作用机制。方法:RAW264.7细胞和经过25μmol.L-1姜黄素处理的RAW264.7细胞蛋白质经荧光染料Cy3,Cy5标记,与等量Cy2标记的内标混合后在同一胶中进行电泳分离,经不同光激发后扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。经DeCyder6.5软件进行差异蛋白质组分析,并对差异蛋白质进行质谱鉴定。结果:ATP合成酶,MHC classⅡ,肌球蛋白轻链,细胞色素b5表达量增加,而磷酸二酯酶4D,elF-3,Hnrpf蛋白,波形蛋白,核仁磷蛋白1,Ran结合蛋白1表达量降低。结论:姜黄素抗动脉粥样硬化作用的机制十分复杂,是其增强细胞抗炎、抗氧化能力以及抑制胆固醇转运,降低细胞内胆固醇积累等因素共同作用的结果。另外,姜黄素可能通过调节细胞的分化及凋亡起到抗肿瘤的作用。
- 卢德赵林韬琦沃兴德王萍儿周云杨贞
- 关键词：姜黄素动脉粥样硬化蛋白质组RAW264.7
- 温补肾阳药对激素依赖性肾阳虚动物治疗前后肝线粒体蛋白质组影响的研究
- 正常大鼠、激素依赖性肾阳虚大鼠及温补肾阳药治疗后的肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质样品分别用荧光染料Cy2、Cy3、Cy5标记,经双向电泳后用不同光激发扫描后得到不同样品的蛋白质组图谱,经Decyder软件分析,以肾阳虚组动物与...
- 沃兴德卢德赵施孟如李毅唐利华沃立科
- 关键词：蛋白质组肾阳虚温补肾阳药线粒体能量代谢
- 肾上腺切除的肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组的研究被引量：5
- 2008年
- 卢德赵沃兴德施孟如沃立科唐利华李毅
- 关键词：肾阳虚线粒体蛋白质组能量代谢
- 温补肾阳药对丙基硫氧嘧啶引起肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组的影响被引量：31
- 2007年
- 目的:应用凝胶内差异显示电泳技术研究温补肾阳药对药物性肾阳虚动物肝线粒体蛋白质组的影响。方法:正常大鼠、通过喂饲丙基硫氧嘧啶造成肾阳虚模型大鼠和温补肾阳药治疗大鼠的肝线粒体蛋白质经荧光染料Cy2、Cy3、Cy5标记,等量混合后在同一胶中进行电泳分离,经不同光激发后扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。经DeCyder软件进行差异蛋白质组分析,筛选出16个差异蛋白质。经质谱测定及数据库比对,其中10个蛋白质得到鉴定。结果:肾阳虚时氨甲酰磷酸合成酶1、二氢硫辛酰胺支链酰基转移酶、泛醇-细胞色素C还原酶核心蛋白I、异戊酰辅酶A脱氢酶、热休克蛋白60、琥珀酰CoA合成酶、羟氨基辅酶A脱氢酶/酮脂酰辅酶乙酰辅酶A脱氢酶α亚基、鸟氨酸转氨甲酰酶、谷胱甘肽过氧化物酶表达量均增加,而鸟氨酸氨基转移酶表达量降低。应用温补肾阳药治疗后,上述蛋白质的表达量均有不同程度的纠正。结论:喂饲温补肾阳药的肾阳虚模型大鼠糖、脂类和蛋白质代谢均得以改善,可能与温补肾阳药维护线粒体膜稳定性有关。
- 卢德赵沃兴德李毅唐利华沃立科施孟如杨贞
- 关键词：蛋白质组肾阳虚温补肾阳药线粒体
- 肾上腺切除的肾阳虚大鼠肝组织蛋白质双向电泳图谱的建立与分析被引量：19
- 2005年
- 目的:建立具有高分辨率和稳定性的大鼠肝组织蛋白质组研究的双向电泳图谱,并对其进行差异蛋白质组分析。方法:正常大鼠和肾上腺切除造成的肾阳虚模型大鼠,肝组织匀浆后提取总蛋白,用Cy3或Cy5标记,每一个Cy3标记样品和一个Cy5标记样品与一个Cy2标记的内标等量混合,上样于同一胶中进行电泳分离,经不同波长单色光激发下扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。所获得的图谱用DeCyder软件进行分析。结果:在肾阳虚大鼠肝组织,有8个蛋白质表达水平显著增加,9个蛋白质表达水平显著下降。结论:分析所得的17个差异蛋白质可能与肾阳虚疾病有关。
- 唐利华卢德赵沃兴德李毅施孟如
- 关键词：肾阳虚双向电泳图谱组织蛋白质组肾上腺切除蛋白质组分析
- 甲状腺切除的肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组的研究被引量：21
- 2008年
- 目的:应用差异蛋白质组学技术研究肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组。方法:正常大鼠和甲状腺切除的肾阳虚模型大鼠的肝线粒体蛋白质经荧光染料Cy3、Cy5标记,与等量Cy2标记的内标混合后在同一胶中进行电泳分离,经不同光激发后扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。经DeCyder6.5软件进行差异蛋白质组分析,并对差异蛋白质进行质谱鉴定。结果:在肾阳虚大鼠肝线粒体中,氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ、乳铁传递蛋白、热休克蛋白60、过氧化氢酶、甲基丙二酸半醛脱氢酶、类钙激活中性蛋白酶、电子传递黄素蛋白、酯酶同工酶ES1、谷胱甘肽过氧化物、ATP合成酶和ATP酶质子通道蛋白表达量均增加,而二氢硫辛酰胺支链酰基转移酶、脂酰辅酶A脱氢酶、鸟氨酸转氨酶和鸟苷酸结合调节蛋白表达量降低。结论:肾阳虚大鼠可能因糖类和脂类物质分解代谢受抑以及细胞内信号转导异常而出现虚寒症状。
- 卢德赵沃兴德沃立科唐利华李毅杨贞
- 关键词：肾阳虚蛋白质组线粒体甲状腺
- 肾阳虚证研究的现状与思考被引量：13
- 2007年
- 从内分泌功能、免疫功能和能量代谢三个角度对目前肾阳虚证的研究状况作了分析,并提出如何应用基因组和蛋白质组技术进一步探索肾阳虚证的本质。
- 卢德赵沃兴德
- 关键词：肾阳虚证基因组蛋白质组
- 温补肾阳药对激素依赖性肾阳虚动物肝线粒体蛋白质组影响的研究被引量：14
- 2007年
- 目的利用双向凝胶内差异显示电泳技术,分析温补肾阳药对激素依赖性肾阳虚动物肝线粒体蛋白质组影响。方法正常大鼠、肾阳虚大鼠及温补肾阳药治疗大鼠肝线粒体蛋白质样品分别用荧光染料Cy2,Cy3,Cy5标记,经双向电泳后用不同波长光激发扫描后得到不同样品的蛋白质组图谱,经DeCyder软件分析,以肾阳虚动物与正常动物肝线粒体蛋白质相差1·2倍以上的蛋白作为差异蛋白,共获得16个差异蛋白质,经质谱测定和与蛋白质文库比对,其中11个蛋白质得到鉴定。结果肾阳虚动物由于肾上腺皮质功能受损,引起热休克蛋白60和70含量增加,可能起到调整处于应激状态的细胞存活、保护细胞免受损伤的作用;肾阳虚动物糖代谢和脂代谢功能降低,而蛋白质代谢和核酸代谢功能增强,表现为二氢硫辛酰胺脱氢酶和脂酰辅酶A脱氢酶活性降低,而肌氨酸脱氢酶、氨甲酰磷酸合成酶和亚硫酸氧化酶活性增加;肾阳虚动物由于三羧酸循环和脂肪酸β-氧化功能障碍,引起ATP合酶、醛脱氢酶和NADH脱氢酶活性代偿性增加,试图通过增加ATP的产量以缓解能量代谢的不足;但肾阳虚动物由于鸟氨酸氨基转移酶活性降低,导致储存能量的肌酸合成降低,使产生的ATP大部分通过热能形式消耗掉,从而导致肾阳虚的临床虚寒症状。应用温补肾阳药治疗后使热休克蛋白60更趋增加,可能加强对细胞的保护作用;温补肾阳药增加二氢硫辛酰胺脱氢酶的活性,可通过改善糖代谢和促进三羧酸循环功能使机体的能量代谢增强;温补肾阳药还可以通过增加ATP合酶和醛脱氢酶的含量,使ATP的产量增加,缓解能量代谢功能障碍。结论温补肾阳药可以通过调整线粒体内多种与能量代谢相关蛋白质表达而起到治疗肾阳虚的作用。
- 唐利华沃兴德卢德赵施孟如李毅沃立科
- 关键词：蛋白质组肾阳虚温补肾阳药线粒体能量代谢
- 绞股蓝总皂苷对THP-1源性泡沫细胞蛋白质组的影响
- 2012年
- 目的:利用蛋白质组学技术研究绞股蓝总皂苷对THP-1源性泡沫细胞蛋白质组的影响。方法:将20?g/LoxLDL与160nmol/LPMA诱导的THP-1源性巨噬细胞共孵育24h,使之形成泡沫细胞后,加入100?g/mL绞股蓝总皂苷作用24h,提取细胞内蛋白进行双向电泳,质谱鉴定差异表达的蛋白。结果:经分析鉴定,共获得差异蛋白点19个,包括甲基转移酶、肿瘤蛋白D52、波形蛋白、热休克蛋白27等。涉及细胞周期、糖代谢、脂代谢、氧化应激方面。结论:绞股蓝总皂苷可能通过调控细胞周期,增强细胞抗氧化能力,调节细胞内糖代谢、脂代谢相关蛋白等作用,降低细胞内胆固醇酯积累,从而起到抗动脉粥样硬化的作用。
- 林韬琦王萍儿卢德赵于海玉沃兴德
- 关键词：蛋白质组泡沫细胞绞股蓝总皂苷
