河南省杰出人才创新基金(084200410016)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 相关作者：王云龙孙新城李玉林更多>>
- 相关机构：郑州职业技术学院郑州大学更多>>
- 发文基金：河南省杰出人才创新基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- RNAi技术干扰人喉癌Hep-2细胞PTTG1基因的初步研究
- 2011年
- 目的:探索对人PTTG1基因mRNA序列有较高干扰效率的位点,构建对PTTG1基因的表达有较高抑制效率的重组质粒。方法:筛选、合成1对互补DNA单链,退火为双链后与双酶切后的质粒载体连接,构建了表达短发夹RNA的1种重组质粒plk0.1-puro/PTTG1。重组质粒以不同浓度转染,并于转染后不同时间收集细胞,以β-actin为内参,采用RT-PCR和Western blot技术分别检测PTTG1基因的mRNA、蛋白质的相对表达水平。结果:与空白对照组相比,6孔板中每孔转染质粒plk0.1-puro/PTTG 11000ng以上、转染超过12d时,PTTG1基因mRNA、蛋白质的相对表达水平下降70%以上。结论:重组质粒plk0.1-puro/PTTG1,在6孔细胞培养板中以1000ng/孔转染12d以上时,有效抑制了人PTTG1基因的表达,在关于PTTG1基因的研究中具有较好的应用价值。
- 王云龙孙新城徐桂超昌静峰李玉林王国强刘旺根董彩文
- 关键词：RNAISHRNA
