江苏省普通高校研究生科研创新计划项目(CX10S-024Z)
- 作品数：1 被引量：14H指数：1
- 相关作者：徐铁军王湘臻李梅更多>>
- 相关机构：徐州医学院更多>>
- 发文基金：江苏省普通高校研究生科研创新计划项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 海马神经干细胞不同传代方法的比较被引量：14
- 2011年
- 背景:体外培养神经干细胞,在悬浮培养时由于自身增殖特性会形成球,传代时将会面临如何将细胞球分离成单细胞的问题。目的:寻求理想的大鼠海马神经干细胞传代方法,以获得大量可增生的神经干细胞以供研究。方法:分离新生1dSD大鼠海马神经干细胞,原代培养至五六天时,分别用机械吹打法、胰蛋白酶、TrypLE和Accutase消化法分离神经干细胞球。之后每7d传代1次,连续传代3次。分别于每次传代后第1天和传代后第4天计数活细胞比例和细胞球数目,实验重复3次。结果与结论:神经干细胞球经3种酶消化后获得的均是单细胞;经机械吹打后既有单个细胞,也有小细胞球分布于培养液中。在酶消化法中,Accutase消化法传代后神经干细胞的活细胞比例明显高于胰蛋白酶消化(P<0.01)和TrypLE消化法(P<0.05)。同时,Accutase消化法传代后新形成的细胞球数目也较其余各组多(P<0.01)。提示在实验条件下,Accutase消化法能够较好地将神经干细胞球分离成存活率较高、能快速形成新的克隆球的单个细胞,是较为理想的神经干细胞分离传代方法。
- 李梅王湘臻徐铁军
- 关键词：神经干细胞海马细胞培养传代免疫细胞化学
