四川省重点科技攻关项目(02SG022030)
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
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- 头孢哌酮/舒巴坦复方制剂的抗菌活性及其对细菌β-内酰胺酶的稳定性
- 2003年
- 张翔雷军蔡春燕周春阳黄义山凌保东
- 关键词：头孢哌酮舒巴坦复方制剂抗菌活性Β-内酰胺酶稳定性
- 超广谱-内酰胺酶SHV-5的基因重组表达及酶活性鉴定
- 2005年
- 目的对blaSHV-5进行基因重组表达,为建立SHV类β-内酰胺酶抑制剂筛选模型研究奠定基础。方法以产blaSHV-5肺炎克雷伯菌基因组DNA为模板,自行设计一对寡核苷酸引物,通过PCR扩增获得blaSHV-5基因片断,定向克隆入质粒载体pBK-CM V构建重组质粒,对重组质粒进行酶切鉴定和DNA测序鉴定,重组质粒转化大肠埃希菌XL 1-B lue M RF′后,N itrocefin显色结合SDS-PAGE分析目的基因在大肠埃希菌中的表达及其酶活性。结果PCR扩增获得了大小约为900bp的DNA条带,定向克隆入质粒载体pBK-CM V后筛选到大小约为5.4kb的重组质粒,S acⅠ和E coRⅠ双酶切后可切下大小约900bp的插入片段,DNA测序发现插入片断的基因序列与G enB ank中肺炎克雷伯菌基因序列完全一致,重组质粒转化大肠埃希菌XL 1-B lue M RF′后可表达分子量约为31500的重组蛋白。重组菌裂解液对n itrocefin显示出较强水解活性。结论超广谱β-内酰胺酶SHV-5在大肠埃希菌XL 1-B lue M RF′中实现了基因重组表达。为进一步进行酶的纯化等相关后续研究奠定了基础。
- 谢勇恩凌保东张翔张效良李苌青
- 关键词：克隆酶活性
- 头孢哌酮舒巴坦复方制剂的抗菌活性及其对细菌β-内酰胺酶的稳定性研究被引量：1
- 2004年
- 目的观察头孢哌酮 (CPZ)和舒巴坦 (SBT)复方制剂 (1∶1)的体外抗菌活性及其对细菌 β 内酰胺酶的稳定性 ,并检测SBT对 β 内酰胺酶的抑制作用。方法用琼脂二倍稀释法测定药物的最低抑菌浓度 (MIC) ,以头孢噻吩为酶解底物 ,用紫外分光光度计测定酶对各种抗生素的水解率。结果SBT显著降低CPZ的MIC ,所试细菌的 β 内酰胺酶对头孢噻吩和头孢哌酮的平均水解率分别为 75 .1%和 4 9.1% ,加用等浓度SBT后 ,酶对头孢哌酮的平均水解率降至 8.2 % (P <0 .0 5 )。结论SBT增强CPZ抗菌作用可能与抑酶作用有关。
- 张翔雷军蔡春燕周春阳黄义山凌保东
- 关键词：头孢哌酮舒巴坦复方制剂抗菌活性
