江苏省科技支撑计划项目(BE2011327) 作品数:5 被引量:13 H指数:2 相关作者: 徐世清 司马杨虎 卓微伟 张进 陶卉 更多>> 相关机构: 苏州大学 山东农业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 江苏省科技支撑计划项目 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
鳞翅目昆虫昼夜节律的授时机制研究进展 被引量:5 2015年 鳞翅目昆虫生物钟环路的核心成员,在蛋白质分子进化和相互作用网络等方面,与哺乳类,甚至与果蝇等经典模式昆虫有较大差异。总结了昼夜节律对鳞翅目昆虫孵化与进食、生长与变态、生殖与滞育、呼叫与迁徙等生理行为的影响,以及核心钟基因Cry、Per和Tim等的研究进展,分析了鳞翅目昆虫生物钟负反馈环路与哺乳动物和果蝇的差异,介绍了鳞翅目昆虫作为温度授时的生物钟负反馈环路研究和外周生物钟分子机制研究等方面的材料优势。 陶卉 徐世清关键词:生物钟 信号转导 鳞翅目 温度与光照节律对家蚕成虫生物钟基因Cry1和Cry2表达的影响 被引量:5 2013年 为了深入研究家蚕昼夜节律授时作用机制,设置4种光制和2种温度振荡周期,调查家蚕成虫生物钟核心钟基因———隐花色素编码基因Cry1和Cry2的表达特点。采用定量PCR方法检测Cry1和Cry2在正常温度与光照环境下(25℃,LD 12 h∶12 h)的家蚕各发育阶段的表达谱,2个基因都在成虫期显著上调表达,而在卵期和5龄幼虫期只有痕迹量表达;2个基因在成虫组织的表达谱显示在头部的表达水平最高,此外Cry1在触角、Cry2在飞行肌的表达水平也相对较高。RT-PCR检测分析不同光制下成虫头部、触角和飞行肌中2个Cry基因的表达谱都呈现出振荡节律性,发现光制变化能够改变这2个基因表达的振荡相位,其中Cry1的振荡表达相位变化出现在光照来临时,并且从中枢神经所在头部组织和触角至外周组织飞行肌的响应呈现时间梯度;而Cry2基因表达产物则可能不是光制授时因子的第一信响应物质。2个Cry基因都对温度振荡节律表现出敏感性,在昼夜时长内改变温度振荡周期,Cry1的表达只是振荡相位发生改变,而Cry2的表达还出现振荡波形倒置,推测它们在生物钟环路中可能与温度信号的转换有一定关系,但作用有差异。 张达燕 梁辉 司马杨虎 徐世清关键词:家蚕 生物钟基因 隐花色素 家蚕类胰凝乳蛋白酶基因的发掘与表达特征分析 2012年 类胰凝乳蛋白酶(CTLP)是鳞翅目昆虫幼虫中肠中的主要蛋白酶。基于构建的家蚕中肠等组织差异表达基因的SSH文库,发掘和克隆了一条新的家蚕类胰凝乳蛋白酶基因Ctlp(GenBank登录号:JQ081296)。该基因定位于18号染色体nscaf2901,靠近端粒,有5个外显子和4个内含子,全长cDNA序列976 bp,ORF为840 bp,编码279个氨基酸残基,信号肽序列1~18 aa(分值0.985),1~20 aa和50~100 aa区域为2个由内到外的跨膜螺旋,推测蛋白质相对分子质量为29 780.10,pI为8.75,蛋白质功能域(保守区)和分子进化分析显示其为丝氨酸蛋白酶家族的类胰凝乳蛋白酶。家蚕Ctlp基因具有在5龄幼虫中肠特异性高表达和伴随进食量增加而上调表达的特征,同时也具有性别差异性和熟蚕期特异性上调表达的现象,暗示CTLP可能具有促进消化以外的功能。构建pET32a-ctlp重组表达载体,SDS-PAGE分析和Western blot鉴定结果显示,重组蛋白在原核表达系统中的表达量较低。 龙菲菲 席建 张进 司马杨虎 徐世清关键词:家蚕 基因克隆 表达谱 原核表达 对人工饲料摄食性不同的家蚕品种Cph2基因的表达特征分析 被引量:2 2013年 家蚕Bombyx mori不同品种对人工饲料的摄食性存在很大差异。为探讨食性差异的分子机理,本文基于对人工饲料摄食性不同的蚕品种(系)SAGE(serial analysis of gene expression)文库差异表达基因的分析,发掘了1条家蚕假定表皮蛋白(cuticular protein hypothetical)基因BmCph2。采用半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR方法,对BmCph2在不同摄食性蚕品种(系)不同发育时期的表达特征进行了研究。结果表明:BmCph2基因在家蚕幼虫眠期和起蚕期高表达,在胚胎期和幼虫将眠期几乎检测不到表达;在幼虫头部与全蚕的表达特征相似,而在中肠中表达活性很低,推测该基因表达可能与家蚕新表皮的形成有关。BmCph2在对人工饲料摄食性不同的蚕品种(系)中的表达存在较大差异,在摄食性好的高食性品种中表达量显著低于摄食性差的低食性品种;饲料和忌避剂的气味刺激及取食刺激对不同品种(系)该基因的表达有不同的影响,高食性蚕对诱导刺激比较敏感,而低食性蚕受影响较小,尤其是菁松A和菁松B的低食性品系几乎不受影响。本研究结果说明,BmCph2基因除可能参与表皮形成的同时,还与家蚕的食性有密切关系,但其具体机理有待于进一步研究。 李娟 张升祥 徐欣 张进 郭晓琪 卓微伟 周前凯 刘庆信 崔为正 徐世清关键词:家蚕 食性 人工饲料 家蚕消化管特异表达的金属羧肽酶基因发掘及功能研究 金属羧肽酶(mCPs)是家蚕等昆虫消化管中参与饲料蛋白质消化吸收的关键酶。本文利用构建的家蚕消化管SAGE表达文库的特异性表达标签Tag(AAATAAAAACTCTATTC),发掘到家蚕EST序列BY926338,进一步... 徐俊 龙菲菲 甘丽萍 司马杨虎 徐世清关键词:家蚕 文献传递 家蚕胰岛素受体类似基因挖掘及在限食模型中的表达特征 被引量:1 2012年 家蚕素是家蚕胰岛素相关肽,与其受体(IR)结合激活胰岛素信号转导(IIS)途径。利用生物信息学方法,挖掘出具有胰岛素受体类似结构域的家蚕基因Ir-lp,其ORF长2 658 bp,编码885个氨基酸残基,蛋白质分子质量100.3 kD,pI为6.93,与果蝇等昆虫的同源蛋白保守区域高度一致,NJ法分子进化分析显示家蚕IR-LP与昆虫胰岛素受体相关蛋白同源,但是家蚕Ir-lp编码蛋白缺少胰岛素受体酪氨酸激酶催化结构域,基因表达特征也与已知的家蚕Ir有显著差异。建立家蚕限食模型,调查限食后家蚕8个组织中Ir-lp与Ir表达变化的差异,探讨Ir-lp基因与IIS途径的关系,结果显示长期限食使得Ir-lp与Ir在脂肪体、性腺和表皮中上调表达,在马氏管中下调表达,其中Ir-lp的表达量变化幅度较大。综合分析,IR-LP可能在家蚕胚胎期、蛹期、蛾期等特定发育时期通过与IR竞争结合家蚕素来有效调控能量利用效率。 周炳卿 孔祥宾 卓微伟 司马杨虎 徐世清关键词:家蚕 胰岛素受体 胰岛素信号转导 基因表达