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国家科技支撑计划(2012BAD23B0504)

作品数：8 被引量：39H指数：4
相关作者：高志民彭镇华赵韩生杨丽娄永峰更多>>
相关机构：国际竹藤中心中国林业科学研究院南京林业大学更多>>
发文基金：国家科技支撑计划国际竹藤网络中心基本科研业务费专项资金项目引进国际先进农业科技计划更多>>
相关领域：农业科学更多>>

文献类型

  • 8篇中文期刊文章

领域

  • 8篇农业科学

主题

  • 5篇基因
  • 4篇毛竹
  • 3篇麻竹
  • 2篇异位表达
  • 2篇竹子
  • 2篇胁迫
  • 2篇克隆
  • 1篇蛋白基因
  • 1篇蛋白序列
  • 1篇亚细胞
  • 1篇亚细胞定位
  • 1篇叶绿
  • 1篇叶绿素
  • 1篇叶绿素荧光
  • 1篇叶绿素荧光特...
  • 1篇生物胁迫
  • 1篇糖基化
  • 1篇糖基化磷脂酰...
  • 1篇特异表达
  • 1篇特异性表达

机构

  • 8篇国际竹藤中心
  • 4篇中国林业科学...
  • 1篇南京林业大学
  • 1篇学研究院

作者

  • 4篇高志民
  • 3篇彭镇华
  • 2篇赵韩生
  • 1篇谢锦忠
  • 1篇汪玉凤
  • 1篇刘青
  • 1篇陈东亮
  • 1篇陈颖
  • 1篇娄永峰
  • 1篇杨丽

传媒

  • 3篇林业科学研究
  • 2篇林业科学
  • 2篇世界竹藤通讯
  • 1篇南京林业大学...

年份

  • 1篇2016
  • 4篇2015
  • 1篇2014
  • 2篇2013
共 8 条 记 录，以下是 1-8
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排序方式：
麻竹同源异型盒基因DlKNOX1的克隆及功能初步分析被引量：7
2014年
同源异型盒基因在决定植物的形态建成中发挥着重要作用。采用RT-PCR和RACE技术,从麻竹中分离到1个同源异型盒基因,其cDNA全长1 452 bp,编码1个330个氨基酸的蛋白,包含1个KNOX1区、1个KNOX2区、1个ELK区和1个Homeobox区,属于KNOX蛋白,该基因命名为DlKNOX1(GenBank No.KF709955)。组织表达特异性分析表明,DlKNOX1在节中的表达量最高,茎和鞘中次之,而在叶片中最低。将DlKNOX1置于35S启动子控制下,构建到载体pPZP的多克隆位点并转化拟南芥。RT-PCR分析表明,DlKNOX1已在转基因植株中表达。转基因植株表型变化明显,花期比野生型延迟,果荚着生部位明显发生变化,这意味着DlKNOX1基因可能参与麻竹形态建成的调控。
刘青汪玉凤赵韩生陈颖高志民
关键词：麻竹同源异型盒基因组织特异性表达异位表达
毛竹、麻竹光合途径类型分析被引量：9
2015年
为了研究竹子速生的特点与光合作用途径关系,以典型的散生竹毛竹(Phyllostachys edulis)和丛生竹麻竹(Dendrocalamus latiflorus)为材料,通过研究其叶片形态结构及叶绿素荧光特性来探究竹子的光合途径。石蜡切片观察显示,毛竹和麻竹叶片解剖结构均不具有典型的"花环"结构,但含有泡状细胞,明显区别于C4植物玉米(Zea mays)和高粱(Sorghum vulgare)的叶片结构,而与C3植物小麦(Triticum aestivum)和水稻(Oryza sativa)的相似。同时,叶绿素荧光参数测定结果表明,毛竹和麻竹的实际光量子效率Y(Ⅱ)平均值与C3植物水稻、小麦的相近,但显著高于C4植物玉米、高粱的Y(Ⅱ)(P<0.01);毛竹和麻竹的qN值(0.77)显著低于C4植物玉米、高粱的qN值(P<0.05),与C3植物水稻的qN值(0.76)相近。相关分析表明,C3植物水稻、小麦的Fv/Fm、Y(Ⅱ)、qN之间存在显著或者极显著正相关,而C4植物玉米、高粱的叶绿素荧光参数相关性不显著;毛竹和麻竹的Fv/Fm、Y(Ⅱ)之间存在显著正相关。由此表明,毛竹、麻竹与C3植物水稻、小麦相类似,初步确定其光合途径属于C3植物类型。
杨丽娄永峰彭镇华高志民
关键词：竹子光合途径叶绿素荧光特征
毛竹PeAP2基因及其启动子的克隆与表达初步分析被引量：3
2013年
APETALA2(AP2)基因在植物生长发育过程中发挥着重要作用。利用RT-PCR和RACE方法,从毛竹中克隆到1个AP2同源基因的全长cDNA序列,命名为PeAP2。序列分析表明:PeAP2基因全长1 750 bp,其中,5'端非编码区106bp,3'端非编码区174 bp,开放阅读框1 470 bp,编码1个489 aa的蛋白,该蛋白含有2个AP2结构域,属于AP2/EREBP家族的AP2亚家族。PeAP2蛋白与来自其它单子叶植物的AP2蛋白均有着较高同源性,其中,与二穗短柄草的AP2蛋白同源性最高,达74.85%。实时定量PCR分析显示:PeAP2基因在毛竹的根、茎、叶、鞘和节5种器官中均有表达,其中,叶片中的表达丰度最高,鞘中次之,而在根、茎、节中的表达丰度接近,均较低。利用hiTAIL-PCR方法克隆获得了PeAP2上游启动子区序列1 359 bp,分析显示其含有光、激素等多种信号应答相关的作用元件。
陈东亮彭镇华高志民
关键词：毛竹组织特异表达启动子
胁迫条件下毛竹miR164b及其靶基因PeNAC1表达研究被引量：9
2015年
MicroRNAs(miRNAs)在植物生长发育以及抗逆等过程中起着重要的调控作用。miR164作为植物特有的miRNA,其主要的靶基因是植物NAC转录因子。为揭示毛竹miR164对其靶基因的调控机制,通过茎环引物法和RT-PCR技术,从毛竹(Phyllostachys edulis)中克隆出miR164b成熟序列及其靶基因Pe NAC1。序列分析表明miR164b的靶点位于Pe NAC1编码区,RLM-5'RACE PCR产物测序结果证实切割位点位于靶点的第10-11位碱基之间。组织特异性表达分析表明,毛竹miR164b和Pe NAC1在根、茎、叶及鞘中均表达,其中miR164b在根中表达丰度最高,在茎中表达丰度最低;而Pe NAC1的表达丰度恰好与miR164b相反。实时定量PCR结果显示,Na Cl(250 mmol·L-1)、低温(4℃)和强光(1 500μmol·m-2·s-1)处理后毛竹叶片中miR164b的表达均明显下调,GA3(100μmol·L-1)处理后miR164b表达量明显上调;而在同样处理条件下,Pe NAC1的表达恰好呈现出与其完全相反的趋势。由此表明,miR164b对靶基因Pe NAC1具有表达调控作用,可能与毛竹响应非生物胁迫的抗逆过程密切相关,这为利用miRNA开展竹子抗逆分子育种提供了参考。
王丽丽赵韩生孙化雨董丽莉娄永峰高志民
关键词：毛竹MIRNANAC转录因子非生物胁迫
绿竹BoGPIAP基因克隆与异位表达研究
2015年
糖基化磷脂酰肌醇锚定蛋白(GPIAP)因其结构和功能的多样性,决定了它在各种生物学过程中都发挥着重要作用。采用同源克隆的方法从绿竹(Bambusa oldhamii)中获得一个GPIAP同源基因,命名为BoGPIAP,c DNA全长1 772 bp,其中包括1 356 bp的开放阅读框,编码一个451 aa的的蛋白。蛋白结构分析表明,该蛋白包含1个典型的GPIAP家族保守区域(47-211)和1个CCVS结构域,在N-端和C-端分别具有1个跨膜信号肽和1个GPI锚定信号肽,属于GPIAP家族。构建BoGPIAP与GFP融合的表达载体,在洋葱表皮细胞中瞬时表达,结果显示BoCOBL::GFP融合蛋白定位于细胞膜上,证明BoGPIAP基因编码的蛋白为膜蛋白。分别构建BoGPIAP的正义、反义表达载体并转化烟草(Nicotiana tabacum)。PCR检测结果表明,BoGPIAP已转入烟草。与野生型相比,转反义基因植株细弱,纤维细胞壁明显变薄;而转正义基因植株粗壮,纤维细胞壁明显变厚。表明BoGPIAP可能对竹子纤维细胞壁的发育具有调控作用。
董丽莉孙化雨赵韩生娄永峰王丽丽高志民
关键词：绿竹亚细胞定位异位表达纤维细胞
竹子组织培养技术研究进展被引量：9
2013年
总结了近10年来我国竹子组织培养技术研究进展情况。以论文和技术专利为表现载体,主要内容涉及外植体的选择与消毒、培养基配方、试管植株移植等方面所取得的研究成果;针对竹子组织培养过程中污染、褐化、玻璃化、生长衰退等问题提出了应对措施;对未来竹子组织培养研究与发展的趋势进行了展望。
高志民谢锦忠
关键词：竹类植物
毛竹4个B-box锌指蛋白序列和基因表达特征及PeBZF4的功能被引量：3
2015年
【目的】B-box锌指蛋白(BZF)在植物生长发育和应对逆境过程中发挥着重要的调控作用。强光胁迫对竹子的生长发育有着重要的影响,通过分析毛竹BZF基因编码蛋白的分子特征及组织表达模式,研究过量表达Pe BZF4转基因植株的荧光动力学参数变化,以期为揭示竹子BZF基因对强光的应答与调节机制提供参考。【方法】采用同源基因比对的方法直接从Bamboo GDB中获得毛竹BZF基因同源序列,利用专用软件和在线公共平台分析基因及其编码蛋白序列,查找各种作用元件,预测蛋白功能结构域,分析蛋白的亲水性/疏水性。采用实时定量PCR技术分析基因在不同组织中的表达情况以及强光(1 200μmol·m-2s-1)和黑暗处理后基因在叶片中的表达变化。构建Pe BZF4基因的过量表达载体,利用农杆菌介导法转化拟南芥,直接观察转基因植株表型,利用IMAGING-PAM荧光仪测定其叶绿素荧光参数。【结果】从毛竹数据库获得4条不同的BZF基因同源序列,编码4个不同的锌指蛋白,分别命名为Pe BZF1,Pe BZF2,Pe BZF3和Pe BZF4。4个基因中均具有光应答顺式作用调控元件ACE和G-box,但它们所含光应答元件却有所差异,Pe BZF1中有MNF1和Sp1,Pe BZF2中有I-box,Sp1和boxⅡ,Pe BZF3和Pe BZF4中有GT1-motif,MNF1和Sp1。4个基因所编码的蛋白都具有2个B-box结构域和CHC3H2锌指结合域,属于B-box型锌指蛋白。在根、茎、叶片和叶鞘中的表达4个基因存在着明显差异,其中Pe BZF1和Pe BZF3在叶片中的表达丰度最高,Pe BZF2和Pe BZF4在叶鞘中的表达丰度最高。强光处理后4个基因的表达均受到抑制,且随着光照时间的延长Pe BZF2和Pe BZF3的表达呈逐渐下降趋势,而Pe BZF1和Pe BZF4的表达却在光照1 h时比0.5 h时略微上调,随后迅速下降;黑暗对Pe BZF1,Pe BZF2和Pe BZF3的表达有明显抑制作用,而Pe BZF4的表达却显著上调,约是对照的3.2倍。过量表达Pe BZF4的转基因植株光系统Ⅱ�
娄永峰杨丽彭镇华赵韩生高志民
关键词：毛竹锌指蛋白基因光胁迫
麻竹DlSCL6基因amiRNA前体合成及表达载体构建
2016年
Web MicroRNA Designer(WMD3)是一个专门应用于植物人工miRNA设计和前体序列设计的专业网站,其中利用重叠PCR法合成amiRNA前体序列,涉及多个PCR和纯化回收过程,步骤繁琐,周期较长。本研究利用WMD3设计了麻竹转录因子DlSCL6基因的人工miRNA序列和其前体序列,采用改进的重叠PCR方法,快速克隆获得了该前体序列,并以改造的pCMABIA1301载体为框架,构建了该前体的植物表达载体,为进一步研究利用amiRNA调控SCL6基因的表达奠定了基础。
陈东亮孙化雨李利超赵韩生高志民
关键词：麻竹重叠PCR表达载体构建
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