国家自然科学基金(30860303)
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
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- 相关机构：广西医科大学附属肿瘤医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- WWOX基因对卵巢癌PE01细胞黏附能力的影响被引量：3
- 2009年
- 目的观察WWOX基因转染细胞对卵巢癌PE01细胞黏附能力的影响，并探讨其作用机制。方法利用已构建的WWOX转染细胞、质粒转染细胞及PE01母细胞进行黏附实验，观察不同细胞对纤粘连蛋白（Fn）介导的细胞黏附性。利用整合素仅和B介导的细胞黏附实验，筛选出与卵巢癌细胞黏附有关的整合素。利用筛选出的整合素，进行封闭卵巢癌细胞表面整合素的功能实验，流式细胞检测整合素的表达情况。结果在Fn包被的培养孔中培养2h后，WWOX转染细胞对Fn的细胞黏附性明显低于PE01母细胞和质粒转染细胞（均P〈0．01）。在质粒转染细胞中，整合素以和α3的表达明显高于WWOX转染细胞（均P〈0．05），而整合素β1、β2的表达无明显变化（P〉0．05）；封闭整合素α3后，所有转染细胞对Fn的黏附性明显降低，与非特异性抗体IgG相比，差异有统计学意义（P〈0．05），而封闭整合素以后，与非特异性抗体IgG相比，差异无统计学意义（P〉0．05）。流式细胞检测结果显示，在WWOX转染细胞中，整合素013的表达明显低于质粒转染细胞（P〈0，05）。结论WWOX基因通过调节卵巢癌细胞与细胞外基质的相互作用，降低整合素α3活性，进而降低卵巢癌细胞对Fn介导的黏附性。
- 张洁清李力宋红林PaigeAdamGabraHani
- 关键词：卵巢肿瘤WWOX基因纤粘连蛋白整合素
- WWOX基因对卵巢上皮性癌细胞黏附能力的影响被引量：4
- 2009年
- 目的探讨WWOX基因对卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞黏附能力的影响。方法采用RT-PCR技术、蛋白印迹法检测WWOX基因转染的卵巢癌PEO1细胞WWOXmRNA和蛋白的表达；采用黏附实验检测WWOX基因转染的PEO1细胞对纤连蛋白（FN）介导的黏附性。将WWOX基因的小分子RNA（siRNA）转染入具有内源性WWOX基因表达的卵巢癌A2780细胞，黏附实验检测细胞黏附性的变化。结果WWOX基因转染的PEO1细胞（H6、H7、H8细胞）均有WWOXmRNA的表达，也均有WWOX蛋白的表达。H6、H7、H8细胞在FN包被的培养孔中培养2h，其黏附性分别为0．098±0．003、0．091±0．004、0．099±0．003，较未转染的PE01细胞（0．211±0．007）明显减小，分别比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。转染WWOXsiRNA后，转染组A2780细胞在FN包被的培养孔中培养0．5h，其黏附性为0．059±0．005，明显高于空白对照组（0．029±0．003），两组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论WWOX基因能抑制卵巢癌细胞的黏附能力，WWOX基因缺失可增强卵巢癌细胞对盆腹腔黏膜的黏附，进而发生盆腹腔的种植及扩散。
- 张洁清李力宋红林Paige AdamGabra Hani
- 关键词：细胞黏附氧化还原酶类肿瘤抑制蛋白质类纤连蛋白
- WWOX基因慢病毒载体的构建及其在卵巢癌细胞中的表达被引量：1
- 2011年
- 目的:构建及鉴定WWOX基因慢病毒载体,观察WWOX基因在人卵巢癌PEO1细胞株中的表达,为进一步研究WWOX基因的作用机制及其功能奠定基础。方法:采用PCR技术从克隆质粒模板中获得全长WWOX基因,将WWOX基因亚克隆到慢病毒载体PCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP中,构建慢病毒载体表达质粒PCDH-WWOX,通过双酶切验证后,慢病毒表达质粒与慢病毒包装质粒pPACKH1-GAG,pPACKH1-REV,Pvsv-G共转染293T细胞,获得携带WWOX基因及EGFP基因的重组慢病毒Lenti WWOX,并转染靶细胞人卵巢癌PEO1细胞株。通过RT-PCR和Western Blot验证Lenti WWOX在PEO1细胞株中的表达。结果:测序结果显示成功构建重组慢病毒载体表达质粒PCDH-WWOX;表达质粒与辅助包装质粒共转染包装细胞293T后能产生慢病毒颗粒并能有效感染靶细胞PEO1,转导效率约为60%,有WWOX基因mRNA和蛋白水平的高表达。结论:本实验成功构建了携带WWOX基因慢病毒表达载体,包装成病毒后能有效感染卵巢癌PEO1细胞。
- 王桂玲张洁清林小钰宋红林李力
- 关键词：WWOX慢病毒载体卵巢癌
