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转染α1,2-岩藻糖转移酶基因对人卵巢癌细胞系RMG-1癌相关基因表达的影响被引量：10: 2008年; 背景与目的:前期研究证明转染外来α1,2-岩藻糖转移酶(α1,2-fucosyl transferase,α1,2-FT)基因后人卵巢癌细胞系RMG-1的恶性生物学行为加强。本研究的目的是探讨转染α1,2-FT基因对卵巢癌细胞系RMG-1癌相关基因表达的影响。方法:将基因表达载体pcDNA3.1-HFT-H和空载体pcDNA3.1转染至RMG-1细胞中分别生成RMG-1-H细胞和RMG-1-C细胞,利用基因芯片对这两种细胞的基因表达序列进行分析,使用GoMiner在线数据库进行信息查询。结果:与RMG-1细胞比较,RMG-1-H细胞中有88种差异性表达基因,其中60种基因表达增强,28种基因表达降低。检索其基因功能,发现在分子功能、生物学行为和细胞成分定位三个分支上,差异表达的基因参与到了诸如蛋白质结合、核苷酸结合,细胞增殖、DNA依赖性转录的调节、信号转导、蛋白氨基酸磷酸化、转录、细胞粘附等多方面。结论:转染α1,2-FT基因使卵巢癌RMG-1细胞的基因表达发生了改变。; 朱连成林蓓郝莹莹李飞飞刁斌张淑兰; 关键词：基因表达谱寡核苷酸芯片

Lewis y抗体对α1,2岩藻糖转移酶基因转染后卵巢癌细胞的体外抑制作用被引量：9: 2008年; 目的:探讨Lewis y单克隆抗体(mAb)对α1,2岩藻糖转移酶基因转染后高表达Lewis y抗原的卵巢癌细胞系RMG-I-H的体外增殖能力、黏附力以及侵袭力的抑制作用。方法:通过体外细胞增殖实验、细胞黏附实验、细胞体外侵袭实验,以羊抗人IgG抗体处理组或无抗体处理组为对照,检测Lewis y mAb处理前后RMG-I-H细胞增殖能力、黏附力及侵袭力的变化。结果:细胞增殖力与黏附力测定结果表明,实验组与对照组之间有统计学意义(P<0.05),且与对照组相比,第2~7天的生长抑制率分别为5.62%、19.75%、34.96%、46.51%、49.78%和33.33%。不同培养时间(15、30、60min)的黏附抑制率分别为47.59%、58.64%和13.85%。体外细胞侵袭实验显示不同浓度Lewisy抗体处理组与对照组比较均无统计学意义(P>0.05)。结论:抗Lewis y mAb能明显抑制体外RMG-I-H细胞的生长及增殖能力、降低体外培养的RMG-I-H细胞的黏附性,Lewis y抗原与卵巢癌细胞增殖、黏附的生物学行为有关,Lewis y抗体在肿瘤的治疗中显示出潜在的应用价值。; 李飞飞林蓓郝莹莹刘娟娟张帆张淑兰; 关键词：LEWIS 卵巢癌

Le^y抗原与肿瘤诊治过程中作用的研究进展: 2008年; Ley抗原是某些糖蛋白和糖脂的末端寡糖,为双岩藻糖寡糖。Ley存在于上皮组织中,包括卵巢、胸腺、肺、胃及结肠等,当这些组织发生癌变时,60%～90%出现Ley表达明显增高,且增高的患者预后不佳。目前研究认为Ley是刺激细胞凋亡的促进因素,并且Ley单克隆抗体在体内、体外及临床试验中均显示出抗肿瘤作用,由于其对肿瘤细胞具有高选择性,良好的免疫耐受性及较长的半衰期,使其成为备受关注的肿瘤靶向治疗药物。近年来,美国纽约的Memorial Sloan-Kettering癌症中心用Ley抗原与软体动物提取的血蓝素KLH及免疫佐剂QS-21合成肿瘤免疫疫苗,在患者体内主动诱发产生了Ley抗原抗体,Ley在肿瘤主动免疫的成功应用,为肿瘤的防止带来光辉的前景。; 刁斌林蓓; 关键词：肿瘤

α1,2-岩藻糖转移酶基因转染增加卵巢癌细胞系RMG-Ⅰ Lewis y抗原的表达被引量：12: 2008年; 目的将人α1,2-岩藻糖基转移酶(α1,2-FT)基因转染卵巢癌细胞系RMG-Ⅰ并探讨细胞表面Lewisy及其他相关糖脂抗原的变化。方法采用PCR方法克隆人α1,2-FT基因编码区HFUT-H,构建表达载体pcDNA3.1(-)-HFUT-H,利用磷酸钙法将其转染入卵巢癌细胞系RMG-Ⅰ,建立α1,2-FT基因稳定高表达细胞株RMG-Ⅰ-H。通过酶活性测定证明转染前后细胞系α1,2-FT活性的改变,采用薄层层析、薄层层析免疫染色方法测定转染前后细胞脂质及糖脂,特别是Ⅱ型寡糖的变化。结果基因转染后细胞RMG-Ⅰ-H中H-1抗原及Lewisy抗原显著增加,特别是Lewisy抗原为转染前的20倍;而Ⅰ型糖链Lewisb显著减少。转染前后细胞膜上的主要脂质成分胆固醇和磷脂质的含量没有变化,且中性糖脂质也没有明显变化。结论α1,2-FT基因转染增加α1,2-FT活性的同时,增加卵巢癌细胞系RMG-Ⅰ Lewisy抗原的表达;RMG-Ⅰ Lewisy高表达细胞系的建立为研究Lewisy抗原与卵巢癌生物学行为提供了细胞模型。; 林蓓郝莹莹王冬冬朱连成张淑兰齐藤真木子岩森正男; 关键词：基因转染

α1，2-岩藻糖转移酶基因转染对卵巢癌细胞生物学行为的影响被引量：16: 2008年; 为探讨α1,2-岩藻糖转移酶(α1,2-fucosvltransfemse,α1,2-FT)基因转染对卵巢癌细胞RMG-(?)生物学特性的影响,利用PCR方法克隆人α1,2-FT基因的编码区HFUT-H,构建表达载体pcDNA3.1-HFUT-H,利用磷酸钙法将其转染入卵巢癌细胞系RMG-(?),建立α1,2-FT基因稳定高表达细胞株RMG-I-H。采用RT-PCR及α1,2-FT活性测定检测转染前后细胞系α1.2-FT基因表达及α1,2-FT活性的变化,利用免疫细胞化学方法测定细胞表面Lewis y抗原表达变化.利用MTT法、流式细胞仪细胞增殖周期检测方法测定转染前后细胞系生物学特性的变化。分别以转染前细胞RMG-I和转染空载体细胞RMG-I-C为对照组。结果显示转染后细胞α1,2-FT mRNA表达增高,α1,2-FT活性增加20-30倍。转染后的细胞易复层生长,生长速度加快。细胞克隆边缘呈树突状延伸生长。转染后细胞RMG-I-H软琼脂克隆形成率(35%)明显高于对照组RMG-I (13%)及RMG-I-C(12%),为对照组的2.6倍。RMG-I-H细胞G_1期比例从对照组的74.14%下降到59.46%,G_2-M期和S期比例分别从对照组的2.05%和23.95%上升到7.32%和33.27%(P< 0.05)。这些结果充分说明,α1,2-FT及Lewis y抗原具有促进RMG-I细胞增殖,提高RMG-I细胞生存能力,促进肿瘤发生、发展的作用。; 郝莹莹林蓓赵越张宇华李飞飞刁斌欧阳玲张淑兰; 关键词：卵巢癌

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博士科研启动基金(2000479)

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