国家自然科学基金(30470748) 作品数:9 被引量:23 H指数:4 相关作者: 羊裔明 孟文彤 周婕 张鸽 罗书 更多>> 相关机构: 四川大学华西医院 华西医科大学 南京医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
丹参酮ⅡA对NB4诱导的人脐静脉内皮细胞促凝活性的影响 2009年 目的探寻丹参酮ⅡA(TanⅡA)对于急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞株NB4细胞诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)促凝活性(PCA)的影响。方法将TanⅡA作用24、72、120h的NB4细胞条件培养基(NB4-CM)或不同浓度TanⅡA与其对应的120hNB4-CM共同作用HUVEC,并以ATRA、DMSO和RMPI1640作为阳性、阴性和空白对照,收集HUVEC裂解液采用一期凝血法测定其PCA,采用改良发色底物法测定组织因子活性(TF:act)。结果①TanⅡA作用72、120h的NB4-CM有一定的升高内皮细胞PCA的作用,以120hNB4-CM作用最强,作用6h最明显,1.0μg/mL的TanⅡA与0.3μg/mLATRA作用相当。②5.0μg/mL的TanⅡA能明显降低其NB4-CM诱导的内皮细胞PCA,与0.3μg/mLATRA的差异无统计学意义。<5.0μg/mL浓度的TanⅡA无此作用。③TanⅡA-120h-NB4-CM和ATRA120h-NB4-CM均能升高HUVEC的TF:act,6h达峰值,且两者间无差异。TanⅡA120h-NB4-CM所诱导的HUVEC的TF:act12h轻微降低,24h回复到基础水平,而ATRA120h-NB4-CM所诱导的TF:act在6h达峰后,12h即明显下降,24h亦降至基础水平。④加入1.0μg/mLTanⅡA后,内皮细胞TF活性在各时间点与未加药组无明显差异,而0.3μg/mLATRA在6h可显著抑制其NB4-CM所诱导的内皮细胞TF活性升高,之后各个时间点无明显差异。结论TanⅡA在诱导NB4细胞分化过程中的条件培养基能升高人脐静脉内皮细胞PCA和TF活性,加入适当浓度的TanⅡA可降低这种作用;这些作用与ATRA作用相当。 周婕 羊裔明 孟文彤 周静关键词:急性早幼粒细胞白血病 人脐静脉内皮细胞 促凝活性 NB4细胞 转录因子C/EBPs家族在髓系细胞分化中的作用 2009年 CCAAT/增强子结合蛋白(CCAAT/enhancer binding proteins,C/EBPs)是一转录因子家族,在细胞增殖和分化的控制、代谢、造血、脂肪形成、免疫和炎症反应过程及多种疾病发生中发挥重要作用,特别是在髓细胞增殖、分化和成熟的过程中发挥关键的作用。C/EBPα在早期髓细胞向粒细胞分化过程中扮演着一个关键性角色,C/EBPβ能促使未成熟细胞向粒细胞分化,C/EBPε在后期粒细胞分化过程中具有重要作用。本文就转录因子C/EBPs家族在髓系细胞分化中的作用作一综述。 伍学强 羊裔明关键词:转录因子 CCAAT/增强子结合蛋白 髓细胞 分化 丹参酮ⅡA成功治疗一例ATRA和ATO维持治疗复发的APL 被引量:6 2010年 目的观察丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA,TanⅡA)治疗耐全反式维甲酸(ATRA)和亚砷酸(ATO)的急性早幼粒细胞白血病(APL)的疗效。方法给1例经ATRA和ATO诱导和维持治疗复发的APL患者静脉滴注TanⅡA 80 mg/d,直至缓解,并定期检查患者血象和骨髓象,记录该药相关的不良反应。结果该例经ATRA与ATO诱导缓解、化疗巩固,并用ATRA、ATO、6-巯基嘌呤(6-MP)和甲氨蝶呤(MTX)维持治疗1年而复发的APL患者,先经ATRA与ATO 20 d再诱导无效并致头痛,改用TanⅡA 80 mg/d静脉滴注54 d达血液学完全缓解,且未见明显不良反应。结论 TanⅡA治疗耐ATRA和ATO的APL有效,为耐ATRA和ATO的APL的治疗提示了新的治疗途径。 杨雷 龚玉萍 羊裔明 罗书关键词:全反式维甲酸 急性早幼粒细胞白血病 丹参酮ⅡA治疗耐全反式维甲酸的急性早幼粒细胞白血病1例报道 被引量:5 2006年 报道1例耐全反式维甲酸(ATRA)的急性早幼粒细胞白血病患者采用丹参酮ⅡA治疗后缓解的病例。患者,男,30岁。无诱因觉头昏、乏力半月,左足拇指刺伤后出血不止伴发热7d,当地医院抗感染热退,但余症不减而入院诊治。体检贫血貌,巩膜无黄染;双下肢皮肤散在出血点与紫癜。胸骨下端压痛,心肺未见异常。肝、脾、淋巴结无肿大。血常规示白细胞计数(WBC)2.3×109/L,Hb60g/L,血小板计数34×109/L,原幼细胞0.85;骨髓增生极度活跃,其中早幼粒细胞0.89,过氧化物酶染色强阳性;APTT和PT均延长,FDP和D-二聚体阳性。诊断为急性早幼粒细胞白血病(APL)伴DIC。ATRA20mgtid治疗12周及分别20mgbid和10mgbid各1周(共14周)未缓解,改为丹参酮ⅡA30mgbid治疗,8周后外周血恢复正常,治疗12周骨髓恢复正常,达到完全缓解(CR)。用丹参酮A维持治疗3月余复发,后经高三尖杉酯碱和阿糖胞苷(HA)诱导治疗再次CR。3年后第二次复发后死于颅内出血。丹参酮ⅡA治疗耐ATRA的APL有效,未见不良反应;但CR后仅用其维持治疗仍可能复发。 羊裔明 刘霆关键词:全反式维甲酸 急性早幼粒细胞白血病 丹参酮ⅡA对NB4所诱导的ECV304细胞促凝活性影响的机制探讨 被引量:1 2009年 目的:研究丹参酮ⅡA(TanⅡA)对急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞株NB4细胞诱导的血管内皮细胞株(ECV304)促凝活性(PCA)的影响,并对其机制作初步探讨。方法:(1)分别用1.0μg/mL TanⅡA、0.3μg/mLATRA、0.01%DMSO、PRMI1640处理NB4细胞24、48和72h,取其上清液作为条件培养基(hNB4-CM)。将这些CM分别与ECV304细胞在37oC共同孵育0、4、8和12h,用反复冻融法制备ECV304细胞裂解液,采用一期凝血法测定其PCA;采用ELISA法测定条件培养基中的TNF-α。(2)ECV304细胞与1.0μg/mL TanⅡA及TanⅡA 72h-NB4-CM在37oC共同分别孵育6、12、24和48h,并以ATRA和DMSO分别作为阳性和阴性对照,用上述相同方法测定ECV304细胞裂解液的PCA。结果:(1)1.0μg/mL TanⅡA可以诱导NB4细胞分化,其作用NB4细胞的培养基有一定的升高ECV304细胞PCA的作用,该作用在孵育4h时达高峰,之后ECV304细胞PCA逐渐下降。与0.3μg/mL ATRA的作用无统计学差异(P>0.05)。(2)1.0μg/mL的TanⅡA对TanⅡA-72h-NB4-CM促ECV304细胞PCA有抑制作用,其强度随作用时间增加而增加,与1.0μmol/L ATRA比较,P>0.05。(3)TanⅡA作用NB4细胞的培养基中TNF-α浓度,在作用前7h内随作用时间增加而增加,与0.3μg/mL ATRA比较无差异(P>0.05)。结论:TanⅡA能诱导NB4细胞分化,后者在分化过程中释放的TNF-α可能与ECV304细胞PCA活性升高有关;TanⅡA又能抑制TanⅡA-NB4-CM增强ECV304细胞PCA的作用。 代利霞 羊裔明 孟文彤关键词:急性早幼粒细胞白血病 NB4细胞 ECV304细胞 促凝活性 丹参酮A对NB4所诱导的人ECV304细胞株促凝活性的影响 被引量:4 2006年 目的研究丹参酮A(TAN A)对急性早幼粒细胞性白血病(APL)细胞株NB4诱导的人ECV304细胞株促凝活性的影响。方法1分别用0.5ΜG/ML TAN A、0.3ΜG/ML ATRA、0.1G/L DMSO、RPMI1640处理培养NB4细胞制成条件培养基TAN A-NB4-CM,ATRA-NB4-CM、DMSO-NB4-CM以及RPMI1640-NB4-CM,再分别与ECV304细胞在37℃共同孵育0、4、8、12H,利用复钙时间测定及改良发色底物法,分别测定ECV304细胞裂解液的肿瘤促凝活性(PCA)和组织因子活力(TF:ACT)。2ECV304细胞分别与0.5ΜG/ML TAN A及TAN A-NB4-CM在37℃共同孵育4、12、24、72、120H,用上述同样方法测定ECV304细胞裂解液的PCA和TF:ACT。结果10.5ΜG/ML TAN A处理NB4细胞24、72、120H的条件培养基能使ECV304细胞PCA增强,ATRA具有相似作用(P>0.05)。20.5ΜG/ML的TAN A对0.5ΜG/ML TAN A作用NB4120H的条件培养基(TAN A-120H-NB4-CM)促ECV304细胞PCA有抑制作用,其作用强度呈时间依赖性,120H达到高峰,再增加TAN A浓度,作用强度不增加;与0.3ΜG/ML ATRA作用相似。3TAN A-120H-NB4-CM能够增加ECV304细胞TF:ACT,并随作用时间增加而增强,TAN A与ATRA作用相似(P>0.05)。40.5ΜG/ML TAN A能够抑制TAN A-120H-NB4-CM对ECV304细胞的TF:ACT,并随作用时间增加而增强,ATRA具有相似作用(P>0.05)。结论TAN A在诱导NB4细胞分化凋亡的同时,可能通过某种因子增强NB4细胞对ECV304细胞促凝活性和组织因子活力;TAN A能够有效阻止NB4细胞增强ECV304细胞的促凝活性和组织因子活力,起到保护细胞的作用。 张宏丽 羊裔明 孟文彤 邓承祺关键词:维甲酸 促凝活性 NB4细胞 ECV304细胞 丹参酮ⅡA与三氧化二砷协同诱导急性早幼粒白血病细胞凋亡的研究 被引量:8 2010年 目的研究丹参酮ⅡA(TanⅡA)与三氧化二砷(ATO)联合对急性早幼粒白血病细胞(NB4)分化以及凋亡有无协同作用。方法用TanⅡA联合ATO作用于NB4细胞。观察药物作用不同时间段的活细胞数,计算实验各时段的生长抑制率;Giemsa染色与透射电镜观察细胞形态学变化;流式细胞术Annexin V法测定细胞凋亡率,并进行细胞周期和细胞凋亡分析。结果①TanⅡA与ATO联合对NB4细胞生长有协同抑制作用,这种抑制作用随作用时间及联合ATO浓度的增加而增加。1.0μg/mL TanⅡA分别与0.125、0.25以及0.5μmol/LATO联合作用5 d对NB4细胞的生长抑制率均强于相应浓度ATO单独作用对NB4细胞的生长抑制率(P<0.01);②TanⅡA与ATO联合对诱导NB4细胞凋亡有协同作用。1.0μg/mL TanⅡA分别与0.5μmol/L和1.0μmol/L ATO联合作用NB4细胞1 d,NB4细胞的凋亡率分别比相应ATO单独用药组的促凋亡效应增强(P<0.05),TanⅡA与0.5μmol/L ATO联合的促凋亡协同效应持续3 d;③TanⅡA与ATO联合对NB4细胞增殖有协同抑制作用,使G0/G1期细胞增多,S期细胞减少。1.0μg/mL TanⅡA分别与0.125、0.25和0.5μmol/L ATO联合作用NB4细胞3 d的增殖指数(PI)均低于相应单药的PI值(P<0.05)。结论TanⅡA联合ATO对诱导NB4细胞凋亡有明显的协同作用,这种协同作用和联合使用的ATO的浓度密切相关;TanⅡA联合ATO对NB4细胞诱导分化未显示明显的协同作用。 张鸽 羊裔明 孟文彤 周婕关键词:三氧化二砷 细胞凋亡 细胞分化 NB4细胞系 丹参酮ⅡA通过诱导C/EBPβ表达促进人源NB4和MR2细胞系分化 2013年 目的探索在丹参酮ⅡA(TanⅡA)诱导NB4和MR2细胞分化过程中C/EBPβ(CAAT/enhancer-bindingproteinβ)的表达。方法用TanⅡA干预NB4和MR2细胞120 h,通过形态学和膜表面标志检测NB4和MR2细胞的分化情况明确TanⅡA对NB4和MR2细胞的分化效应;0,0.1,1和10 mg/L TanⅡA干预NB4和MR2细胞,通过RT-PCR及Western blot测定C/EBPβRNA和蛋白水平表达的变化确定C/EBPβ与TanⅡA浓度的关系;通过膜表面标志检测NB4和MR2细胞的分化情况明确TanⅡA浓度与NB4和MR2细胞分化间的关系。结果 TanⅡA能诱导NB4和MR2细胞分化(P<0.05);TanⅡA能从RNA和蛋白水平诱导C/EBPβ表达升高并与浓度成正相关(P<0.05);TanⅡA能通过非剂量依赖的模式诱导NB4和MR2细胞分化,其引起最大分化效果的浓度为1 mg/L。结论 TanⅡA能有效促进NB4和MR2细胞分化;TanⅡA通过上调C/EBPβ的表达发挥分化效应;TanⅡA最强作用浓度为1 mg/L。 张开基 王季石 李健 曹金竹 羊裔明关键词:分化 前列腺素E_2对胆管上皮癌细胞增殖的影响 被引量:3 2007年 目的:探讨前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)对胆管上皮癌细胞增殖的影响及其可能机制。方法:体外培养胆管上皮癌细胞株(HuCCT1),给予外源PGE2处理,以WST-1细胞增殖实验检测肿瘤细胞增殖率;Fluo-3/AM荧光负载胆管上皮癌细胞,激光扫描共聚焦显微镜检测细胞内钙离子浓度的变化情况;并用酶联免疫法测定细胞内环磷腺苷(cAMP)的浓度。结果:PGE2可促进胆管上皮癌细胞生长,而且可使细胞内钙离子和cAMP浓度升高。结论:PGE2影响胆管上皮癌细胞内Ca2+和cAMP浓度,可能与PGE2促进肿瘤细胞生长有关。 孙秋艳 张丽 蒋丽 冷静关键词:PGE2 CA^2+ 环磷酸腺苷