国家自然科学基金(30660060)
- 作品数：10 被引量：74H指数：6
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- 人胚肾细胞心脏钠通道电流的频率和电压依赖性阻滞及其失活
- 2009年
- 目的用人胚肾(HEK)细胞研究纯心脏钠通道电流(Nav1.5)频率、电压依赖性及快、慢钠通道失活以及利多卡因对其影响。方法用膜片钳技术,观察两次刺激脉冲间隔钠电流对频率,电压依赖性阻滞程度。通过两种不同刺激程序产生快、慢钠电流并记录其失活过程。并观察0.1 mmol/L利多卡因对钠电流的频率依赖性阻滞。结果电压钳制在-140 mV时钠电流抑制随频率刺激脉冲间隔时间缩短而阻滞加重。完全恢复正常平均值为33.2±5.77ms(n=9),当电压钳制在-90,-100 mV时,钠电流完全恢复正常延迟至1 015 ms。快钠电流失活随钳制电压降低而加重,并呈现负相关(r=-0.97,P<0.01),慢钠电流失活随钳制电压变化不甚明显。0.1 mmol/L利多卡因在-100 mV电压钳制下,导致20%Na+电流抑制,静息状态下产生轻微阻滞;且抑制随刺激频率增加而增加。结论HEK细胞Nav1.5通道电流频率依赖性阻滞恢复与刺激频率、钳制电压高低有关;快钠电流失活随钳制电压降低而加重并呈负相关;利多卡因对HEK细胞Nav1.5通道有加重频率依赖性阻滞作用且随刺激频率增加而增加。
- 葛郁芝吴志婷胡朗吉罗骏Yeh Jay Z
- 关键词：电生理学人胚肾细胞NAV1.5利多卡因钠通道
- 中药甘松挥发油对HEK细胞Na_v1.5电流电压及电导电压的影响被引量：16
- 2009年
- 目的应用膜片钳技术研究HEK细胞Nav1.5电流电压依赖性Na+电流失活与激活曲线,甘松挥发油对电流-电压关系(I-V),电导-电压关系(G-V)曲线的影响,以及对快Na+通道失活(H-I)的影响。方法应用膜片钳技术研究HEK细胞Nav1.5电压依赖性Na+电流失活曲线,I-V和H-I曲线。结果正常自然依赖性失活曲线向超极化移位,移动速度10 min内是4 mV。甘松挥发油能降低I-V曲线Na电流的峰电位,但不能改变其Na电位(ENa)从内流向外流的反转电位的方向。G-V曲线明显向超极化方面移动,Vg1/2=(-59.8±4.22)mV是对照自然失活曲线;Vg1/2=(-58.8±5.69)mV是10 PPM甘松挥发油;Vg1/2=(-68.0±4.36)mV是药物被洗脱后失活曲线(P<0.01,n=6)。在除去自然移动值后10 PPM甘松挥发油的Na电位失活作用明显。甘松挥发油应用前,应用10 PPM甘松挥发油以及药物洗脱后H-I曲线与自然失活曲线比较,校正自然失活因素后10 PPM甘松挥发油实际移动Vg1/2是(18.0±4.50)mV(P<0.01,n=5),洗脱40min后接近对照状态。结论甘松挥发油对I-V,G-V曲线有向超极化移位的影响。对快Na+通道有加速失活与抑制激活的作用,然而电压依赖性Na失活是可逆性的。这一作用奠定了甘松挥发油抗心律失常的作用机制。
- 葛郁芝吴志婷胡朗吉Yeh Jay Z
- 关键词：甘松挥发油NAV1.5膜片钳
- 中药甘松挥发油对大鼠心室肌细胞膜L型钙通道的影响被引量：33
- 2010年
- 目的研究甘松挥发油对大鼠心室肌细胞膜L型钙通道的影响,探讨甘松挥发油在离子通道水平抗心律失常的作用机制。方法用急性酶解法分离大鼠心室肌细胞,采用全细胞膜片钳记录技术,观察不同浓度的甘松挥发油对L型钙通道的影响。结果浓度为3,5,10,20,50μg/g甘松挥发油可浓度依赖性地抑制L型钙电流,在浓度为10μg/g时,给药后电流密度抑制约为(45.7±3.5)%(n=5,P<0.01),可使心肌细胞L型钙电流-电压曲线上移,但激活电位、峰电位及反转电位无改变;使激活曲线向正电位方向变化,V1/2从(-5.47±0.50)mV右移至(-2.77±0.49)mV(n=5,P<0.05);使失活曲线向负电位方向变化,V1/2从(-20.82±0.48)mV左移至(-29.44±1.03)mV(n=5,P<0.05)。结论甘松挥发油可通过浓度依赖性地抑制大鼠心肌细胞膜L型钙通道电流,使I-V曲线上移;使激活曲线右移,使失活曲线左移。
- 曹明葛郁芝罗骏王云霞张淑华吴志婷
- 关键词：膜片钳L型钙通道心室肌细胞
- NBA1/MERIT40 在3种沙棘中的适应性分化研究——兼论二代测序技术在杂种鉴定中的应用被引量：1
- 2020年
- 随着高通量测序技术的发展,从“组学”水平研究适应性进化分子机制成为进化生物学的研究热点。本研究以沙棘属的中国沙棘、肋果沙棘及二者的同倍化杂交物种棱果沙棘为材料,通过转录组测序,筛选出了受到正选择(w>1)的BRCA1-A&BRISC复合体亚基NBA1基因。生物信息学分析表明,NBA1基因在3种沙棘中编码区全长为771 bp,共编码256个氨基酸,为核定位的亲水性蛋白。中国沙棘与肋果沙棘中NBA1的氨基酸序列在218与236位存在差异,中国沙棘中靠近结合位点的218位突变为甲硫氨酸,不同于肋果沙棘及其他陆生植物中NBA1亚基VWA结构域中保守的亮氨酸,导致二者的蛋白质三级结构发生明显变化,且使中国沙棘与肋果沙棘中该蛋白结合位点的空间排布产生显著差异。综上,推测二者的NBA1亚基在结合其他亚基方面有所不同,主要导致了BRCA1-A复合体修复紫外辐射引起的DNA损伤修复功能方面出现差异,这可能与中国沙棘与肋果沙棘对不同海拔环境的适应有关。此外,Sanger测序验证了二代测序结果的准确性,证明该基因在亲本种中国沙棘与肋果沙棘中是纯合的单拷贝,在杂种棱果沙棘中以共显性的杂合方式存在。进一步分析发现第二代测序数据不适用于在个体水平鉴定杂种,但群体内多个个体的平行测序一定程度上可随机反映杂种的亲本来源。本研究为进一步揭示沙棘属植物对不同海拔的适应分子机制提供了参考数据,同时为利用转录组测序方法鉴定杂交物种提出了建议。
- 孙坤丁雪洋张辉李雪丽汪颖王娟刘本立
- 关键词：中国沙棘棱果沙棘杂种鉴定
- 甘松挥发油对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流的影响被引量：21
- 2009年
- 目的研究甘松挥发油对大鼠心室肌细胞膜瞬时外向钾电流(Transient outward potassium current,Ito)的影响,探讨甘松挥发油抗心律失常作用的离子机制。方法用急性酶解分离法获得单个大鼠心室肌细胞,采用标准的全细胞膜片钳技术记录大鼠心室肌细胞膜瞬时外向钾电流(Ito)。结果甘松挥发油可呈浓度依赖性和电压依赖性抑制Ito。在+70mV时,3μg/g,6μg/g,10μg/g和20μg/g甘松挥发油分别抑制Ito峰值电流的抑制率为(27.01±6.93)%(n=5),(51.13±9.82)%(n=5),(80.86±4.63)%(n=5)和(94.81±4.30)%(n=5)。甘松挥发油对Ito的电流密度-电压关系曲线(current density-voltage curve,I-V曲线)的影响:在+70 mV时,6μg/g甘松挥发油使Ito峰电流从(23.081±0.74)pA/pF减少到(11.232±1.47)pA/pF(n=5,P<0.05),给药后电流密度减少约50%,给药前后电流密度变化有统计学意义。甘松挥发油对Ito激活和失活曲线的影响:在甘松挥发油6μg/g灌流法给药后,激活曲线显示给药前后半数激活电压(V1/2)为:(36.063±1.792)mV vs(34.788±3.029)mV(P>0.05,n=5);斜率因子(S)为:(22.972±1.491)mV vs(30.791±2.899)mV(P<0.05,n=5)。给药前后半数激活电压变化无显著差异。失活曲线显示甘松挥发油使失活曲线明显左移,差异有显著统计学意义:给药前后半数失活电压(V1/2)为(-33.738±0.476)mV vs(-40.536±0.696)mV(n=5,P<0.01);斜率因子(S)为:(5.001±0.396)mV vs(8.420±0.620)mV(n=5,P<0.01)。结论甘松挥发油可呈浓度和电压依赖性抑制大鼠心室肌细胞Ito,使I-V曲线下移,但对激活曲线无明显影响,同时,使失活曲线明显左移,使心室肌细胞复极化减慢,这可能是其抗心律失常作用的重要机制之一。
- 胡朗吉葛郁芝罗骏杨涛张淑华吴志婷
- 关键词：甘松挥发油膜片钳技术瞬时外向钾电流心室肌细胞
- 甘松挥发油浸润和吸入法对大鼠心室肌有效不应期的影响被引量：9
- 2008年
- 目的研究甘松挥发油不同途径给药对心肌有效不应期(ERP)的影响,探讨其抗心律失常作用及电生理机制。方法Wistar大鼠50只,体重(250±50)g,分为心外膜局部浸润(局部)(20只)和气道吸入组(吸入)(20只),给予1∶20000甘松挥发油。对照组(10例)。测定心室ERP,ERP/RR比值评价药物的影响。结果①局部吸入组对ERP/RR比值的影响:用药后ERP/RR比值与各相应对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),结果与ERP相似。②ERP、ERP/RR比值之间比较:在15、30、45min时间段,用ERP观察比较两种给药方式之间差异无统计学意义(P>0.05),但用ERP/RR比值比较两者,两种给药方式之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论①甘松挥发油局部、吸入可明显延长心室肌ERP。②用药后15～45min之间效果明显且稳定,45min后作用明显减弱。③ERP/RR比值能更准确的反应药物对有效不应期的作用。④吸入较局部浸润更加有效。
- 葛郁芝周萍陈军喜吴志婷
- 关键词：甘松挥发油不应期神经性
- 中药甘松挥发油对大鼠心室肌细胞膜L型钙通道的影响
- 目的研究甘松挥发油对大鼠心室肌细胞膜L型钙通道的影响,探讨甘松挥发油在离子通道水平抗心律失常的作用机制。方法1.按中国药典(一部)甲法进行甘松挥发油制作.2.用急性酶解分离法分离大鼠心室肌细胞。3.采用标准的全细胞膜片钳...
- 曹明葛郁芝罗骏王云霞张淑华吴志婷
- 文献传递
- 中药甘松挥发油对HEK细胞Na_v1.5电流频率依赖性阻滞的影响被引量：7
- 2013年
- 目的研究中药甘松挥发油对HEK细胞Nav1.5电流频率依赖性阻滞的影响。方法用Nav1.5细胞,采取膜片钳技术直接记录甘松挥发油(VONCB)对HEK细胞Nav1.5电流频率依赖性阻滞。结果 VONCB对HEK细胞表达的鼠心肌Na+通道的具有阻滞作用。5 ppm VONCB在-100 mV电压钳制下,导致20%Na+电流抑制,静息状态产生轻微阻滞;VONCB对Na+通道抑制随刺激频率增加(1～20 Hz)而增加,产生明显的Na+通道频率依赖性阻滞。结论 VONCB对HEK细胞表达的Nav1.5通道的具有频率依性阻滞作用,VONCB对Na+通道抑制随刺激频率增加(1～20 Hz)而增加。
- 刘艳阳葛郁芝Jay Z.Yeh
- 关键词：NAV1膜片钳甘松挥发油
- 甘松挥发油对大鼠心室肌细胞膜钠通道的影响被引量：25
- 2010年
- 目的研究甘松挥发油对大鼠心室肌细胞膜钠通道的影响,探讨甘松挥发油在离子通道水平抗心律失常的作用机制。方法用急性酶解法分离大鼠心室肌细胞,采用全细胞膜片钳记录技术,观察不同浓度的甘松挥发油对钠通道的影响。结果①浓度为1,3,5,10,20,100μg/g甘松挥发油可浓度依赖性地抑制钠电流;②可使心肌细胞钠电流-电压曲线上移,但激活电位、峰电位及反转电位无改变;③使激活曲线向正电位方向变化,V1/2从(-43.65±0.98)mV右移至(-40.25±1.01)mV(n=6,P<0.05);④使失活曲线向负电位方向变化,V1/2从(-100.92±0.68)mV左移至(-111.20±0.86)mV(n=6,P<0.05)。结论甘松挥发油可通过浓度依赖性地抑制大鼠心肌细胞膜钠通道电流,在不同膜电位水平对钠通道电流具有均匀一致的抑制作用;使激活曲线右移,使失活曲线左移。
- 杨涛葛郁芝罗骏胡朗吉张淑华吴志婷
- 关键词：膜片钳钠通道心肌细胞
- HEK细胞Nav1.5电流对甘松挥发油浓度及电压依赖性阻滞被引量：5
- 2009年
- 目的:研究甘松挥发油对人肾胚胎(HEK)细胞Nav1.5电流的影响。方法:应用细胞膜片钳技术研究甘松挥发油对鼠cDNA编码组成的纯钠通道在人胚胎肾细胞(HEK)表达的Nav1.5细胞离子通道电流的影响。结果:发现甘松挥发油对Na电流的阻滞作用受挥发油浓度影响,量-效反应量呈"S"曲线型,电压钳制影响表现为膜电位越低(电位上移)阻滞作用越强。结论:甘松挥发油对钠电位有明显阻滞作用,其作用随剂量增加而增加,随膜电位降低而作用加强。提示临床可用于因心肌缺血导致膜电位降低而诱发的心律失常。
- 葛郁芝吴志婷张淑华盛国太Yeh Jay Z
- 关键词：甘松挥发油NAV1.5膜片钳
