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广东省自然科学基金(8251008901000014)
作品数:
1
被引量:2
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2009
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Numb基因在大鼠肾小管上皮细胞转分化过程中的作用
被引量:2
2009年
目的探讨Numb在大鼠。肾小管上皮细胞转分化过程中的作用。方法重组人转化生长因子p1(TGF-β1)刺激大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK52E细胞),不同浓度TGF-β1(0、1、5、10、15、20μg/L)作用48h与TGF-β110μg/L作用不同时间(0、24、48、72h)后,采用RT-PCR、Western印迹和免疫荧光染色分别检测NRK52E细胞内E钙黏蛋白(E—cadhefin)、仅平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Numb的表达。采用RNA干扰技术下调Numb表达,Western印迹观察改变Numb水平对E—cadherin、α-SMA蛋白水平的影响。结果TGF-β1以剂量及时间依赖的方式诱导NRK52E细胞E—cadhefin蛋白表达下调,α-SMA蛋白表达增高。Numb蛋白的表达随TGF-β1浓度的增加而增高,在5、10、15和20μg/L时分别为0μg/L时的1.33倍(P=0.024)、1.39倍(P=0.035)、1.45倍(P=0.025)和1.51倍(P:0.000)。而Numb蛋白和mRNA的表达亦随TGF—β1作用时间的延长而增高,作用24h、48h、72h,Numb蛋白分别为0h的1.48倍(P=0.046)、1.54倍(P=0.011)、1.79倍(P=0.028),NumbmRNA分别为0h的1.56倍(P=0.012)、1.82倍(P=0.008)、1.82倍(P=0.002);同时Numb的分布也发生了改变,大量聚集在胞质中。下调Numb表达可以显著抑制TGF-β1诱导的d,SMA表达上调(为Numb表达正常时的18.1%,P=0.004)、E—cadhefin表达下调(为Numb表达正常时的2.19倍,P=0.004)。结诊Numb可以佴讲肾小管卜席绷朐岢牮转分化。
刘伟
朱风新
聂静
范瑾瑾
邱芳华
陈文芳
黄锋先
余学清
关键词:
转化生长因子Β1
肾小管
上皮细胞
NUMB
上皮细胞转分化
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