国家自然科学基金(30371666)
- 作品数：7 被引量：57H指数：4
- 相关作者：汪晖廖长秀平洁李婧婷武晓茜更多>>
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- 精密肝切片中乙醛活化肝星状细胞模型的建立被引量：4
- 2005年
- 目的:在精密肝切片中利用乙醛激活肝星状细胞,建立一种星状细胞激活的体外模型,为研究和筛选阻抑肝纤维化发生的药物奠定基础。方法:利用振荡切片机制备精密肝切片,建立培养系统。以700μmol·L-1乙醛孵育切片,培养0、2、4、6h,测定培养基和组织匀浆中谷胱甘肽S-转移酶(GST)、乳酸脱氢酶(LDH)和羟脯氨酸(Hyp)含量,观察病理切片中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达。结果:与0h相比,乙醛培养2、4、6h培养基的GST、LDH漏出量均显著升高(P<0.05)。切片组织Hyp含量6h较0h相比明显升高(P<0.05)。免疫组化片镜下可见4、6h有α-SMA阳性细胞表达,图像分析显示面积和阳性率较0h明显增加(P<0.05)。结论:精密肝切片与终浓度为700μmol·L-1乙醛共孵育6h可活化切片中星状细胞,该技术可作为良好的体外肝星状细胞激活模型。α-SMA免疫组化是一鉴定体外星状细胞激活的可靠指标。
- 武晓茜汪晖郭喻廖长秀吴勇
- 关键词：乙醛肝星状细胞平滑肌肌动蛋白
- 吲哚-3-原醇对肝星状细胞活化增殖的抑制作用及其分子机制
- 目的观察吲哚-3-原醇(indole-3·carbinol,I3C)对肝星状细胞(HSC)活化增殖及胶原合成的影响,并探讨其可能的分子机制。方法培养永生化肝星状细胞株 HSC-T6,加入不同浓度13C (50,100,2...
- 平洁汪晖
- 关键词：吲哚-3-原醇肝星状细胞活化增殖
- 文献传递
- 肝星状细胞激活的分子机制与抗肝纤维化治疗被引量：13
- 2007年
- 肝星状细胞(HSC)激活是肝纤维化发生的中心环节,其激活过程可分为始动阶段(旁分泌刺激和转录调控因素启动级联瀑布式的细胞反应)和持续阶段(旁分泌或自分泌刺激和细胞外基质重建共同维持HSC活化的表型反应)。肝脏中多种细胞和细胞因子参与调节了HSC的激活过程。活化型HSC的表型变化主要包括细胞增殖、收缩和纤维形成等。抗肝纤维化治疗策略主要包括调控HSC活化增殖或促其凋亡、抑制胶原合成或促其降解、细胞因子治疗和间充质干细胞治疗等。
- 李婧婷汪晖廖长秀平洁
- 关键词：肝纤维化肝星状细胞分子机制
- 大鼠肝星状细胞中多种细胞色素P450亚型的表达被引量：2
- 2007年
- 目的采用改良的肝星状细胞(HSCs)体外分离和纯化技术,观察刚分离的大鼠HSCs中细胞色素P450(CYP450)亚型的表达,初步探讨CYP450同工酶在HSCs生理功能和激活中的作用。方法采用链霉蛋白酶/胶原酶序贯灌流和Nycodenz密度梯度离心方法,分离和纯化大鼠HSCs,半定量RT-PCR法检测HSCs和肝细胞内多种与视黄醇代谢相关的CYP450亚型mRNA的表达。结果HSCs的得率为每肝(0.8～1.2)×107。刚分离的大鼠HSCs中均能检测到CYP1A1,CYP1B1,CYP2B1/2和CYP2E1mRNA表达,其中,HSCs中CYP1A1mRNA及CYP1B1mRNA表达量接近甚至高于同一个体肝细胞中的表达水平。但CYP3A1mRNA未检测到。结论刚分离的大鼠HSCs可较高水平地表达多种与视黄醇代谢相关CYP450亚型,提示HSCs中CYP450亚型可能参与了HSCs的生理功能调节和激活过程。
- 廖长秀汪晖张春平洁
- 关键词：肝星状细胞MRNA表达
- 醋氨酚所致精密肝切片损伤模型的建立及CYP2E1的调节作用被引量：4
- 2008年
- 目的:利用精密肝切片(PCLS)技术,建立醋氨酚所致肝切片损伤的体外模型,并探讨CYP2E1活性变化对肝损伤的调节作用,为研究和筛选肝保护药物提供实验依据。方法:利用振荡切片机制备PCLS,建立培养系统。将终浓度为500μmol/L的醋氨酚分别与切片共孵育0、2、4、6h,测定培养基和切片中的谷胱甘肽S-转移酶(GST)和乳酸脱氢酶(LDH)活性。在体给予不同剂量(0.25、0.5、1.0g/kg)的CYP2E1诱导剂乙醇,每天一次,连续3d。末次给药8h后处死动物,取其肝脏制备PCLS,再与500μmol/L醋氨酚共同孵育6h,检测ALT和LDH漏出率。正常PCLS与不同浓度的二乙基二硫代氨基甲酸酯盐(DDTC,CYP2E1抑制剂)(5、10、20μmol/L)、500μmol/L醋氨酚共同孵育6h,检测ALT和LDH漏出率。结果:与常规培养组比较,醋氨酚孵育4、6h组的GST和LDH漏出率显著升高(P<0.01)。与醋氨酚模型对照组比较,乙醇中、大剂量组LDH漏出率和小、大剂量组ALT漏出率皆升高(P<0.01,P<0.05);DDTC各浓度组ALT漏出率则降低(P<0.05)。结论:PCLS与500μmol/L醋氨酚共孵育4h即能成功地建立体外肝切片损伤的模型。抑制CYP2E1活性可能对醋氨酚所致的肝损伤有保护作用,而上调CYP2E1活性则可能加重醋氨酚所致的肝损伤。
- 李婧婷汪晖潘晓靓鄢友娥郭喻张本坚
- 关键词：CYP2E1乙醇醋氨酚肝损伤
- 肝星状细胞凋亡信号途径及其药物治疗的研究进展被引量：27
- 2009年
- 各种致病因素所致慢性肝损伤均可引起肝纤维化,肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)的激活是肝纤维化发生发展的中心环节,促进其凋亡被认为是肝纤维化逆转的始动因素。HSC的凋亡机制十分复杂,调控活化HSC凋亡的信号转导途径研究甚少。目前已知的HSC凋亡信号途径主要包括线粒体途径、死亡受体途径和非死亡受体途径。基于这些信号转导途径,研究出选择性诱导HSC凋亡的药物将成为抗肝纤维化治疗的重要手段。该文将对HSC凋亡信号转导通路的最新进展进行综述,并对目前已知的具有促HSC凋亡作用的药物进行总结分类。
- 张怡平洁汪晖
- 关键词：肝纤维化肝星状细胞凋亡信号转导
- 吲哚-3-原醇对乙醛所致精密肝切片中星状细胞活化的影响被引量：7
- 2007年
- 目的利用精密肝切片(PCLS)技术,研究吲哚-3-原醇(I3C)对乙醛活化肝星状细胞(HSCs)的作用及其机制。方法将200～800μmol.L-1的I3C及700μmol.L-1乙醛与PCLS共同孵育6h,免疫组化法分析肝切片中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,并检测培养液中谷胱甘肽S-转移酶(GST)和乳酸脱氢酶(LDH)活性、转化生长因子-β1(TGF-β1)含量、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)表达量及组织丙二醛(MDA)和羟脯氨酸(Hyp)含量。结果200～800μmol.L-1I3C可不同程度的减少乙醛激活的HSCs,并可明显降低乙醛升高的培养液中GST、LDH活性和肝组织中MDA和Hyp含量(P<0.05或P<0.01),呈良好的浓度依赖性。I3C给药组与乙醛对照组比较,培养液中TGF-β1含量降低(P<0.01),MMP-1/TIMP-1蛋白表达比值升高(P<0.01)。结论I3C能有效拮抗乙醛所致的HSCs活化,其机制与降低细胞氧化应激和促进基质胶原降解有关。
- 武晓茜汪晖廖长秀
- 关键词：吲哚-3-原醇乙醛肝星状细胞
- 维拉帕米对大鼠肝纤维化的防治作用及其机制研究
- 目的：观察维拉帕米对实验性大鼠肝纤维化的防治作用，并对其可能机制进行探讨。<br> 针对40只Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、维拉帕米小、中、大剂量组。实验第四周末处死各组动物，测定血清...
- 徐丹汪晖孟巍
- 关键词：维拉帕米肝纤维化转化生长因子-Β1Α-平滑肌肌动蛋白肝星状细胞羟脯氨酸
- 用基因芯片技术研究乙醇对肝星状细胞增殖及其CYP450亚型表达的影响被引量：2
- 2008年
- 廖长秀汪晖平洁吴勇
- 关键词：应用基因芯片技术肝星状细胞增殖CYP450乙醇亚型表达细胞增殖相关基因
