国家自然科学基金(30371684)
- 作品数:10 被引量:85H指数:7
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- 黄酮醇类化合物对心肌细胞凋亡过程Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达影响(英文)
- 目的研究黄酮醇类化合物对大鼠心肌细胞凋亡的保护作用。方法体外培养Wistar乳鼠心肌细胞,建立心肌细胞凋亡模型;随机分组:正常组,损伤组和用药组。用药组分别加入四种黄酮醇类化合物,孵育1h后,除正常组之外,加入H2O2诱...
- 王丽伟刘凤芝陆景坤刘有昌杨宝峰
- 关键词:心肌细胞黄酮醇类凋亡
- 文献传递
- 黄酮类化合物对心肌细胞凋亡的作用被引量:16
- 2008年
- 目的观察黄酮类化合物包括高良姜素(G)、山萘酚(K)、芹菜素(A)、桑色素(M)、槲皮素(Q)、杨梅素(MY)对H2O2诱导的心肌细胞凋亡的作用,并探讨其可能的作用机制。方法培养新生Wistar乳鼠心肌细胞,随机分为正常组、模型组、药物组。分别用荧光染色法、琼脂糖凝胶电泳法、Western blot法观察心肌细胞凋亡情况及蛋白表达的变化。结果100μmol·L-1H2O2孵育心肌细胞16 h能明显诱导心肌细胞凋亡(P<0.01),黄酮类化合物能降低细胞凋亡率,抑制DNA损伤,上调bcl-2、bcl-xl,下调bax蛋白表达。结论黄酮类化合物能抗氧化,从而抑制心肌细胞凋亡,主要是通过线粒体死亡途径调节bcl-2家族蛋白表达来发挥作用的。
- 张锦赵翠翠韩维娜刘凤芝
- 关键词:黄酮类化合物心肌细胞凋亡DNABCL-2家族蛋白
- 聚酰胺柱色谱法分离黄酮醇与二氢黄酮醇类化合物被引量:7
- 2007年
- 目的采用聚酰胺柱色谱分离黄酮醇与二氢黄酮醇类化合物。方法采用聚酰胺柱色谱作为分离手段,结合紫外、红外吸收光谱进行检测。结果运用聚酰胺柱色谱法一次分离得高纯度黄酮醇与二氢黄酮醇。结论本实验为分离2,3位饱和度不同黄酮醇类化合物提供了较稳定的、简便的分离方法。
- 甘春丽王晶杨异卉韩维娜董乃维刘凤芝
- 关键词:杨梅素二氢杨梅素
- 黄酮醇类化合物对心肌细胞凋亡过程caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达影响被引量:7
- 2007年
- 目的研究槲皮素、杨梅素、桑色素和芦丁对大鼠心肌细胞凋亡的保护作用。方法体外培养Wistar乳鼠心肌细胞,建立心肌细胞凋亡模型;随机分组:正常组,损伤组和用药组。用药组分别加入30μmol.L-1的4种黄酮醇类化合物,孵育1h后,除正常组之外,加入H2O2诱导细胞凋亡。加入不同浓度的药物后,采用MTT法观察细胞存活情况,来进行药物有效浓度的筛选。采用TUNEL、流式细胞仪法检测心肌细胞凋亡情况,免疫组化法检测caspase-3蛋白、Bcl-2、Bax蛋白的表达情况。结果MTT结果显示,4种黄酮醇类在5和30μmol.L-1时对细胞没有毒性。4种黄酮醇类化合物与损伤组比较,槲皮素、杨梅素、桑色素的心肌细胞凋亡率降低、Bcl-2/Bax比值增大、抑制caspase-3蛋白的活化。结论槲皮素、杨梅素和桑色素对心肌细胞凋亡有保护作用,可以通过抑制caspase-3蛋白的活化、上调Bcl-2蛋白的表达或是降低Bax的表达来发挥作用,槲皮素表现出较强的抗凋亡活性。
- 王丽伟刘凤芝陆景坤刘有昌杨宝峰
- 关键词:心肌细胞黄酮醇类凋亡
- 山奈酚、芹菜素、大豆苷元对H_2O_2诱导的心肌细胞凋亡的影响被引量:7
- 2007年
- 目的观察不同种类黄酮类化合物山萘酚(KA)、芹菜素(AP)、大豆苷元(DA)对H2O2诱导的心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达的影响。方法取Wistar大鼠新生乳鼠心肌细胞做原代培养,MTT法检测几种黄酮的细胞毒浓度;H2O2(100μmol/L)诱导心肌细胞凋亡;Tunel法、流式细胞仪检测细胞凋亡率;免疫组化方法测定Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达。结果MTT法显示各组药物在5、30μmol/L没有显著的细胞毒作用。KA、AP、DA均显著减小H2O2诱导的细胞凋亡率、Caspase-3蛋白表达,增加Bcl-2/Bax比值(P<0.05),其中KA效果最显著(P<0.01)。结论这些黄酮类化合物有抑制H2O2诱导的心肌细胞凋亡作用,其机制与其抗氧化活性有关,可能是通过调节Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达,起到心肌细胞保护作用,其中KA效果最好。
- 陆景坤王丽伟董乃维刘凤芝
- 关键词:黄酮心肌细胞凋亡抗氧化作用
- 不同类型黄酮对过氧化氢诱导的心肌细胞凋亡的影响被引量:4
- 2007年
- 目的:观察不同类型的黄酮类化合物红花黄色素A(查儿酮)、高良姜素(黄酮醇)、陈皮素(二氢黄酮)对H2O2诱导的心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达的影响。方法:取Wistar大鼠乳鼠心肌细胞做原代培养,制备H2O2诱导的心肌细胞凋亡模型。MTT法检测3种黄酮类化合物适宜的实验浓度,TUNEL法、流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫组化法测定Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达。结果:MTT法显示各组药物只有5μmol/L组与空白组相比差异无统计学意义(P<0.05)。仅30μmol/L组细胞活力显著高于模型组,随后实验选用30μmol/L作为试验浓度。TUNEL法检测细胞凋亡率,除红花黄色素A组外各药物组细胞凋亡率均显著小于模型组(P<0.05)。流式细胞术检测显示,各药物组均能降低细胞凋亡率和坏死率。免疫组化显示,Caspase-3蛋白阳性表达除红花黄色素A组(与空白对照组比较P>0.05)外各药物组均显著小于模型组(P<0.05)。Bcl-2/Bax比值除红花黄色素A组(与正常组比较P>0.05)外各药物组均显著高于模型组(P<0.05)。TUNEL法检测凋亡率、Caspase-3蛋白阳性表达、Bcl-2/Bax比值均显示陈皮素和高良姜素组间无统计学差异(P>0.05)。结论:陈皮素和高良姜素抑制100μmol/LH2O2诱导新生乳鼠心肌细胞凋亡的效果相当,可调节Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达,起到保护心肌细胞作用;而红花黄色素A对细胞坏死的影响可能比对细胞凋亡的作用更强。
- 陆景坤王丽伟刘凤芝
- 关键词:黄酮心肌细胞凋亡抗氧化作用过氧化氢
- 藤茶中杨梅素和二氢杨梅素的分离及抗心肌细胞凋亡作用被引量:22
- 2008年
- 目的利用聚酰胺法从藤茶中分离得到杨梅素(MYR)和二氢杨梅素(DMY),研究其对心肌细胞的保护作用。方法通过水提法得到总黄酮,上聚酰胺柱,以醇水梯度洗脱分离,收集30%~50%醇馏分得DMY的单体,60%~70%醇馏分中收集到MYR单体。用流式细胞仪(FCM)检测两种化合物对心肌细胞凋亡的影响。结果FCM检测结果显示,MYR和DMY对H2O2诱导的心肌细胞凋亡有明显抑制作用。结论聚酰胺法能够分离得到MYR和DMY单体;MYR及DMY有抑制心肌细胞凋亡作用。
- 姜仕先董乃维张婧甘春丽刘凤芝
- 关键词:杨梅素二氢杨梅素心肌细胞凋亡
- 10种天然黄酮化合物对大鼠心肌细胞抗凋亡作用的定量构效关系研究被引量:5
- 2008年
- 目的利用10种天然黄酮化合物对大鼠心肌细胞抗凋亡活性数据,对10种黄酮化合物的2个理化参数(脂水分配系数logP和游离羟基数N)进行定量构效关系研究(QSAR),找出最佳拟合方程——Hansch方程,以指导黄酮类化合物的结构最佳化研究。方法利用过氧化氢诱导心肌细胞损伤模型,用MTT法测定10种天然黄酮化合物的抗凋亡作用,利用统计软件SPSS 13.0进行多元线性回归分析。结果得到黄酮化合物抗凋亡作用的Hansch方程。结论通过统计分析,所选定的天然黄酮化合物的Hansch方程具有较好的拟合性(n=10,r=0.807,SE=0.0920,F=6.541,Q=8.77)。
- 董乃维赵翠翠刘凤芝
- 关键词:黄酮化合物QSAR抗凋亡作用MTT法
- 5种黄酮醇类化合物对大鼠心肌细胞内钙离子的影响被引量:7
- 2007年
- 目的研究山萘酚(Kaempferol,KA)、杨梅素(Myricetin,MY)、二氢杨梅素(Dihydromyricetin,DMY)、槲皮素(Quercetin,QU)、二氢槲皮素(Dihydroquercetin,DQU)5种黄酮醇类化合物对大鼠心肌细胞内游离钙离子([Ca^(2+)]i)的影响。方法采用Fluo-3/AM同时加入Pluronic F-127作为细胞内游离钙离子的荧光探针,负载H9C2心肌细胞系,应用激光扫描共聚焦显微技术,测定5种黄酮醇类化合物(50μmol/L)在静息状态和加入60 mmoL/L氯化钾(KCI)时心肌细胞胞浆内游离钙离子的荧光强度(FI)。结果静息状态下,KA和QU能够明显降低心肌细胞内[Ca^(2+)]i(P<0.05),MY能够短暂而明显升高[Ca^(2+)]i(P<0.05),而DMY和DQU对心肌细胞内[Ca^(2+)]i无明显影响(P>0.05);KA、MY、DMY、QU和DQU对KCI介导的高钙有抑制作用(P<0.05)。结论5种黄酮醇类化合物对电压依赖性钙通道(VDC)有明显抑制作用,这可能是产生药理活性机制之一,有利于进一步研究其对心肌的保护作用和探讨其构效关系。
- 甘春丽刘凤芝姜仕先曹圣吉董乃维
- 关键词:心肌细胞钙离子电压依赖性钙通道
- 山萘酚、芹菜素对H_2O_2诱导的心肌细胞凋亡过程中线粒体损伤的影响被引量:12
- 2008年
- 目的:观察山萘酚和芹菜素对H2O2诱导的大鼠心肌细胞凋亡过程中线粒体损伤的影响。方法:采用胰蛋白酶消化法,体外分离和培养新生大鼠心肌细胞,建立H2O2损伤心肌细胞模型。以MTT法检测心肌细胞活力,流式细胞仪检测心肌细胞凋亡情况,JC-1荧光探针测定线粒体膜电位,Western blotting法检测胞浆中细胞色素C(CytC)的表达。结果:与模型组比较,山萘酚和芹菜素能显著提高心肌细胞活力,降低心肌细胞凋亡率,抑制线粒体膜电位下降和CytC释放。结论:山萘酚和芹菜素对H2O2诱导的心肌细胞凋亡具有明显的抑制作用,山萘酚的抗氧化作用强于芹菜素,其机制可能依赖于抑制线粒体膜电位降低和CytC释放。
- 赵翠翠张锦韩维娜董乃维刘凤芝
- 关键词:山萘酚芹菜素线粒体膜电位细胞色素C