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国家自然科学基金(30371695)

作品数：10 被引量：35H指数：4
相关作者：张振中周天洋张艳艳李惠翔付旭东更多>>
相关机构：郑州大学郑州大学第一附属医院中南大学更多>>
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文献类型

  • 10篇中文期刊文章

领域

  • 8篇医药卫生
  • 1篇生物学
  • 1篇理学

主题

  • 8篇寡核苷酸
  • 8篇核苷酸
  • 8篇反义
  • 8篇反义寡核苷酸
  • 7篇细胞
  • 5篇HTERT
  • 4篇端粒
  • 4篇端粒酶
  • 4篇端粒酶逆转录...
  • 4篇逆转
  • 4篇逆转录
  • 4篇逆转录酶
  • 4篇转录
  • 4篇转录酶
  • 3篇介导
  • 3篇A549细胞
  • 2篇载体介导
  • 2篇食管
  • 2篇食管癌
  • 2篇转染

机构

  • 9篇郑州大学
  • 4篇郑州大学第一...
  • 1篇河南中医药大...
  • 1篇中南大学

作者

  • 9篇张振中
  • 4篇张艳艳
  • 4篇周天洋
  • 3篇黄幼田
  • 3篇李惠翔
  • 3篇付旭东
  • 2篇王瑾
  • 2篇付春景
  • 1篇厉留柱
  • 1篇杨洪艳
  • 1篇刘宇琼
  • 1篇严瑛
  • 1篇张岚
  • 1篇王白燕
  • 1篇宋旭
  • 1篇张晓艳
  • 1篇郑智敏
  • 1篇张红岭
  • 1篇毛陆原
  • 1篇王照川

传媒

  • 2篇中国药学杂志
  • 1篇药学学报
  • 1篇中华肿瘤杂志
  • 1篇山东医药
  • 1篇中原医刊
  • 1篇中国肿瘤临床
  • 1篇Chemic...
  • 1篇实用诊断与治...
  • 1篇现代生物医学...

年份

  • 3篇2008
  • 1篇2007
  • 4篇2006
  • 1篇2005
  • 1篇2004
共 10 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
反义寡核苷酸聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒的制备及载药研究被引量：11
2005年
目的制备载反义寡核苷酸(ASODNs)聚氰基丙烯酸丁酯阳离子纳米粒。方法以二乙氨乙基-葡聚糖(DEAE-Dextran)为修饰剂,采用乳化聚合法制备阳离子聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒,采用吸附法制备载ASODNs纳米粒。用原子力显微镜观察其形态,用激光粒度仪测定Zeta电位及粒径,高效液相法测定药物的载药量和包封率,琼脂糖电泳分析抗核酸酶的能力。结果制得的纳米粒(NP),形态规整、大小均匀,平均粒径为90.2nm,Zeta电位值为+40.1mV,载药量达到84.3μm·mg-1时,几乎所有的药物被负载,DEAE-Dextran-(NP)所吸附的ODNs有较好的对抗核酶降解的能力。结论DEAE-Dextran-NP是一种稳定、高效的反义寡核苷酸传递系统。
刘伟张红岭周天洋厉留柱严瑛毛陆原张振中
关键词：纳米粒反义寡核苷酸
纳米载体介导的hTERT反义核酸对食管癌细胞生物活性的影响被引量：1
2008年
目的:研究聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒(polybutylcyanoacrylate nanoparticles,PBCA-NPs,NPs)介导的端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transeriptase,hTERT)基因反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)对食管癌细胞EC9706生物活性的影响。方法:采用乳化聚合法制备聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒作为转染寡核苷酸(SODN)的载体,利用激光粒度分析仪和原子力显微镜测定制备NPs的粒径及zeta电位;以NPs介导8条不同hTERTASODN(NPs-ASODNⅠ、NPs-ASODNⅡ、NPs-ASODNⅢ、NPs-ASODNⅣ、NPs-ASODNⅤ、NPs-ASODNⅥ、NPs-ASODNⅦ和NPs-ASODNⅧ)转染食管癌细胞EC9706,采用MTT法检测转染后对EC9706细胞增殖的影响;采用RT-PCR检测hTERTmRNA表达情况;流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:所制NPs粒径均匀、zeta电位较高,较为理想;以NPs介导hTERTASODN转染24h时,EC9706细胞增殖被明显抑制,该抑制作用随转染时间的延长和浓度的增高依次增强,与细胞对照组相比有显著差异(P<0.05);且不同ASODN转染后对EC9706细胞抑制率不同。单纯NPs组、正义寡核苷酸NPs-SODN组和单纯ASODN组转染后对EC9706细胞增殖无明显抑制作用(P>0.05)。NPs-ASODN转染EC9706细胞72h时,hTERTmRNA表达水平明显降低,与细胞对照组相比有显著差异(P<0.05)。NPs-ASODN转染72h时,NPs-ASODNⅠ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ转染组EC9706细胞出现明显凋亡现象(P<0.05),而NPs-ASODNⅡ、Ⅲ、Ⅳ转染组EC9706细胞未发生明显的凋亡现象(P>0.05)。结论:聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒可以作为一种良好的基因载体,在其介导下hTERTASODN能有效抑制食管癌细胞EC9706的增殖和hTERTmRNA的表达,并能诱导细胞凋亡。提示该纳米粒作为一种新型纳米载体为食管癌的基因治疗提供了一条新的途径。这种抑制作用具有时间和浓度依赖性,并具有序列特异性,表明hTERT基因不同位点在端粒酶活性中所起的作用可能不同。
王白燕张振中周天洋张岚李惠翔
关键词：HTERT反义寡核苷酸
PBCA纳米粒介导hTERT反义寡核苷酸对A549细胞的转染
2006年
目的:应用聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒介导或者寡核苷酸直接转染技术,研究聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒介导下端粒酶逆转录酶反义寡核苷酸对A 549细胞的转染,探讨聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒对A 549细胞摄入寡核苷酸的影响。方法:利用5′端F ITC标记的反义寡核苷酸,以聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒介导FA SODN(FA SODN-NP)或FA SODN直接转染A 549细胞,流式细胞仪测定细胞的胞内平均荧光强度,荧光显微镜观察细胞内荧光物质的分布。结果:转染24 h后,与空白对照组和FA SODN组相比,FA SODN-NP组胞内荧光强度明显增加(P<0.01)。结论:聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒介导能有效提高A 549细胞对端粒酶逆转录酶反义寡核苷酸的摄入。
张艳艳张晓艳黄幼田郑智敏付旭东张振中
关键词：荧光素反义寡核苷酸基因转染
Synthesis and Flocculation Property of Chitosan-Acrylamide Graft Copolymer被引量：12
2004年
Chitosan, as a kind of natural polymer, has many advantages, such as abundant sources, biological degradation, no secondary contamination and facile modification. In this work, we prepared modified chitosan flocculants with double electrical behavior via polymerizing chitosan, acrylamide and sodium carboxymethyl cellulose together by using ammonium persulfate as the indicator in water. The product is a comb-type of chitosan copolymer and a polymeric ampholyte. And then we studied the product by FTIR, UV-Vis, TG, DSC spectrometeries and viscometry, etc. We also performed CACM′s water treat experiment. The effects of pH values, reaction time and dose of the new floccalant on treating various of waste water have been investigated, too.
LILiu-zhu MAOLu-yuan WANGXiu-li YANGYong ZHUANGYin-feng
关键词：CHITOSANACRYLAMIDECOPOLYMER
PBCA纳米粒介导反义寡核苷酸转染对肺腺癌细胞hTERT的影响
2006年
目的以聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒(PBCA-NPs,NPs)作为端粒酶逆转录酶(hTERT)反义寡核苷酸(ASODN)载体转染肺腺癌A549细胞,观察其对该细胞hTERT mRNA表达的影响。方法以NPs携带ASODN转染A549细胞后,用流式细胞仪检测细胞周期;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞hTERT mRNA表达的改变。结果转染后,与空白对照组和正义寡核苷酸(SODN)组相比,ASODN组G0/G1期细胞增加,S期细胞明显减少(P<0.01),hTERT mRNA表达明显下降(P<0.01)。结论hTERT ASODN能有效改变A549细胞的细胞周期,下调hTERTmRNA表达,对肺腺癌细胞生长有抑制作用。
张艳艳付旭东黄幼田张振中
关键词：端粒酶逆转录酶反义寡核苷酸A549细胞
PBCA纳米粒介导的hTERT反义寡核苷酸对A549细胞的抑制作用被引量：4
2006年
目的以聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒(polybutylcyanoacrylate nanopartic les,PBCA-NPs,NPs)作为端粒酶逆转录酶(hum an telom erase reverse transcriptase,hTERT)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynuc leotide,ASODN)载体转染A549细胞,研究其对A549细胞的影响。方法采用MTT法检测NPs的细胞毒性和细胞增殖情况;流式细胞仪(flowcytom etry,FCM)检测5-′FITC标记的ASODN(FASODN)转染细胞后胞内荧光强度和ASODN各组(ASODN1-NP,ASODN2-NP和ASODN3-NP)转染细胞后细胞周期的变化;倒置显微镜观察A549细胞生长状态;免疫细胞化学法检测hTERT蛋白表达。结果NPs质量浓度超过2.5 g.L-1时细胞毒性较大。转染24 h后,FASODN-NP组较FASODN组胞内荧光明显增强(P<0.01)。与空白对照组和正义寡核苷酸(sense oligodeoxynuc leotide-nanopartic le,SODN-NP)组相比,ASODN-NP处理后A549细胞形态改变,细胞增殖减慢;各组细胞生长抑制率随时间延长而增高,72 h时ASODN1-NP,ASODN2-NP,ASODN3-NP各组最高抑制率分别可达62.4%,44.6%和36.4%;细胞周期改变,细胞被阻滞于G1期,S期细胞明显减少(P<0.01);且hTERT蛋白表达明显减少。结论NPs介导的hTERT ASODN能有效抑制A549细胞增殖、改变细胞周期及降低hTERT蛋白表达,对该细胞生长有明显抑制作用。
张艳艳付春景张振中
关键词：端粒酶逆转录酶反义寡核苷酸A549细胞
多价阳离子诱导的DNA缩合研究进展被引量：1
2007年
DNA分子在多价阳离子作用下,可以缩合成紧密有序的纳米级缩合体。常用的多价阳离子包括阳离子聚合物,蛋白质,高价无机离子等。缩合主要是由于67～90%的DNA磷酸基负电荷被中和而引起的,缩合的过程伴随着微粒的聚集过程;常见的缩合体是圆环体状,其尺寸一般在50～300nm之间;缩合主要受缩合剂正电荷的影响,缩合剂的结构也对缩合过程有一定的影响;DNA分子的大小和碱基成分也是影响缩合的因素,同时也决定缩合体的体积大小。
宋旭张振中王照川
关键词：DNA缩合
纳米载体介导的人端粒酶逆转录酶反义寡核苷酸对食管癌EC9706细胞的增殖抑制作用及端粒酶表达的影响被引量：4
2008年
目的探讨纳米载体介导的人端粒酶逆转录酶（hTERT）基因反义寡核苷酸（ASODN）在体内外对食管癌EC9706细胞的增殖抑制作用及端粒酶表达的影响。方法制备线型聚乙烯亚胺（L-PEI）／ASODN纳米级复合物及NGR修饰的L-PEI／ASODN靶向纳米复合物，转染人食管癌细胞系EC9706。采用激光共聚焦显微镜观察细胞对纳米复合物的摄人情况，通过二苯基溴化四氮唑蓝（MTT）法检测细胞抑制率，采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫组化法分别检测hTERT mRNA和蛋白的表达情况，Annexin V-FITC／PI双标法检测凋亡细胞。通过体内药物分布实验和抑瘤实验观察NGR的靶向肿瘤细胞作用、裸鼠移植瘤的生长情况、组织形态学和超微形态学改变。结果共聚焦显微镜观察可见，L-PEI可以保护hTERT ASODN有效进入细胞核内；N／P=10、ASODN终浓度40μg／ml的L-PEI／ASODN复合物转染细胞后24、48、72和96h，增殖抑制率分别为45．6％、55．8％、67．0％和83．1％；L-PEI／ASODN转染组hTERT mRNA水平明显降低，hTERT条带与内对照条带灰度值的比值为0．27±0．04，与空白对照组、ASODN转染组和L-PEI／SODN转染组相比，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。hTERT蛋白不表达；转染48h后，L-PEI／ASODN转染组细胞凋亡明显，早期凋亡率和晚期凋亡率分别为38．0％和52．2％。NGR修饰的L-PEI／ASODN-FAM纳米复合物注射于荷瘤小鼠，其靶向肿瘤作用明显；给药8d后，NGR／L-PEI／ASODN静脉给药组和皮下给药组的肿瘤体积均明显小于生理盐水组和NGR／L-PEI／SODN组（均P〈0．05）；超微结构观察可见典型凋亡小体。结论NGR修饰、L-PEI介导下的hTERT ASODN可抑制EC9706细胞的增殖，降低其端粒酶的表达，还可有效到达裸鼠人食管癌移植瘤内，抑制肿瘤的生长。
王瑾张振中周天洋刘宇琼李惠翔
关键词：端粒酶逆转录酶反义寡核苷酸NGR
PBCA纳米粒介导的hTERT反义寡核苷酸对肺癌A549细胞周期和凋亡的影响被引量：2
2006年
目的以聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒(PBCA-NP s)作为端粒酶逆转录酶(hTERT)反义寡核苷酸(A-SODN)载体,转染肺癌A 549细胞,观察其对该细胞周期和凋亡的影响。方法PBCA-NP s携带hTERT A SODN转染A 549细胞后,绘制细胞生长曲线表达细胞生长状态的变化;流式细胞仪(FCM)检测细胞周期及细胞凋亡情况。结果A SODN转染后A 549细胞增殖减慢;FCM检测结果显示:A SODN转染后细胞周期变化明显,细胞被阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率明显增加。结论hTERT A SODN能有效改变A 549细胞的细胞周期,诱导细胞凋亡的发生。
付春景张艳艳黄幼田杨洪艳付旭东张振中
关键词：端粒酶逆转录酶反义寡核苷酸细胞周期
分枝型聚乙烯亚胺／寡核苷酸组装体的制备及细胞摄取研究被引量：2
2008年
目的制备分枝型聚乙烯亚胺(B-PEI)/反义寡核苷酸(ASON)超分子组装体(assembly)。方法分析(Zetasizer)组装体的粒径分布及Zeta电位,观察组装体的形态,单因素实验优化制备工艺条件。琼脂糖凝胶电泳分析组装体中ASON的包封率及组装体中ASON抗DNaseⅠ降解的能力。激光扫描共聚焦显微镜观察细胞的摄入情况。结果N/P(B-PEI含有氮原子的摩尔数/ASON含有磷原子的摩尔数)为4·0时制得粒径较小,Zeta电位较高的B-PEI/ASON超分子组装体,组装体呈球状,形态规则。N/P高于3·5时ASON的包封率接近100%,B-PEI/ASON超分子组装体荷载的有较强的抗酶解能力。共聚焦显微镜观察结果表明,组装体明显提高细胞对ASON的摄入率。结论B-PEI是一种组装能力强的多聚阳离子,B-PEI/ASON超分子组装体具有较好的物理化学性质,并能够显著增加细胞摄入率。
周天洋王瑾李惠翔张振中
关键词：反义寡核苷酸超分子组装体ZETA电位
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